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1、克林霉素誘導(dǎo)實驗在金黃色葡萄球菌藥敏實驗中應(yīng)用摘要:目的:金黃色葡萄球菌是引起醫(yī)院感染的重要致病菌,特別是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)逐年上升,使葡萄球菌對各種抗生素產(chǎn)生多重耐藥。本實驗通過對金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)型克林霉素耐藥的研究,為臨床使用紅霉素和克林霉素提供可靠的實驗依據(jù)。方法:應(yīng)用MicroscanWalkaway-96微生物鑒定和藥敏系統(tǒng)鑒定MRSA和MSSA.K.B法進行藥敏試驗。根據(jù)NCCLS2004年版“增加對檢測誘導(dǎo)克林霉素耐藥的注釋”對紅霉素耐藥克林霉素敏感菌進行D試驗并對耐藥情況進行分析。[1]結(jié)果:242例金
2、黃色葡萄球菌,MRSA占42%(101/242),MSSA占58%(142/242),紅霉素和克林霉素耐藥率分別為78.5%(191/242)、60.7(147/242)%,對兩者同時耐藥(結(jié)構(gòu)型MLS耐藥)的菌株占60.7%(147/242),克林霉素誘導(dǎo)耐藥(D-試驗陽性)菌株占所檢測菌株的14.9(36/242)%,D實驗陽性率為83.7%(36/43)o結(jié)論:臨床應(yīng)常規(guī)檢測金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)型克林霉素耐藥,避免盲目使用克林霉素而導(dǎo)致治療失敗,同時防止將大環(huán)內(nèi)酯類藥物耐藥誤認為克林霉素耐藥而失去使用克林霉素治療的機會。關(guān)鍵詞:金黃色
3、葡萄球菌紅霉素克林霉素耐藥D-試驗【中圖分類號】R4【文獻標識碼】A【文章編號]1671-8801(2013)03-0020-01金黃色葡萄球菌是引起醫(yī)院感染的重要致病菌,特別是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的逐年上升,使葡萄球菌對各種抗生素產(chǎn)生多重耐藥。大環(huán)內(nèi)酯類和林可酰胺類是兩類在功能上非常相近的抗生素,常被用于青霉素過敏患者葡萄球菌感染的治療,其中克林霉素由于其組織滲透性強、價格低和可口服等特點,成為一些對青霉素過敏患者金黃色葡萄球菌感染,特別是皮膚軟組織感染者的一種常規(guī)選擇。但是對大環(huán)內(nèi)酯類和林可酰胺類的獲得耐藥性在葡萄球菌
4、中是很普遍的。[2]由于目前臨床實驗室常用的自動化鑒定儀不能檢測出誘導(dǎo)型耐藥,從而會誤導(dǎo)臨床使用克林霉素,導(dǎo)致治療無效。若將紅霉素耐藥菌株均判斷為克林霉素耐藥,則會限制克林霉素的使用。本實驗通過對242例金黃色葡萄球菌耐藥情況的分析,了解金黃色葡萄球菌中MRSA和MSSA各自所占比例及可誘導(dǎo)克林霉素耐藥的發(fā)生率,以便更好的指導(dǎo)臨床醫(yī)生合理使用抗生素。1材料與實驗方法1.1菌株來源。實驗菌株為巴州人民醫(yī)院2010年11月至2012年3月臨床分離并經(jīng)冷凍保存所得,同一患者多次分離到的同一菌株不重復(fù)計入,所有菌株均經(jīng)MicroscanWalka
5、way-96微生物鑒定和藥敏系統(tǒng)進行鑒定。其中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)101株,甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(MSSA)141株。1.2質(zhì)控菌株。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC25923o1.3材料。M—H瓊脂購自美國BD公司,配置4mm厚平皿4*冷藏待用藥敏紙片紅霉素(15ug/片)、克林霉素(2ng/片)為ED公司產(chǎn)品。1.4藥敏試驗。采用K-B瓊脂擴散法檢測試驗菌株對紅霉素和克林霉素的耐藥性,判定標準為美國臨床實驗室標準委員會(NCCLS)2004年紙片擴散法標準,試驗菌株均為紅霉素耐藥而克林霉素敏感株。[3]1.5D-
6、試驗。依據(jù)美國臨床實驗室標準委員會(NCCLS)2004年推薦的方法進行操作,將0.5麥氏單位的葡萄球菌懸液均勻涂布于M?H瓊脂平板上,間隔15mm貼上紅霉素和克林霉素紙片[4],35匸孵育18?24h后觀察細菌是否誘導(dǎo)產(chǎn)生克林霉素耐藥。2實驗結(jié)果金黃色葡萄球菌對紅霉素和克林霉素藥敏試驗結(jié)果:242株金黃色葡萄球菌中,MRSA101株,占42%(101/242),MSSA141株,占58%(141/242);101株MRSA中紅霉素耐藥率為90%(91/101)、克林霉素耐藥率為81%(82/101),紅霉素耐藥、克林霉素敏感為9%(9/
7、101),紅霉素和克林霉素同時耐藥率為81%(82/101),同時敏感率為10%(10/101):141株MSSA中紅霉素耐藥率為70%(99/141)、克林霉素耐藥率為46%(65/141),紅霉素耐藥、克林霉素敏感為24%(34/141);紅霉素和克林霉素同時耐藥者為46%(65/141),同時敏感率為30%(42/141)o從統(tǒng)計結(jié)果可以看出:在臨床實驗中MSSA紅霉素與克林霉素同時耐藥率為46%,而MRSA則表現(xiàn)出更高的耐藥性,其紅霉素與克林霉素同時耐藥率高達81%。43株紅霉素耐藥而克林霉素敏感金黃色葡萄球菌進行D實驗的結(jié)果:D
8、實驗總陽性率為83.7%o其中MRSA9株D試驗陽性率為66.7%,MSSA34株D實驗陽性率為88.2%。3結(jié)論本實驗及許多國內(nèi)外的研究結(jié)果表明,金黃色葡萄球菌對克林霉素誘導(dǎo)耐藥率很高。而M