葡萄球菌誘導(dǎo)型克林霉素耐藥的檢測.doc

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1、葡萄球菌誘導(dǎo)型克林霉素耐藥的檢測作者：胡淑玲　李亞娥　張利俠　謝龍　歸巧娣【摘要】目的：通過檢測葡萄球菌誘導(dǎo)型克林霉素耐藥，為臨床提供比較可靠的藥敏狀況，指導(dǎo)用藥。方法：應(yīng)用生物－梅里埃－VETEK全自動微生物分析系統(tǒng)、API細(xì)菌鑒定系統(tǒng)鑒定細(xì)菌，GPS及KB法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。根據(jù)NCCLS2004年版“增加對檢測誘導(dǎo)克林霉素耐藥的注釋”對紅霉素耐藥菌進(jìn)行D試驗(yàn)。結(jié)果：金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)型克林霉素耐藥占17%，凝固酶陰性葡萄球菌誘導(dǎo)型克林霉素耐藥占24%。結(jié)論：檢測葡萄球菌誘導(dǎo)型克林霉素耐藥，避免盲目使用克林霉素而導(dǎo)致治療失敗，防止將大環(huán)內(nèi)酯類耐藥誤認(rèn)為克林霉素耐藥而失去克林霉素的治療機(jī)

2、會?！娟P(guān)鍵詞】葡萄球菌；誘導(dǎo)型耐藥；紅霉素；克林霉素葡萄球菌是臨床常見的引起化膿性甚至全身性感染的致病菌，大環(huán)內(nèi)酯類、林可酰胺類和鏈陽菌素類B(MLSB)抗生素是廣泛應(yīng)用于治療葡萄球菌感染的抗生素，尤其是克林霉素和鏈陽菌素類常用來治療嚴(yán)重的葡萄球菌等細(xì)菌感染并作為對青霉素過敏的首選替代藥物。但在紅霉素耐藥而克林霉素敏感時(shí)，克林霉素有可能存在誘導(dǎo)型耐藥，須經(jīng)誘導(dǎo)克林霉素耐藥試驗(yàn)(D試驗(yàn))測定，才能為臨床提供比較可靠的藥敏狀況，以便指導(dǎo)用藥。　　1材料和方法　　1.1菌株來源　　我院2006年1月1日至2006年12月31日臨床各種標(biāo)本中分離的金黃色葡萄球菌105株和凝固酶陰性葡萄球菌135

3、株?！　?.2細(xì)菌鑒定　　應(yīng)用生物－梅里埃－VETEK全自動微生物分析系統(tǒng)、API細(xì)菌鑒定系統(tǒng)鑒定細(xì)菌，GPS及KB法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)?！　?.3D試驗(yàn)　　根據(jù)NCCLS2004年版“增加對檢測誘導(dǎo)克林霉素耐藥的注釋”對紅霉素耐藥的葡萄球菌進(jìn)行D試驗(yàn)?！　?結(jié)果3　　105株金黃色葡萄球菌中對紅霉素和克林霉素均敏感的有29株，占28%，對紅霉素和克林霉素均耐藥(結(jié)構(gòu)型)的有55株，占52%，紅霉素耐藥而克林霉素敏感(D試驗(yàn)陰性)(泵出型)的有3株，占3%，誘導(dǎo)型克林霉素耐藥的金黃色葡萄球菌(D試驗(yàn)陽性)18株，占17%。135株凝固酶陰性葡萄球菌對紅霉素和克林霉素均敏感為20株，占15%，

4、對紅霉素和克林霉素均耐藥(結(jié)構(gòu)型)有68株，占50%，紅霉素耐藥而克林霉素敏感(D試驗(yàn)陰性)(泵出型)的有15株，占11%，誘導(dǎo)型克林霉素耐藥的凝固酶陰性葡萄球菌(D試驗(yàn)陽性)32株，占24%。　　3討論　　大環(huán)內(nèi)酯類、林可酰胺類和MLSB抗生素通過與細(xì)菌核糖體結(jié)合來抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成，因革蘭陰性(G-)菌對MLSB具有天然耐藥，所以MLSB主要用于治療葡萄球菌感染。其中大環(huán)內(nèi)酯類包括紅霉素、克拉霉素(甲基紅霉素)、羅紅霉素和阿奇霉素，林可酰胺類包括克林霉素和林可霉素。葡萄球菌對MLSB的耐藥機(jī)制是由于核糖體靶位蛋白的改變及外排蛋白的泵出機(jī)制，核糖體靶位蛋白的改變分為結(jié)構(gòu)型耐藥和誘導(dǎo)型耐

5、藥。結(jié)構(gòu)型耐藥是細(xì)菌erm基因編碼一種改變了的核糖體結(jié)構(gòu)(23SrRNA甲基化)而導(dǎo)致對紅霉素、克林霉素和鏈陽菌素B全部耐藥，用標(biāo)準(zhǔn)的常規(guī)藥敏試驗(yàn)方法和肉湯稀釋方法即能測出。而誘導(dǎo)型耐藥的藥敏表型是紅霉素耐藥、鏈陽菌素B耐藥而克林霉素敏感，如果簡單地報(bào)告克林霉素敏感將耽誤患者病情，此時(shí)應(yīng)做D試驗(yàn)，即在紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)時(shí)，距15μg紅霉素紙片邊緣15mm~26mm處放置含2μg克林霉素的紙片進(jìn)行檢測，孵育后，克林霉素抑菌圈不出現(xiàn)“截平”現(xiàn)象，即D試驗(yàn)陰性，細(xì)菌對克林霉素敏感，鄰近紅霉素紙片側(cè)克林霉素抑菌圈出現(xiàn)“截平”現(xiàn)象，即D試驗(yàn)陽性，提示存在可誘導(dǎo)的克林霉素耐藥，應(yīng)報(bào)告細(xì)菌對克林霉素耐

6、藥，同時(shí)注明“通過誘導(dǎo)克林霉素耐藥試驗(yàn)，推測此菌株對克林霉素耐藥，在某些患者中克林霉素可能仍有效”［1］。誘導(dǎo)型耐藥是用強(qiáng)誘導(dǎo)劑(紅霉素)進(jìn)行紙片擴(kuò)散誘導(dǎo)試驗(yàn)即可誘導(dǎo)產(chǎn)生耐藥。結(jié)構(gòu)型耐藥和誘導(dǎo)型耐藥均由erm基因編碼，msrA基因編碼外排蛋白(泵出型)導(dǎo)致對大環(huán)內(nèi)酯類和鏈陽菌素B的耐藥性，但對克林霉素敏感［2］。本研究提示誘導(dǎo)型耐藥的測定對于葡萄球菌感染的治療可給臨床提供重要的參考依據(jù)，它不僅可以避免盲目使用克林霉素而導(dǎo)致治療失敗，也可以防止因絕對地認(rèn)為所有大環(huán)內(nèi)酯類耐藥作為克林霉素耐藥而失去克林霉素有效治療葡萄球菌感染患者的機(jī)會［3，4］。本次調(diào)查結(jié)果金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)型克林霉素耐藥占

7、17%，凝固酶陰性葡萄球菌誘導(dǎo)型克林霉素耐藥占24%，與文獻(xiàn)［2］報(bào)道有差異，可能細(xì)菌的耐藥性與地區(qū)有關(guān)?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】　?。?］陳民均.美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會2004年版有關(guān)藥敏試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化更新要點(diǎn)［J］.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2004，27：608610.　?。?］俞蓮花，胡大康，吳高偉，等.葡萄球菌對紅霉素耐藥菌株的檢測與分析［J］.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006，29：368368.　　［3］FiebelkornKR,Crawf