藍(lán)舌病病毒15型vp2 ns3蛋白單克隆抗體的制備及其抗原表位的鑒定

藍(lán)舌病病毒15型vp2 ns3蛋白單克隆抗體的制備及其抗原表位的鑒定

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1、密級:論文編號:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院學(xué)位論文藍(lán)舌病病毒15型VP2、NS3蛋白單克隆抗體的制備及其抗原表位的鑒定PreparationoftheMonoclonalAntibodiesagainstVP2andNS3ProteinofBluetongueVirusSerotype15andIdentificationofB—cellEpitopes碩士研究生:張沁指導(dǎo)教師:吳東來研究員申請學(xué)位類別:農(nóng)學(xué)碩士專業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向:獸醫(yī)微生物及其分子生物學(xué)培養(yǎng)單位:哈爾濱獸醫(yī)研究所中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院2015年5月萬方數(shù)據(jù)Secrecy:No.一ChineseAcademyofAgricultu

2、ralSciencesDissertationPreparationoftheMonoclonalAntibodiesagainstVP2andNS3ProteinofBluetongueVirusSerotype15andIdentificationofB—cellEpitopesM.S.Candidate·ZhangQinSupervisor:Prof.WuDong—LaiDegree:PreventiveVeterinaryMedicineSpecialty:VeterinaryMicrobiologyandMolecularBiologyMay2015萬方數(shù)據(jù)獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所里交

3、的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名:漲沁時(shí)間:琊年6月歲日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院有權(quán)保留送交論文鷦復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制罨段保存、‘匯編學(xué)位語文。同意中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院o”’4可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、

4、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。研究生簽名:弓長沁時(shí)間:弘萬年易月’廠日僦名:融扛導(dǎo)師簽名:鞏了7卜時(shí)間:z糾絳石月鄉(xiāng)曰萬方數(shù)據(jù)中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文評閱人、答辯委員會簽名表論文題目藍(lán)舌病病毒15型VP2、NS3蛋白單克隆抗體的制備及其抗原表位的鑒定獸醫(yī)微生物及論文作者張沁專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向分子生物學(xué)指導(dǎo)教師吳東來培養(yǎng)單位(研究所)哈爾濱獸醫(yī)研究所姓名職稱碩(博)單位專業(yè)簽名導(dǎo)師評翁長江研究員碩導(dǎo)口中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾預(yù)防獸醫(yī)學(xué)\\.博導(dǎo)囹?yàn)I獸醫(yī)研究所閱碩導(dǎo)口\\人趙啟祖研究員博導(dǎo)團(tuán)中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所預(yù)防獸醫(yī)學(xué)答笙李一經(jīng)教授碩導(dǎo)口東北農(nóng)業(yè)大學(xué)預(yù)防獸醫(yī)學(xué).害/陪博導(dǎo)團(tuán)席碩導(dǎo)口師東方教授博導(dǎo)

5、囹東北農(nóng)業(yè)大學(xué)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)7暢簽碩導(dǎo)口’嘞湃答華育平教授博導(dǎo)團(tuán),,。東北林業(yè)大學(xué)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)?。●洌7碩導(dǎo)口一。軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事辯涂長春研究員預(yù)防獸醫(yī)學(xué)委孔憲剛研究員博導(dǎo)囤濱獸醫(yī)旃究所預(yù)防獸醫(yī)學(xué)施t1博導(dǎo)團(tuán)獸醫(yī)研究所碩導(dǎo)口中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾員步志高研究員碩導(dǎo)口中國農(nóng)業(yè)科擎院啥爾預(yù)防獸醫(yī)學(xué)弓乏高博導(dǎo)團(tuán)濱獸醫(yī)研究所碩導(dǎo)口中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾劉長明研究員博導(dǎo)團(tuán)濱獸醫(yī)研究所預(yù)防獸醫(yī)學(xué)疊’繃。?1J會議記錄(秘書)張敏敏論文答辯時(shí)間地點(diǎn)2015年.5月29FI哈爾濱獸醫(yī)研究所主樓317學(xué)術(shù)報(bào)告廳萬方數(shù)據(jù)摘要藍(lán)舌病(Bluetonguedisease,BT)是由藍(lán)舌病病毒(Bluetonguevirus,B

6、TV)引起的,由傳播媒介庫蠓在動(dòng)物間廣泛傳播的急性、烈性動(dòng)物傳染病。該病主要感染反芻動(dòng)物(山羊、綿羊、牛、鹿、駱駝等),其中以綿羊最易感,病畜被感染后主要表現(xiàn)出高熱、口腔黏膜發(fā)紺充血、面部水腫等癥狀,部分血清型可引起較高的死亡率。目前,BTV己多達(dá)27個(gè)血清型,各血清型之間無交叉保護(hù)作用,所以制備出針對某一特定血清型的BTV相關(guān)的診斷試劑是防治該病的最有效措施。BTV屬于呼腸孤病毒科環(huán)狀病毒屬的成員,其基因組由10個(gè)分節(jié)段的雙股正鏈RNA組成,分別編碼7種結(jié)構(gòu)蛋白(VPl~VP7)和4種非結(jié)構(gòu)蛋I芻(NSl、NS2、NS3/NS3a及NS4)。其中,VP2能刺激產(chǎn)生型特異性中和抗體,Ns3/

7、Ns3a參與病毒的釋放。根據(jù)Genbank中登陸的BTVl5L2基因序列(CAE51102.1)及S10基因序列(AGJ83560.1)分別設(shè)計(jì)一對特異性引物,以實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的分別含有BTVl5的VP2編碼序列以及NS3編碼序列的重組質(zhì)粒pZERO—B15.VP2和PEASY-B15.NS3為模板擴(kuò)增VP2與NS3蛋白的編碼基因。并將兩者酶切處理后克隆于原核表達(dá)載體pMAL.C4X,構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒pC4X.B

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