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《bcl-2家族成員在萊菔硫烷誘導(dǎo)人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系acc-m凋亡中的作用》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下，由本人獨立完成。本學(xué)位論文研究所獲的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名單位為河北醫(yī)科大學(xué)，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)的法律責(zé)任。研究生答名：鉀高導(dǎo)師弛彬p研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注等內(nèi)容外，文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果
2、，指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名．智芳導(dǎo)師簽章：砌弓年弓月驢日目錄中文摘要????????????????????????01英文摘要????????????????????????04研究論文Bel．2家族成員在萊菔硫烷誘導(dǎo)人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系A(chǔ)CC．M凋亡中的作用前言????????????????????????08刖舌????????????????????????08材料與方法?????????????????一???．．09結(jié)果????????????????????????17
3、附圖???????????????．：????????．18附表????????????????????????23討論????????????????????????24結(jié)論????????????????????????27參考文獻(xiàn)??????????????????????．28綜述Bel．2蛋白家族對機(jī)體細(xì)胞凋亡機(jī)制調(diào)控作用的研究進(jìn)展?????????????????????32致謝?????．????????????????????．47個人簡歷???????????????????????．．48中文摘要Bcl一2家
4、族成員在萊菔硫烷誘導(dǎo)人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系A(chǔ)CC．M凋亡中的作用摘要目的：涎腺腺樣囊性癌(salivaryadenoidcysticcarcmoma，SACC)是最常見的唾液腺惡性腫瘤之一。好發(fā)于腭部的小唾液腺及腮腺，其次為下頜下腺。該腫瘤具有轉(zhuǎn)移性極強(qiáng)、易沿神經(jīng)擴(kuò)散和血行性轉(zhuǎn)移率高等重要特征，其發(fā)病率在口腔頜面部惡性腫瘤中居第二位。目前對于涎腺腺樣囊性癌的臨床治療手段以手術(shù)切除為主，但手術(shù)切除后也常會發(fā)生局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，其遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移率在口腔頜面部居首位。然而，涎腺腺樣囊性癌的發(fā)病及轉(zhuǎn)移機(jī)制目前仍不完全清楚。因此探索新的預(yù)防和
5、治療方法，提高對涎腺腺樣囊性癌的療效，改善患者的生存質(zhì)量是很有必要的。流行病學(xué)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)增加十字花科蔬菜的攝入能夠減少癌癥的發(fā)生，其抗腫瘤作用的主要成分是一系列異硫氰酸酯，其中萊菔硫烷(sulforaphane，SFN)因其抗腫瘤效果最佳而受到廣泛關(guān)注。隨著對萊菔硫烷抗腫瘤作用研究的不斷進(jìn)展，目前對其抗癌機(jī)制的研究己從細(xì)胞水平上升至分子水平。如在DU-145細(xì)胞(前列腺癌)中，SFN引起細(xì)胞凋亡伴有裂解的C唧ause．3增加和Bcl．2表達(dá)的減少。在胰腺癌細(xì)胞中也可引起CaSpaSe．3的裂解。SFN可通過激活多種分子機(jī)制，來
6、誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡。我們前期的實驗結(jié)果表明，SFN能夠抑制腺樣囊性癌細(xì)胞ACC．M的增殖，并誘導(dǎo)其凋亡。并且Caspase在SFN誘導(dǎo)涎腺腺樣囊性癌ACC．M凋亡過程中起重要作用。但是在SFN誘導(dǎo)人涎腺腺樣囊性癌ACC．M細(xì)胞凋亡的過程中，Bcl一2家族成員是否起重要作用，國內(nèi)外未見報道。本研究擬對體外培養(yǎng)的人腺樣囊性癌細(xì)胞系A(chǔ)CC．M經(jīng)過SFN處理后，采用WesternBlot方法，檢測不同時間點抗凋亡蛋白Bcl．2，Bcl．xl以及促凋亡蛋白Bax，Bak的含量，驗證在SFN誘導(dǎo)ACC．M凋亡過程中Bcl．2家族成員的表達(dá)及意義
7、，從而為在腺樣囊性癌的多模式治療中拓展新的植物化學(xué)藥物提供實驗依據(jù)。方法：1材料中文摘要1．1ACC．M：由上海交通大學(xué)口腔頜面外科實驗室提供，細(xì)胞系建立于1995年；1．2萊菔硫烷(SFN)：由匹茲堡大學(xué)醫(yī)學(xué)中心頭頸外科提供，購自LKT實驗室，純度之99％。2方法2．1藥液配制：萊菔硫烷(SFN)用二甲基亞砜(DMSO)溶解配制成100mmol／L的儲存液，存于．20。C冰箱中，使用前用RPMll640培養(yǎng)液稀釋。2．2細(xì)胞培養(yǎng)：將凍存的細(xì)胞系予以復(fù)蘇，培養(yǎng)液采用RPMll640加入10％的胎牛血清和鏈霉素(10009／mL)
8、、青霉素(100U／mL)，將復(fù)蘇后的細(xì)胞置于37℃、5％C02恒溫恒濕箱培養(yǎng)，隔天換液，約72．96小時可以傳代。2．3細(xì)胞接種及藥物處理：取對數(shù)生長期細(xì)胞經(jīng)消化液(O．25％胰蛋白酶和0．04％EDTA(1：1)混合液)消化后制成4．0x106個／ml的細(xì)胞
