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《組蛋白去乙?；敢种苿﹍bh589在利妥昔單抗耐藥淋巴瘤的作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文組蛋白去乙?；敢种苿㎜BH589在利妥昔單抗耐藥淋巴瘤的作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究姓名：高哲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：高玉環(huán)201203中文摘要組蛋白去乙?；敢?1J葫qJLBH589對(duì)利妥昔單抗耐藥淋巴瘤的作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究摘要目的：自從抗CD20單克隆抗體——利妥昔單抗(Rituximab)應(yīng)用于CD20+B細(xì)胞淋巴瘤治療以來，其單藥或與傳統(tǒng)化療藥物聯(lián)合應(yīng)用，療效上有了很大提高，能顯著提高患者的完全緩解率(CR)、總有效率(OER)和總生存率(OS)，但仍有近半數(shù)患者復(fù)發(fā)或難治。對(duì)利妥昔單抗耐藥淋巴瘤采取何種治療手段，已
2、成為臨床上迫切需要解決的問題。組蛋白去乙酰化酶抑制劑(HDACIs)是一類新型抗腫瘤藥物，通過抑制組蛋白去乙?；?HDAC)的活性，誘導(dǎo)靶細(xì)胞中組蛋白高度乙?；?，改變組蛋白與DNA鏈間的結(jié)合狀態(tài)，啟動(dòng)某些特異性基因表達(dá)，體外試驗(yàn)已證實(shí)它對(duì)多種腫瘤細(xì)胞，包括膀胱癌、胃癌等實(shí)體瘤，以及血液系統(tǒng)惡性腫瘤，如淋巴瘤等，均有抑制增殖、誘導(dǎo)再分化和促進(jìn)凋亡作用。但目前對(duì)利妥昔單抗耐藥淋巴瘤細(xì)胞株是否有作用以及相關(guān)機(jī)制，國內(nèi)外尚無相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)旨在探討組蛋白去乙?；敢种苿┮籅H589在利妥昔單抗耐藥的人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞株(RRCL)的作用及其可能的機(jī)制。方法：l
3、腫瘤細(xì)胞的傳代培養(yǎng)：將人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞株Raji禾I]RRCL用含10％胎牛血清(FBS)的RPMI．1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，置于37℃、5％C02、飽和濕度條件下定期換液傳代，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。2MTT法：通過酶聯(lián)儀測(cè)量Raji細(xì)胞及RRCL的分光光度值(OD值)，檢測(cè)LBH589對(duì)兩種腫瘤細(xì)胞的作用：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期Raji細(xì)胞和RRCL接種于96孔板，利用DMSO溶解LBH589，經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)篩選有效濃度后，調(diào)整LBH589的終濃度分別為10nM、500nM、5000nM、10000nM、25000nM，設(shè)為5個(gè)實(shí)驗(yàn)組，分別加入96孔板，每濃度5個(gè)復(fù)孔，
4、常規(guī)設(shè)相應(yīng)DMSO含量的陰性對(duì)照組及加培基實(shí)驗(yàn)對(duì)照組，培養(yǎng)24、48、72tJ,時(shí)后，四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)LL色法測(cè)定OD值，計(jì)算抑制率。3選取10nM、500nM、5000nM="個(gè)濃度作為處理濃度，利用流式細(xì)胞儀中文摘要檢測(cè)凋亡率、細(xì)胞周期及其相關(guān)蛋(jBcl．2、Fas的表達(dá)水平變化。4經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)篩選有效濃度后，調(diào)整LBH589終濃度分別為0．5nM、lnM、2nM，處理兩種細(xì)胞24．48dx時(shí)，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD20蛋白表達(dá)情況。結(jié)果：1MTT法檢鋇SJLBH589對(duì)Raji細(xì)胞和RRCL的影響Raji細(xì)胞及RRCL經(jīng)不同濃度(10nM、500nM、500
5、0nM、10000riM、25000nM)LBH589作用24h．72h后，MTT法檢測(cè)其OD值均有不同程度減低，抑制率逐漸增高。不同濃度LBH589處理相同時(shí)間，兩種細(xì)胞株的抑制率均逐漸增高；相同濃度、不同處理時(shí)間，在一定時(shí)間范圍內(nèi)，隨其逐漸延長(zhǎng)，Raji細(xì)胞和RRCL的抑制率也呈不同程度增高。LBH589對(duì)兩種細(xì)胞株均有抗增殖活性。析因設(shè)計(jì)資料的方差分析顯示：對(duì)于Raji細(xì)胞，時(shí)間與濃度單因素對(duì)抑制率有影響，時(shí)間和濃度無交互作用；對(duì)于RRCL，時(shí)間與濃度單因素對(duì)抑制率有影響，且時(shí)間和濃度存在交互作用。兩因素S-N．K法多重比較顯示：對(duì)于Raji細(xì)胞，在LBH58
6、9的5個(gè)處理濃度組中，除500nM與5000nM、5000nM與10000nM夕t-，其余任兩組間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P7、589濃度(10nM、500nM、5000nM)的增加，Raji細(xì)胞及RRCL細(xì)胞凋亡峰值增加，細(xì)胞凋亡率增高，空白對(duì)照組與各實(shí)驗(yàn)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸
