重樓皂苷ⅰ對(duì)涎腺腺樣囊性癌acc-m細(xì)胞系的增殖的影響作用及其機(jī)制

重樓皂苷ⅰ對(duì)涎腺腺樣囊性癌acc-m細(xì)胞系的增殖的影響作用及其機(jī)制

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1、授予單位代碼10089學(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)?0122200HebeiMedicalUniversity碩士學(xué)位論文科學(xué)學(xué)位重樓皂苷I對(duì)涎腺腺樣囊性癌ACC-M細(xì)胞系的增殖的影響作用及其機(jī)制研究生:崔怡導(dǎo)師:張英懷教授賈志宇副教授專業(yè):口腔臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)院:第二醫(yī)院2015年3月河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下,由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果,其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公幵和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文,第一署名

2、為單位河北醫(yī)科大學(xué),試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則,承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。?nr研究生簽名:導(dǎo)師簽章廣V年、/o曰.月河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果,指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫,文責(zé)自負(fù)。上年;月P曰目錄中文摘要………………………………………………………………1英文摘要………………………………………………………………5英文縮寫…………………

3、……………………………………………10研究論文重樓皂苷Ⅰ對(duì)涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞ACC-M細(xì)胞系的增殖的影響作用及其機(jī)制前言……………………………………………………………11材料與方法……………………………………………………12結(jié)果……………………………………………………………20附圖……………………………………………………………23附表……………………………………………………………34討論……………………………………………………………36結(jié)論……………………………………………………………39參考文獻(xiàn)…………………………………

4、……………………40綜述中藥重樓的抗腫瘤作用研究進(jìn)展……………………………………43致謝………………………………………………………………………55個(gè)人簡(jiǎn)歷……………………………………………………………56中文摘要重樓皂苷Ⅰ對(duì)涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞系A(chǔ)CC-M增殖的影響作用及其機(jī)制摘要目的:涎腺腺樣囊性癌(salivaryadenoidcysticcarcinoma,SACC)舊稱圓柱瘤或圓柱瘤型腺癌,是涎腺常見的上皮源性惡性腫瘤,沒有明顯的性別差異,可發(fā)生于任何年齡,但以中老年居多。SACC可發(fā)生于任何涎腺,但以腮腺、頜下腺以

5、及腭部小涎腺居多。SACC作為惡性腫瘤,有著獨(dú)特的生物學(xué)特性,其具有嗜神經(jīng)侵襲生長和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移性,遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移尤以肺部最為常見,其遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移率在口腔頜面部腫瘤中居首位。SACC目前臨床治療手段仍采用以手術(shù)切除治療為主,術(shù)后輔以放療的綜合治療方案。但該綜合治療方案無法對(duì)局部復(fù)發(fā)以及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移形成有效控制,其遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移比例在口腔頜面部居腫瘤中仍位于首位。但如今,從涎腺腺樣囊性癌的發(fā)病原因、嗜神經(jīng)侵襲性和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的機(jī)制仍然未能研究清楚,因此探索新的治療方法,提高對(duì)腺樣囊性癌的治療療效,降低其局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,對(duì)提高患者生存率、生存質(zhì)量顯得

6、十分重要。重樓(RhizomaParidis)為百合科重樓屬的干燥根莖,目前研究表明其具有抗炎、止血、止痛、鎮(zhèn)靜以及抗癌等作用。重樓皂苷Ⅰ(PolyphyllinI)為重樓的一種甾體皂苷類成分。近年來相繼有研究顯示,重樓皂苷Ⅰ有抗腫瘤的作用。但重樓皂苷Ⅰ是否有對(duì)人腺樣囊性癌細(xì)胞增殖存在抑制作用,及其作用機(jī)制,國內(nèi)外尚未見報(bào)道。本研究擬對(duì)體外培養(yǎng)的人涎腺腺樣囊性癌ACC-M細(xì)胞進(jìn)行不同濃度、不同時(shí)間重樓皂苷Ⅰ處理,觀察不同濃度、不同時(shí)間的重樓皂苷Ⅰ對(duì)人涎腺腺樣囊性癌ACC-M細(xì)胞系的增殖是否具有抑制作用,探討其可能的作用機(jī)制

7、,旨在為腺樣囊性癌綜合治療中尋找新的并且有效的植物化學(xué)藥物奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)材料與方法:1材料1.1ACC-M由上海交通大學(xué)口腔頜面外科實(shí)驗(yàn)室提供,建立于1995年;1.2重樓皂苷Ⅰ(PolyphyllinI)1中文摘要購自成都普菲德生物技術(shù)有限公司2方法2.1藥液配制重樓皂苷I用二甲基亞砜溶解配制成10mg/mL的儲(chǔ)存液,室溫下儲(chǔ)存,使用前用RPMI1640培養(yǎng)液稀釋。2.2細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)液采用RPMI1640加入10%的新生牛血清和青霉素-鏈霉素,置于37℃、5%CO2恒溫箱內(nèi)飽和濕度進(jìn)行培養(yǎng),每72-96小時(shí)傳1代,采用胰蛋

8、白酶進(jìn)行消化傳代。2.3MTT比色試驗(yàn)4取對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞制成5.0×10個(gè)/mL細(xì)胞懸液,接種于96孔板,每孔100μl,培養(yǎng)24h后,分別加入含重樓皂苷Ⅰ溶液200μg,使終濃度為1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、6μg/mL、8μg/mL、10μg/mL,并設(shè)對(duì)照組和調(diào)零孔,每組5個(gè)復(fù)孔。繼

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