葡萄球菌對克林霉素誘導耐藥的檢測和分析

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1、葡萄球菌對克林霉素誘導耐藥的檢測和分析謝筱莉林群英(江西省南昌縣人民醫(yī)院檢驗科330200)【摘要】目的:調(diào)查臨床分離的葡萄球菌對克林霉素誘導耐藥狀況。方法:收集木院2012-2013年分離到的47株紅霉素耐藥、克林霉素敏感臨床分離株,按美國國家臨床實驗室標準化研究所(CLSI/NCC⑸2004年推薦的雙紙片法做克林霉素誘導耐藥(D?試驗)。結(jié)果:47株葡萄球菌中克林霉素誘導耐藥株16(34%)0結(jié)論:我院葡萄球菌克林霉素誘導耐藥率較高,應(yīng)提高對誘導耐藥葡萄球菌的監(jiān)測和控制?!娟P(guān)鍵詞】克林霉素紅霉素葡萄球菌D試驗【中圖分類號】R969【文獻標識碼】A【

2、文章編號】1672-5085(2014)16-0150-01隨著抗牛素的不斷發(fā)展和大量使用,葡萄球菌對克林霉素在體外敏感,但臨床無效的病例不斷上升。多數(shù)葡萄球菌屬對大環(huán)內(nèi)酯類耐藥的機制是靶位的改變和外排泵機制。msrA基因編碼對大環(huán)內(nèi)酯類耐藥是產(chǎn)生一種外排泵;erm基因編碼使細菌核糖體23SRNA大亞基2058位的腺昔酸甲?;鸬?,造成細菌核糖體對大環(huán)內(nèi)酯類一林可霉素一鏈陽菌素B(MLSB)類藥物的親和力降低,對克林霉素產(chǎn)牛誘導耐藥,同時也對鏈陽菌素B耐藥,因此也稱為大環(huán)內(nèi)酯類一林可霉素一鏈陽菌素B(MLSB)耐藥;少數(shù)是產(chǎn)牛大環(huán)內(nèi)酯類抗牛素磷酸轉(zhuǎn)移

3、酶,使抗牛素失活。檢測葡萄球菌的克林霉素誘導耐藥率可以指導臨床合理的經(jīng)驗用藥和了解流行情況。1材料與方法1.1材料1.1.1菌株收集江西省南昌縣人民醫(yī)院2012年1月年12月紅霉素耐藥、克林霉素敏感臨床分離株47株,其中金葡菌11株,凝固酶陰性葡萄球菌36株。標本種類包括痰液、咽拭子、膿液。1.1.2試劑葡萄球菌的細菌鑒定為杭州天和微生物試劑有限分司;藥敏試驗培養(yǎng)基為MH培養(yǎng)基(江門凱林貿(mào)易公司);克林霉索、紅霉索紙片(英國BBL公司產(chǎn)品)。1.1.3方法:雙紙片法檢測出克林霉素誘導耐藥(D試驗):根據(jù)2004年NCCLS[推薦在MH瓊脂培養(yǎng)基上貼克林

4、霉素(2μg/Jt)紙片和紅霉素(15μg/片)紙片,紙片邊緣距離為16?26mm,孵育16?18h。D試驗陽性結(jié)果是克林霉素抑菌圈在靠近紅霉素的一邊出現(xiàn)鈍化,抑菌圈呈現(xiàn)“D型”,顯示為誘導耐藥。1結(jié)果2.1雙紙片法檢測出克林霉素誘導耐藥結(jié)果從2012.1-2013.12期間分離到的紅霉素耐藥、克林霉素敏感47株臨床分離株中12株為金黃色葡萄球菌、35株為凝固酶陰性葡萄球菌(見下表)。D試驗陽性的分別為5株和11株,用x2修正檢驗得出在P=0.05的水平上,兩者有統(tǒng)計學差異。誘導耐藥在金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌中的分布具有差異性。2

5、.2葡萄球菌克林霉素誘導耐藥的檢測結(jié)果如下表:TestresultStaphylococcusCoagulase-negtiveaureus(12)staphylococus(35)Dtest(+)511Dtest(-)724x2=4.164P=0.0372討論克林霉素具有口服吸收好,對胃腸道刺激小,對腎臟沒有不良作用,適用于治療葡萄球菌感染,特別用于治療皮膚和軟組織感染以及青霉素類過敏的社區(qū)感染病人。由于耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)具有的多重耐藥基因,克林霉素誘導耐藥多發(fā)生在甲氧西林敏感的葡萄球菌(MSS)中。因此在MSS的藥敏結(jié)果中,對紅霉素耐藥而

6、克林霉素中敏或敏感的菌株,不能直接報告“克林霉素敏感”,必須進行D?試驗,以排除誘導型耐藥引起的臨床治療失?。辉贛RS中,由于不能完全排除克林霉素誘導耐藥的存在,對紅霉索耐藥而克林霉素中敏或敏感的菌株,可以根據(jù)臨床的需要,做克林霉素的D?試驗。誘導耐藥的漏檢會造成臨床治療的失敗,目前微量稀釋法和自動化藥敏儀尚不能檢出此種誘導耐藥機制,D試驗做為一種表型初篩方法,雖然靈敏度低和有假陰性的存在,尚不能與基因檢測結(jié)果完全符合,但其做為-?種檢測克林霉素誘導耐藥的方法對于常規(guī)實驗室非常重要,2004年NCCLS,建議對紅霉素耐藥、克林霉素中敏或敏感的葡萄球菌必

7、須做D試驗。紙片邊緣距離對結(jié)果的影響非常明顯,紙片距離在16?20mm之間的D圈明顯比20?26mm組產(chǎn)生的D圈更為清晰,在26-28mm組之間會造成漏檢。參考文獻[1]NCCLS.Performancestandardsforantimicrobialsusceptibilitytesting[S].14thinformationalsupplementM100-S14,2004,24;40-47.[2]薛作英,陸惠香,范偉偉.克林霉素的臨床運用卩]?中醫(yī)藥臨床雜志,2004,3:291-291.

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