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1、葡萄球菌屬紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥性檢測(cè)【關(guān)鍵詞】葡萄球菌屬;紅霉素;克林霉素;誘導(dǎo)耐藥 目前,葡萄球菌是引起院內(nèi)和社區(qū)感染,甚至全身感染的常見(jiàn)病原菌。對(duì)甲氧西林產(chǎn)生耐藥的葡萄球菌(MRS)可同時(shí)對(duì)β內(nèi)酰胺類(lèi)、酶抑制劑復(fù)合抗生素及碳青霉烯類(lèi)抗生素耐藥。因此,臨床醫(yī)生在治療由MRS引起的感染時(shí),轉(zhuǎn)而考慮使用大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)(macrolides)如紅霉素,林可酰胺類(lèi)(lincosamides)如克林霉素和β(族)鏈陽(yáng)霉素(streptogramintypeβ)如奎奴普丁,即MLSB類(lèi)抗生素,特別是治療皮膚和軟組織感染以及某些青霉素過(guò)敏的患者。但研究
2、發(fā)現(xiàn),耐甲氧西林的葡萄球菌可同時(shí)對(duì)MLSB類(lèi)抗生素表現(xiàn)耐藥,而且紅霉素具有誘導(dǎo)克林霉素耐藥的作用。本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用雙紙片法檢測(cè)可誘導(dǎo)克林霉素耐藥,從中了解醫(yī)院可誘導(dǎo)克林霉素耐藥的發(fā)生率,以指導(dǎo)臨床合理使用抗生素?! ?材料和方法 1.1菌株臨床菌株為我院自2004年7月~2005年9月從臨床送檢各類(lèi)標(biāo)本中分離的金黃色葡萄球菌225株,凝固酶陰性的葡萄球菌167株。標(biāo)準(zhǔn)菌株用金黃色葡萄球菌ATCC25923作為紙片法藥敏實(shí)驗(yàn)的質(zhì)控菌?! ?.2抗生素紙片和培養(yǎng)基紅霉素紙片(15μg)和克林霉素紙片(2μg)均購(gòu)自O(shè)xoid公司,培養(yǎng)基為購(gòu)買(mǎi)杭州天
3、和的營(yíng)養(yǎng)瓊脂干粉實(shí)驗(yàn)室自行配制4mm厚的平皿?! ?.3藥敏試驗(yàn)K-B紙片法藥敏試驗(yàn)按NCCLS規(guī)程操作,菌液濃度為0.5麥?zhǔn)蠁挝?。使用?shí)驗(yàn)室配制4mm厚度的MH平板。兩種紙片邊緣的距離為15mm,35℃孵育16~18h,結(jié)果判讀根據(jù)NCCLS2005年關(guān)于紅霉素14~22mm,克林霉素15~20mm的判斷標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)克林霉素紙片的抑菌環(huán)在靠近紅霉素紙片一側(cè)出現(xiàn)平截現(xiàn)象,即克林霉素紙片的抑環(huán)看似一大寫(xiě)的D時(shí),判為D試驗(yàn)陽(yáng)性或紅霉素對(duì)克林霉素具有誘導(dǎo)作用。當(dāng)紅霉素和可林霉素均耐藥時(shí)為持續(xù)性耐藥,菌株對(duì)紅霉素耐藥而可林霉素敏感,D實(shí)驗(yàn)陰性時(shí)為MS表
4、型。 2結(jié)果 2.1葡萄球菌屬對(duì)紅霉素和克林霉素的敏感性金黃色葡萄球菌中,57.33%(129/225)對(duì)紅霉素敏感,63.11%(142/225)對(duì)克林霉素敏感。在凝固酶陰性的葡萄球菌中,13.77%(23/167)對(duì)紅霉素敏感,34.13%(57/167)對(duì)克林霉素敏感,見(jiàn)表1?! ”?葡萄球菌對(duì)紅霉素、克林霉素的敏感株數(shù)(略) 注:MRSA:耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌;MSSA:對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌;MRS:耐甲氧西林的凝固酶陰性的葡萄球菌;MSS:對(duì)甲氧西林敏感的凝固酶陰性的葡萄球菌;S.a(chǎn)ureus:金黃色葡萄球菌
5、;S:凝固酶陰性的葡萄球菌 2.2葡萄球菌屬對(duì)紅霉素和克林霉素耐藥的不同表型在表2中,225株金黃色葡萄球菌中39株(17.33%)持續(xù)性耐藥,45株(20.00%)是可誘導(dǎo)性耐藥,MS表型12株(5.33%),對(duì)紅霉素、可林霉素均敏感的為127株(57.33%)。在凝固酶陰性的葡萄球菌中,61株(27.11%)是持續(xù)性耐藥,49株(29.34%)是可誘導(dǎo)性耐藥,MS型有34株(15.11%),對(duì)紅霉素、克林霉素均敏感的有23株(10.22%)?! ”?葡萄球菌MLSB耐藥表型(略) 注:Er-R:紅霉素耐藥;Er-S:紅霉素敏感;Cl
6、-R:克林霉素耐藥;Cl-S:克林霉素敏感 在本試驗(yàn)中,可誘導(dǎo)耐藥的發(fā)生率在金黃色葡萄球菌中是20%,在S中是29.3%,與沈定霞[2]等報(bào)道的金黃色葡萄球菌67.3%可誘導(dǎo)耐藥性,S中45.3%的誘導(dǎo)發(fā)生率或是與應(yīng)春妹[3]等報(bào)道的金黃色葡萄球菌66%~67%的誘導(dǎo)耐藥,S可誘導(dǎo)耐藥36%的發(fā)生率相比,都有很大的差距,其原因可能是筆者所統(tǒng)計(jì)的醫(yī)院其檢測(cè)標(biāo)本主要來(lái)自于兒童,而上述兩篇報(bào)道統(tǒng)計(jì)的醫(yī)院都是綜合性的醫(yī)院,其病人成年人居多,因病源的不同造成的差距,至于兒童病人相互之間的對(duì)比,還有待于進(jìn)一步查證?! ∽鯠試驗(yàn)的目的是檢測(cè)克林霉素的可
7、誘導(dǎo)耐藥性,對(duì)于那些感染了MLSB菌株的病人,避免不適當(dāng)?shù)氖褂每肆置顾卦斐芍委熓 6褜?duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)耐藥的菌株當(dāng)成對(duì)克林霉素耐藥,就使那些感染了只對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)耐藥菌株的病人失去了用克林霉素治療的機(jī)會(huì)[4]。而且,克林霉素是治療由葡萄球菌引起的皮膚和軟組織感染較有效的藥物,對(duì)組織的穿透能力強(qiáng),對(duì)腎臟無(wú)不良作用,而且克林霉素口服時(shí)吸收效果好,可用于治療門(mén)診病人和靜脈給藥后的鞏固治療,還可以作為對(duì)青霉素過(guò)敏病人的替代藥物[5]?! ≡趯?duì)葡萄球菌的菌株作藥物敏感試驗(yàn)時(shí),要加做D試驗(yàn),才能檢測(cè)可誘導(dǎo)克林霉素耐藥,提示臨床醫(yī)生合理用藥。D實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)單易行,
8、并且容易觀察耐藥表型。但應(yīng)該注意的是在做D試驗(yàn)時(shí),應(yīng)根據(jù)NCCLS規(guī)定,紅霉素和克林霉素一定要放在相鄰的位置且紙片邊緣保持一定的距離如15~20mm,否則,將會(huì)產(chǎn)生錯(cuò)誤的結(jié)果,造