青蒿琥酯對(duì)慢性濕疹患者外周血淋巴細(xì)胞功能的影響.doc

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1、青蒿琥酯對(duì)慢性濕疹患者外周血淋巴細(xì)胞功能的影響作者：郭慶　米向斌　曾凡欽　羅益金　　【摘要】目的初步探討青蒿琥酯對(duì)慢性濕疹患者外周血Th1、Th2細(xì)胞表達(dá)和IgE水平的影響。方法慢性濕疹患者外周血T淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)與不同濃度的青蒿琥酯體外培養(yǎng)后，采用ELISA方法檢測(cè)其上清液IgE水平；用流式細(xì)胞儀方法測(cè)定其Th1、Th2細(xì)胞的變化。結(jié)果①青蒿琥酯可以抑制慢性濕疹患者外周血淋巴細(xì)胞Th1細(xì)胞的表達(dá)，促進(jìn)慢性濕疹患者外周血淋巴細(xì)胞Th2細(xì)胞的表達(dá)，而且呈現(xiàn)一定的劑量依賴性；②青蒿琥酯可以抑制慢性濕疹患者外周血淋巴細(xì)胞的IgE分泌。結(jié)論青蒿琥酯可以通過(guò)調(diào)節(jié)慢性濕疹外周

2、血患者淋巴細(xì)胞Th1、Th2細(xì)胞表達(dá)，減少IgE的分泌。青蒿琥酯有望成為治療慢性濕疹的一個(gè)新的藥物選擇。　　【關(guān)鍵詞】青蒿琥酯；慢性濕疹；淋巴細(xì)胞　　　　【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofartesunateonTcellfunctionfromchroniceczemapatients.MethodsTcellsfromchroniceczemapatientswereculturedwithartesunateindefferentlevel.TheIgElevelwasdetectedbyE

3、LISAmethodsandtheexpressionofTh1/Th2wasdetectedbyflowcytometricmethods.Results①ArtesunatecoulddecreasetheprevalenceofTh1cellandincreasetheprevalenceofTh2cellinperipheralbloodmononuclearcellfromchroniceczemapatientsindifferentlevel;②ArtesunatecoulddecreasethesecretionofIgEofperiphera

4、lbloodmononuclearcellfromchroniceczemapatientsindifferentlevel.ConclusionArtesunatecouldregulatetheexpressionofTh1/Th2cellsanddecreasedthesecretionofIgEofTcellsfromchroniceczemapatients.Artesunatemightplayanimportantroleinthetreatmentofchroniceczemainfuture.　　【Keywords】Artesunate;C

5、hroniceczema;Lymphocyte　　　　隨著對(duì)青蒿素及其衍生物研究的不斷深入，現(xiàn)代研究揭示青蒿素及其衍生物青蒿琥酯、蒿甲醚可能通過(guò)影響免疫功能而起到對(duì)腫瘤、紅斑狼瘡、寄生蟲(chóng)感染等疾病的治療作用[1]。文中就青蒿琥酯(artesunate)在淋巴細(xì)胞免疫功能調(diào)節(jié)方面的作用探討青蒿琥酯對(duì)慢性濕疹患者外周血淋巴細(xì)胞免疫功能的影響。　　1材料與方法　　1．1單個(gè)核細(xì)胞的分離用肝素抗凝管采集1例確診為慢性濕疹的患者外周血10ml。用Ficoll-Hypaque密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞。用CCK-8活細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒(日本同仁公司)和臺(tái)盼蘭染色

6、法檢測(cè)T細(xì)胞的活性（所有組均＞95%）。　　1．2單個(gè)核細(xì)胞的體外培養(yǎng)所得約6×107～10×107個(gè)單個(gè)核細(xì)胞按照1×107個(gè)細(xì)胞/ml的密度接種于含10%胎牛血清（美國(guó)Gibco公司）、IL-2(50U/ml)的RPMI1640培養(yǎng)基（美國(guó)Invitrogen公司）。同時(shí)分離的單個(gè)核細(xì)胞另外加入濃度分別為60、30、15、7．5、3．75、0μ4g/ml的青蒿琥酯（廣西桂林制藥廠生產(chǎn)，每支60mg粉末先用5%碳酸氫鈉溶液1ml溶解，再按需要用培養(yǎng)基配制成所需的終濃度）培養(yǎng)24h。培養(yǎng)結(jié)束后用CCK-8活細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒(日本同仁公司)和臺(tái)盼蘭染色法檢

7、測(cè)細(xì)胞的活性（所有組均＞95%）。　　1．3流式細(xì)胞儀檢測(cè)分析培養(yǎng)結(jié)束后的淋巴細(xì)胞，使用抗表面抗原CD4抗體進(jìn)行表面抗原染色，經(jīng)4%PFA固定及皂素破膜處理后、使用抗IFN-γ及抗IL-4細(xì)胞因子抗體進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色，最后進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測(cè)，區(qū)分出CD4+IFN-γ+IL-4-作為Th1細(xì)胞、CD4+IFN-γ-IL4+作為Th2細(xì)胞。同時(shí)檢測(cè)以相同熒光標(biāo)記的同種型對(duì)照免疫球蛋白作為陰性對(duì)照。每個(gè)樣品檢測(cè)20000個(gè)單個(gè)核細(xì)胞，計(jì)算出其中Th1、Th2細(xì)胞百分比用于統(tǒng)計(jì)。　　1．4ELISA法檢測(cè)IgE水平人IgEELISA定量試劑盒為美國(guó)R&a

8、mp;D公司產(chǎn)品，檢測(cè)的范圍是2～25