葡萄糖的旋光性及變旋現(xiàn)象

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1、實驗十二葡萄糖的旋光性及變旋現(xiàn)象一、實驗目的1、了解糖的旋光性及變旋現(xiàn)象；2、學習旋光度的測定方法。二、實驗原理1.定義：手性化合物使平面偏振光偏振面旋轉(zhuǎn)的性質(zhì)稱為旋光性。具有旋光性的物質(zhì)稱為旋光物質(zhì)，或稱為光學活性物質(zhì)。若手性化合物能使偏振面右旋(順時針)稱為右旋體，用(+)表示；而其對映體必使偏振面左旋(逆時針)相等角度，稱為左旋體，用(-)表示。偏振面被旋轉(zhuǎn)的角度稱為旋光度，用α表示。手性化合物旋光度與溶液濃度、溶劑、測定溫度、光源波長、測定管長度有關。因此旋光儀測定的旋光度α并非特征物理常數(shù)，同一化合物測得的旋光度就有不同的值。因此為了比較不同

2、物質(zhì)的旋光性能，通常用比旋光度來表示物質(zhì)的旋光性，比旋光度是物質(zhì)特有的物理常數(shù)。用表示。2.測定方法：手性化合物的旋光度可用旋光儀來測定。實驗室常用目測或自動旋光儀。自動旋光儀基本構(gòu)造儀器采用20瓦鈉光燈作光源，由小孔光欄和物鏡組成一個簡單的點光源平行光管，平行光經(jīng)偏振鏡（一）變?yōu)槠矫嫫窆?，當偏振光?jīng)過有法拉弟效應的磁旋線圈時，其振動平面產(chǎn)生50赫茲的β角往復擺動，該偏振光通過檢偏鏡投射到光電倍增管上，產(chǎn)生交變的光電訊號，當檢偏鏡的透光面與偏振光的振動面正交時，即為儀器的光學零點，此時出現(xiàn)平衡指示。而當偏振光通過一定旋光度的測試樣品時，偏振光的振動面轉(zhuǎn)

3、過一個角度α，此時光電訊號就能驅(qū)動工作頻率為50HZ的伺服電機，并通過渦輪桿帶動檢偏鏡轉(zhuǎn)動α角而使儀器回到光學零點，此時讀數(shù)盤上的示值即為所測物質(zhì)的旋光度。三、儀器和試劑儀器：WZZ-3自動旋光儀、容量瓶（20ml）試劑：葡萄糖WZZ-3自動旋光儀四、儀器使用1、先打開電源開關（power），至少等待5分鐘后，后將光源開關向（light）上撥至直流位置,此時可使鈉燈啟動。關閉時則是先關閉（light）再關閉（power）。2、按enter鍵，顯示出廠默認值：mode1;L:2.0;C:0;n:1。Mode1:表示測旋光度L:2.0：表示試管的長度C：表示

4、樣品的濃度n:表示自動復測的次數(shù)3、如不需修改，按enter鍵，顯示“0.000”作一般旋光儀使用。4、如需修改，注意光標的位置，可做修改，輸入數(shù)字后，按enter鍵。5、在測量的過程中，要改變模式，可按→鍵。6、每次在放入樣品前，按“校零”鍵。五、實驗步驟1、將放樣管洗好，左手拿住管子把它豎立，裝上蒸餾水，使液面凸出管口。2、將玻璃蓋沿管口邊緣輕輕平推蓋好，不能帶入氣泡，旋上螺絲帽蓋，不要過緊。3、將蒸餾水管擦干，放入旋光儀內(nèi)蓋上蓋子，開啟鈉光燈，按清零鍵，讀數(shù)盤顯示0.000即可。（一）旋光儀零點的校正：（二）旋光度的測定：1、準確稱取2.0g葡萄糖

5、樣品，放在20ml容量瓶中配成溶液，倒入樣品管，放入已調(diào)零的旋光儀內(nèi)，待讀數(shù)穩(wěn)定讀出讀數(shù)。2、每隔20min測定1次葡萄糖溶液的旋光值，至少測定4次，根據(jù)公式計算葡萄糖溶液的比旋光值。六、注意事項1、試樣溶液必須澄清，不應渾濁或含有混懸的小顆粒，否則，應預先過濾。試樣溶液不能含有其它的光學活性雜質(zhì)，如有機酸、蛋白質(zhì)、核酸、生物堿。2、每次測定之前應以溶劑做空白實驗，校正零位。