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《纖維素酶制備水溶性殼聚糖的研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、纖維素酶制備水溶性殼聚糖的研究2011NO.6?156?SerialNo.231ChinaBrewingResearchReport,纖維素酶制備水溶性殼聚糖的研究王拮,鄭業(yè)燦,蔡廣志,楊亞楠(長春工業(yè)大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院,吉林長春130012)摘要:通過對溶液還原糖濃度以及黏度的測定研究了纖維素酶對殼聚糖的降解作用,探討了酶解過程中溫度,pH值以及反應(yīng)時間對纖維素酶降解殼聚糖的影響,對降解前后殼聚糖的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征并對其水溶性進(jìn)行了測試.結(jié)果表明,纖維素酶降解殼聚糖的最佳pH值為4.5,溫度為50%,隨著反應(yīng)時間的延長,殼聚糖溶液的黏度逐
2、漸降低;隨著殼聚糖分子量的降低,水溶性增強(qiáng),但是化學(xué)結(jié)構(gòu)沒有發(fā)生改變.關(guān)鍵詞:殼聚糖;纖維素酶;降解;水溶性中圖分類號:TS202.3文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:0254—5071(2011)06—0156—03Preparationofwater-solublechitosanwithcellulaseWANGZhe,ZHENGYecan,CAIGuangzhi,YANGYanan(InstituteofChemicalEngineenng,ChangchunUniversityofTechnology,Changchun130012,C
3、hina)Abstract:Thedegradationofchitosanbycellulasewasmonitoredbyreducingsugarconcentrationandviscosity.Factorsthataffecttheenzymatichy-drolysisofchitosanwerestudied.Thestructuresofdegradedchitosanwerecharacterized.ThecellulaseshowedoptimumdeploymerisationatpHval—He4.5and5
4、0~C.DifferentreactiontimesgavechitosanwithdifferentmolecularweiI曲ts.Thedecreaseofmolecularweightledtotransformationofcrystalstructureandtheincreaseofwatersolubility,butthechemicalstructuresofresidueswerenotmodified.Keywords:chitosan;cellulase;degradation;solubility殼聚糖是甲殼
5、素脫乙?；漠a(chǎn)物,廣泛應(yīng)用于生物,醫(yī)藥與食品等領(lǐng)域.與大分子量殼聚糖相比,低分子量的殼聚糖不僅具有良好的水溶性,易吸收,而且具有很強(qiáng)的生物活性,特別是分子量低于lxl0~的低聚糖具有獨(dú)特的生理活性和功能:良好的水溶性,保濕增濕性,抑菌抗菌作用,抗腫瘤及免疫促進(jìn)作用等,使其在保健食品[1_,生物醫(yī)藥【2J,化妝品【3J,醫(yī)療診斷和生物生理翻等方面具有獨(dú)特的應(yīng)用價值.殼聚糖降解方法包括化學(xué)降解法,酶降解法,物理降解法以及復(fù)合降解法嘲.化學(xué)降解法需要用到大量的化學(xué)試劑,對環(huán)境污染較大,而且反應(yīng)不容易控制.物理降解法成本相對較高,目前僅限于實(shí)驗(yàn)
6、室階段.而酶法降解能夠選擇性的切斷殼聚糖的B.1,4糖苷鍵,容易得到所需分子量范圍的殼聚糖,反應(yīng)專一性強(qiáng),不會引起結(jié)構(gòu)的破壞,反應(yīng)條件溫和而且不需要加入大量的反應(yīng)試劑,對環(huán)境污染較少.目前,已發(fā)現(xiàn)有30多種專一性酶或非專一性酶可用于殼聚糖的降解反應(yīng)m,從而生成各種分子量的低分子量殼聚糖.纖維素酶作為非專一性酶價格低廉,而且容易找到.因此,用纖維素酶代替成本昂貴的專一性酶降解殼聚糖成為時下研究的熱點(diǎn).1材料與方法1.1儀器與材料UV.1800紫外分光光度計(jì)(上海島津),Bio—RadWin.型傅立葉紅外光譜儀(上海島津),PHS型數(shù)字酸度
7、計(jì)(杭州雷磁分析儀器廠),HZQ—F100恒溫振蕩培養(yǎng)箱(哈爾濱東聯(lián)電子技術(shù)開發(fā)有限公司),DZG一6050真空干燥箱(杭州卓馳儀器有限公司),85.1磁力攪拌器(上海志威電器有限公司),PL303電子天平(梅特勒.托利多儀器有限公司).殼聚糖(分子量6.8xl0Su,青島海生生物工程有限公司),纖維素酶(上海三杰生物技術(shù)有限公司,酶活力30U/mg),其他試劑均為分析純.1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1殼聚糖的酶解稱取2g殼聚糖溶于0.2mol/L的HAc.NaAc緩沖溶液,配成1%的殼聚糖溶液,待完全溶解后置于恒溫槽中,恒溫后,向殼聚糖溶液
8、中加入20mL纖維素酶酶液進(jìn)行降解反應(yīng).待反應(yīng)結(jié)束后,將反應(yīng)液置于沸水浴中煮沸5min,使酶失活,減壓抽濾脫去酶,用2mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)其pH值至中性,用大量的乙醇對其沉淀,洗滌,抽濾,真空干燥,
