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1、葡萄球菌對(duì)克林霉素誘導(dǎo)型耐藥的檢測(cè)與分析曲海霞(遼寧省瓦房店市第三醫(yī)院檢驗(yàn)科遼寧瓦房店M6300)【中圖分類(lèi)號(hào)】R917【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1672-5085(2010)26-0140-01【關(guān)鍵詞】葡萄球菌克林霉素耐藥D■試驗(yàn)了解我院臨床分離的葡萄球菌對(duì)紅霉素及克林霉素誘導(dǎo)型耐藥的發(fā)牛率,幫助臨床醫(yī)師正確選擇MLSB藥物。葡萄球菌對(duì)紅霉素和克林霉素的耐藥呈明顯上升趨勢(shì),且出現(xiàn)誘導(dǎo)型克林霉素耐藥的菌株[1]。我們對(duì)臨床分離到的葡萄球菌進(jìn)行了紅霉素、克林霉素耐藥的檢測(cè),報(bào)告如下。1材料和方法1.1菌株試驗(yàn)菌株為木院2008年?2009年臨床分離到的金
2、黃色葡萄球菌(SA)44株,凝固酶陰性的葡萄球菌(CNS)154株。所有菌株均經(jīng)ATBExpression細(xì)菌分析儀鑒定確認(rèn)。紙片法藥敏試驗(yàn)的質(zhì)控菌株為ATCC25923金黃色葡萄球菌。1.2儀器與試劑35°C恒溫箱,ATBExpression細(xì)菌分析儀、ID32STAPH細(xì)菌鑒定卡(牛物梅里埃公司),紅霉素藥敏紙片(15μg).克林霉素藥敏紙片(2μg)(Oxoid公司),瓊脂(杭州天河)。1.3方法采用K-B紙片瓊脂擴(kuò)散法檢測(cè)葡萄球菌對(duì)紅霉素和克林霉素的耐藥性,按照2004NCCLS推薦的D■試驗(yàn)方法檢測(cè)克林霉素誘導(dǎo)型耐藥。0.5麥?zhǔn)蠁挝坏?/p>
3、菌液均勻涂布于4mm厚度的M-H平板上,紅霉素和克林霉素藥敏紙片邊緣之間的距離為15?26mm,35°C培養(yǎng)16?18h,結(jié)果判斷據(jù)2004NCCLS關(guān)于紅霉素14?22mm、克林霉素15?20mm的判斷標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)紅霉素耐藥而克林霉素敏感的菌株鄰近紅霉素一邊的克林霉素抑菌圈出現(xiàn)截平現(xiàn)象(大寫(xiě)D樣),為D■試驗(yàn)陽(yáng)性,即誘導(dǎo)型克林霉素耐藥。不出現(xiàn)截平現(xiàn)象的為D■試驗(yàn)陰性,即非誘導(dǎo)型克林霉素耐藥。2結(jié)果2.1198株葡萄球菌對(duì)紅霉素和克林霉素耐藥試驗(yàn)結(jié)果注:Er:紅霉素CI:克林霉素;S儆感;R:耐藥;SA:金黃色葡萄球菌;CNS:凝固酶陰性葡萄球菌。2.2D■試
4、驗(yàn)結(jié)果.注:Er:紅霉素CI:克林霉素;S儆感R:耐藥;SA:金黃色葡萄球菌;CNS:凝固酶陰性葡萄球菌。3討論目前,葡萄球菌是引起院內(nèi)和社區(qū)感染,甚至全身感染的常見(jiàn)病原菌。對(duì)甲氧西林產(chǎn)生耐藥的葡萄球菌(MRS)可同吋對(duì)β內(nèi)酰胺類(lèi)、酶抑制劑復(fù)合抗生素及碳青霉烯類(lèi)抗生素耐藥。因此,臨床醫(yī)生在治療由MRS引起的感染時(shí),轉(zhuǎn)而考慮使用大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)如紅霉素,林可酰胺類(lèi)如克林霉素和β(族)鏈陽(yáng)霉素如奎奴普丁,即MLSB類(lèi)抗生素,特別是治療皮膚和軟組織感染以及某些青霉素和頭抱菌素過(guò)敏的患者。但研究發(fā)現(xiàn),耐甲氧西林的葡萄球菌可同時(shí)對(duì)MLSB類(lèi)抗生素表現(xiàn)耐
5、藥,而且紅霉素具有誘導(dǎo)克林霉素耐藥的作用。葡萄球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素耐藥的機(jī)制有2種,一是由msrA基因介導(dǎo)的泵出機(jī)制,此型表現(xiàn)為紅霉素耐藥,克林霉素敏感,D■試驗(yàn)陰性;二是erm基因介導(dǎo)的核糖體靶位改變,可分為核糖體結(jié)構(gòu)型變異和核糖體可誘導(dǎo)型變異。誘導(dǎo)型表現(xiàn)是紅霉素耐藥而克林霉素敏感,D■試驗(yàn)陽(yáng)性;結(jié)構(gòu)型通常的耐藥表現(xiàn)是紅霉素和克林霉素都耐藥。其對(duì)克林霉素敏感耐藥是暴露于人環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物后誘導(dǎo)的,稱(chēng)為誘導(dǎo)型克林霉素耐藥。誘導(dǎo)型克林霉素耐藥用標(biāo)準(zhǔn)K?B法無(wú)法檢測(cè),需借助D?試驗(yàn)才能檢測(cè)出。D■試驗(yàn)陽(yáng)性葡萄球菌在單紙片擴(kuò)散法中紅霉素耐藥、克林霉素敏感吋,有71
6、.4%的金黃色葡萄球菌和44.9%的凝固酶陰性葡萄球菌對(duì)克林霉素具有誘導(dǎo)耐藥性。與沈定霞[2]等報(bào)道的金黃色葡萄球菌67.3%可誘導(dǎo)耐藥性,CNS中45.3%的誘導(dǎo)發(fā)生率稍有差異,考慮與誘導(dǎo)型克林霉素耐藥存在地區(qū)性差異有關(guān)。另外金黃色葡萄球菌可誘導(dǎo)耐藥發(fā)生率較CNS高,這與國(guó)外文獻(xiàn)[3]報(bào)道一致。參與文獻(xiàn)⑴劉歡樂(lè),周鐵麗?克林霉素誘導(dǎo)型耐藥葡萄球菌的檢測(cè)與分析[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2005,23(5):137-338.⑵沈定霞,羅燕萍,徐雅萍,等?葡萄球菌對(duì)紅霉素和克林霉素的誘導(dǎo)性耐藥研究[j].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2005,28:400-402.[3]Fi
7、ebelkornKR,CranfordSA,McElmeelML,etal.PracticaldiskdiffusionmethodfordetectionofinducibleclindamycinresistaneeinStaphylococcusaureusandcoagulase-negativestaphylcocci[j].JClinMicrobiol,2003,41(10):4740-4744.