Zeiss 激光掃描共聚焦顯微鏡 操作手冊

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1、Zeiss激光掃描共聚焦顯微鏡操作手冊目錄：?1系統(tǒng)的組成?系統(tǒng)組成及光路示意圖?實物照片說明?2系統(tǒng)的使用?2.1開機順序?2.2軟件的快速使用說明?2.3顯微鏡的觸摸屏控制?2.4關(guān)機順序?3系統(tǒng)的維護?1系統(tǒng)的組成?激光掃描共聚焦顯微鏡系統(tǒng)主要由：電動熒光顯微鏡、掃描檢測單元、激光器、電腦工作站及各相關(guān)附件組成。?系統(tǒng)組成及光路示意圖：?電腦工作站?激光器?電動熒光顯微鏡掃描檢測單元?實物照片說明：?電動熒光顯微鏡?掃描檢測單元?CO2培養(yǎng)系統(tǒng)控制器?激光器?電腦工作站?2系統(tǒng)的使用?2.1開機順序?（1）打開穩(wěn)壓電源（綠色按鈕）?等待2分鐘（電壓穩(wěn)定）后，再開其

2、它開關(guān)?（2）主開關(guān)[MAINSWITCH]“ON”?電腦系統(tǒng)[SYSTEMS/PC]“ON”?掃描硬件系統(tǒng)[COMPONENTS]“ON”?（3）打開[電動顯微鏡開關(guān)]?打開[熒光燈開關(guān)]?（注：具有5檔光強調(diào)節(jié)旋鈕）?（4）Ar離子激光器主開關(guān)“ON”?順時針旋轉(zhuǎn)鑰匙至“—”?預(yù)熱等待約15分鐘，?將激光器[扳鈕]由“Standby”扳至?“Laserrun”狀態(tài)，即可正常使用?（5）打開[電腦開關(guān)]，進入操作系統(tǒng)?注：鍵盤上也具有[電腦開關(guān)]?2.2軟件的快速使用說明?（1）電腦開機進入操作系統(tǒng)界面后，雙擊桌面共聚焦軟件ZEN圖標?（2）進入ZEN界面，彈出對話框

3、：?“StartSystem”——初始化整個系統(tǒng)，用于激光掃描取圖、分析等。?“ImageProcessing”——不啟動共聚焦掃描硬件，用于已存圖像數(shù)據(jù)的處理、分析。?（3）軟件界面：?1功能界面切換：掃描取圖（Acquisition）、圖像處理（Processing）、維護（Maintain）?（注：Maintain僅供Zeiss專業(yè)工程師使用）?2動作按鈕；3工具組（多維掃描控制）；4工具詳細界面；5狀態(tài)欄；6視窗切換按鈕；?7圖像切換按鈕；8圖像瀏覽/預(yù)掃描窗口；9文檔瀏覽/處理區(qū)域；10視窗中圖像處理模塊?動作按鈕：?Single——掃描單張圖片、并在圖像預(yù)覽

4、窗口顯示。?Start——開始掃描單張圖片或一個實驗流程（1組圖片，如XYZ、XYT等）。?Stop——暫停/結(jié)束掃描。?New——建立一個新圖像掃描窗口/文檔。?激光連接狀況檢查?眼睛觀察/相機/共聚焦LSM光路切換（ZEN軟件界面右上角）：?Ocular——通過觀察筒用眼睛觀察。（激光安全保護裝置自動阻斷激光、保護眼睛。）?Camera——光路切換至相機。?LSM——共聚焦掃描成像光路。?顯微鏡設(shè)置：?“Ocular”——>?“LightPath”——>?點擊物鏡圖標，選擇物鏡——>?樣品聚焦。?透射光控制（TransmittedLightControl）?反射光光

5、閘控制（ReflectedLightShutter）?熒光激發(fā)塊選擇（Reflector）?共聚焦LSM掃描設(shè)置?點擊“LSM”（ZEN軟件界面右上角），系統(tǒng)切換至共聚焦掃描光路：?光路設(shè)置：?SmartSetup——自動預(yù)設(shè)光路?選取“熒光探針”、“顏色”、掃描方法，?應(yīng)用“Apply”。?（注：Fastest為最快速掃描，多條激光譜線同時掃描。Bestsignal為最佳信號掃描，多條激光譜線順序掃描。Bestcompromise為兼顧速度與信號的折中式掃描。）?掃描圖像參數(shù)設(shè)置：?每個通道的精細調(diào)節(jié)：?包括：?（1）Pinhole的調(diào)節(jié)（一般設(shè)為1AU。該值越大，則

6、信號越強，但共聚焦圖像效果會降低。原則上，?在保證圖像質(zhì)量的前提下，該值越接近于1AU越好）；?（2）MasterGain的調(diào)節(jié)（增大則信號和噪音都增強，減小則信號和噪音均減小。原則上，在保證圖像質(zhì)量的前提下，Gain值越小越好）；?（3）DigitalOffset的調(diào)節(jié)（可扣除背景噪音，但標本信號也有一定程度的扣除。原則上，在保證圖像質(zhì)量的前提下，DigitalOffset值越接近于0越好）；?（4）DigitalGain的調(diào)節(jié)（增大則信號和噪音都增強，減小則信號和噪音均減小。原則上，在保證圖像質(zhì)量的前提下，Gain值越接近于1.0~1.2越好）；?（5）另外，對于每

7、個通道，需要靈活調(diào)節(jié)激光的強度（激光強度越高，則信號越強，但噪音也相應(yīng)增強，同時標本更容易被漂白或淬滅。原則上，在保證圖像質(zhì)量的前提下，激光強度越低越好。）?選擇可連續(xù)掃描、一邊預(yù)覽圖像效果、一邊精細調(diào)節(jié)各個通道的掃描參數(shù)。?如果預(yù)覽圖像的效果可以，則先“Stop”，再點擊“Single”或“Start”?即可完成圖像的掃描。?圖像的保存：?三種方法：?（1）“File”菜單下，“Save”?或者“SaveAS”。?（2）點擊右下角按鈕。?（3）點擊工具欄按鈕。?（如圖所示）?另外，通過“File”菜單下的“Export”，也可將圖像以其