濾白紅細胞與洗滌紅細胞相關(guān)指標(biāo)比較

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1、濾白紅細胞與洗滌紅細胞相關(guān)指標(biāo)比較【關(guān)鍵詞】白細胞紅細胞輸血治療是臨床治療主要手段之一，有時是不可替代的手段，便輸血不良反應(yīng)影響響應(yīng)床救治效果的主要因素之一。目前已知非溶血性發(fā)熱反熱(FNHTR)、包括血小板輸注無效在內(nèi)的同種免疫、輸血相關(guān)急性肺損傷(TA-ALI)、輸血相關(guān)移植物抗宿主病(TA-GVHD)的發(fā)生與輸人白細胞的方法有離心法去白膜法、洗滌法和白細胞濾器過濾法等，本文旨在觀察濾自細胞紅細胞和洗滌紅細胞相關(guān)指標(biāo)，為兩種血液成分的臨床應(yīng)用提供參考。材料與方法1材料與設(shè)備一次性四聯(lián)白細胞濾除采血袋為山東威高集團醫(yī)用高分子制品股分有限公司產(chǎn)

2、品，批號200607234：一次性五聯(lián)MAP洗滌采血袋為長春泰爾茂醫(yī)療器具有限公司產(chǎn)品，批號20051019z；白細胞過濾溫控設(shè)備為山東威高集團醫(yī)用高分子制品股分有限公司產(chǎn)品；GZR-ⅡA型自動高頻熱合機為蘇州市醫(yī)用儀器廠產(chǎn)品；CP80MX型大容量低溫離心機為日立集團產(chǎn)品；LDZ5-2型離心機為北京醫(yī)用離心機廠產(chǎn)品；Thermo全波長酶標(biāo)儀為上海熱電科技儀器有限公司產(chǎn)品；sysmex血細胞計數(shù)儀為日本東亞公司產(chǎn)品等。2試劑0.2％鄰甲笨胺試劑為上海新亭化工試劑廠產(chǎn)品，批號20030401；1％過氣化氫溶液為上海埃彼化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品，批號F2

3、0050228；2％冰乙酸溶液為上海埃彼化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品，批號F20060210，血紅蛋白標(biāo)準液廈門市綠浪醫(yī)療器械有限公司產(chǎn)品，批號YZB0705-2005。3濾白紅細胞的制備a.先將低溫操作柜控制在2～6℃，關(guān)閉過濾器下端與旁側(cè)的管道夾，將血袋倒掛在白細胞過濾溫控設(shè)備的掛鉤上，打開采血袋下端的折通管和過濾器下端的管道夾，使血液靠自身重力，緩慢通過自細胞過濾器，流入血液轉(zhuǎn)移袋，大約10～20分鐘。b．關(guān)閉白細胞過濾器下端的管道夾，開啟濾器旁側(cè)的管道排氣夾，輕輕擠壓血液轉(zhuǎn)移袋，將氣體排人采血袋，關(guān)排氣夾，開管道夾，用氣體沖凈濾器中殘留血液。c

4、.3200轉(zhuǎn)／分離心去除血小板和血漿，向剩余物中加入紅細胞添加劑CPDA-1，即為濾白紅細胞。抽取制備好的濾白紅細胞60份，分別留取濾白前后的血液5ml左右，用血細胞計數(shù)儀對其計數(shù)，并把濾白后血液以2000轉(zhuǎn)／分離心10分鐘，分離上清1ml～30℃冰凍備用。4洗滌紅細胞的制備a.取聯(lián)袋采集經(jīng)離心后全血母袋置于分漿夾內(nèi)，折斷母袋上的易折件，將血漿分至②空轉(zhuǎn)移袋中，并一同去除白膜(變可分次去除)，分漿畢將③空轉(zhuǎn)移袋中洗滌液全部加入母袋中并充分混勻，分別用塑料夾片將①②袋上導(dǎo)管夾好。b．將混勻后的細胞洗滌袋進行離心。c．離心畢，取出紅細胞母袋及血漿的

5、②袋置于分漿夾內(nèi)，打開②袋上夾子，將血漿分至③袋(視血漿清亮程度可于本次或后兩次中熱合去除血漿，操作時只是在③④⑤袋中轉(zhuǎn)移)中，分畢用夾子夾好，再打開紅細胞母袋上夾子，將上清液分至②袋中，分畢用夾子夾好，將④袋中洗滌液220g～230g加入母袋中并充分混勻，用夾片夾好導(dǎo)管。d．將混勻后的紅細胞洗滌聯(lián)袋進行離心。e．離心畢，取出紅細胞母袋置于分漿夾內(nèi)，打開紅細胞母袋上夾子，將上清液分至②袋或④袋(預(yù)先將④袋中洗滌液倒入袋⑤中)中，分畢用夾子夾好，將④或⑤袋中洗滌液220g～230g加入母袋中并充分混勻，用夾片夾好導(dǎo)管。f.重復(fù)d、e。g．最后向洗

6、滌三遍紅細胞母袋中加入⑤袋中的紅細胞保存添加劑100克，熱合封口裝有紅細胞的袋中，即為制備的2單位MAP洗滌紅細胞。抽取制備好的MAP洗滌紅細胞60份，分別留取洗滌前后的血液5ml左右，用血細胞計數(shù)儀對其計數(shù)，并把洗滌后的血液以2000轉(zhuǎn)／分離心10分鐘，分離上清1ml～30℃冰凍備用。5游離血紅蛋白的測定取冰凍備用的濾白紅細胞和洗滌紅細胞上清在37℃水浴箱融化，吸取20μl。于上述務(wù)管中加入1.0m10.2％鄰甲笨胺溶液，再加入1.0ml1％過氧化氫溶液，混勻放置10分鐘，各管加入10ml2％冰乙酸溶液，于酶標(biāo)儀設(shè)定波長為430mm，進行比色

7、并計算其濃度。甲習(xí)笨胺法測定原理：血紅蛋白具有過氧化酶作用，使過氧化氫分解產(chǎn)生新生態(tài)氧，氧化習(xí)笨胺為藍色或綠色衍生物，根據(jù)顏色的深淺與已知濃度的血紅蛋白進行比較，求得其含量。6統(tǒng)計學(xué)方法白細胞清除率以百分比表示，計算公式白細胞清除率=1-(制備后血液制品中的白細胞濃度制備前血液制品中的白細胞濃度)×100％，游離血紅蛋白以均數(shù)±標(biāo)準差表示。兩組間的白細胞清除率和紅細胞回收率的比較采用x2檢驗，兩組間的游離血紅蛋白比較采用組間t檢驗。所有檢驗使用JMTJFX《簡明統(tǒng)計分析10．31》軟件處理。7結(jié)果7.1濾白紅細胞的白細胞清除率(％)和紅細胞回收

8、率(％)分別為99.99±2.7和92.65±3.2，洗滌紅細胞的白細胞清除率(％)和紅細胞回收率(％)分別為87.36±5.12和84.54±4.2