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《煙草nt-syr1 基因?qū)崟r熒光定量pcr檢測方法》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)20中國煙草科學(xué)2008，29(3)：2m24，28煙草Nt．syrl基因?qū)崟r熒光定量PCR檢測方法代曉燕地，蘇以榮h，魏文學(xué)1，陳風(fēng)雷3，鄒焱4，龍文3，賈志紅1，一，范業(yè)寬2(1．中國科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，長沙410125；2．華中農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院，武漢4300r70；3．貴州省銅仁地區(qū)煙草公司，貴州銅仁554300；4．貴州省煙草科學(xué)研究所，貴陽550003；5．長沙卷煙廠技術(shù)中心，長沙410007)摘要：根據(jù)煙草Nt．syrl基因ml礬A序列設(shè)計(jì)特異引物
2、，建立了sYBRGm明I實(shí)時熒光定量P(R反應(yīng)體系，對煙株打頂后葉片Nt．syrl基因進(jìn)行了InRNA轉(zhuǎn)錄水平上的定量分析，為從分子生物學(xué)水平上研究烤煙鉀素營養(yǎng)調(diào)控機(jī)理提供新的技術(shù)手段。該方法簡單實(shí)用，獲得的熒光定量PcR擴(kuò)增曲線基線平整，指數(shù)區(qū)擴(kuò)增明顯，斜率大；穩(wěn)定性和重現(xiàn)性好，變異系數(shù)??；循環(huán)閩值Ct與PCR起始模板量的對數(shù)值之問存在良好的線性關(guān)系．對基因表達(dá)結(jié)果分析表明，煙株打頂后lh，Nt-s”l基因在葉片中強(qiáng)烈表達(dá)，表達(dá)量約是同期不打頂處理的480倍，隨后逐漸降低．與打頂處理相比，打頂后涂抹生長
3、調(diào)節(jié)劑可以降低其表達(dá)量．關(guān)鍵詞：實(shí)時熒光定量PcR；煙草；Nt-s”l；基因表達(dá)中圖分類號：Ts411文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1007．5119(2008)03砌。娟AReaI-timeFIuoresCentQuantitatiVePCRforDeteCtingTranscriptsofNt-syrlGenein1．obaCCODmⅪaoy鋤Lz，SUⅥr01唱1，WEIWhxuel，C陋NFenglei’，zCIUYan4，LONGWen’，ⅡAZlliIlongk3，F(xiàn)ANY色kua一(1．1kKey
4、I廟oratc呵ofSub廿opicalAgr0_ecology，IIlstitutcofSub的picalA鰣cuJture'CAS，cIIangsha410125，ChiIla；2．CoUegeofResource柚dEnViro咖ent'Hu配hongA鰣culmraJUIliVersi妙．Wuh鋤430070，Chim；3．Tong他nT0baccoC伽p卸y’ToIlgIenC’m曲伽554300，Clli∞；4．GllizllouT0baccoResearchIIlstitIlte，Guiy觚
5、g550003．a(chǎn)lilla；5．毗hnicalcc“ter0fCh鋤gsllaCig撒吮Facto吼Ct擒ngslla41000r7，C=him)Ab砒怕d：11屺pmj∞taimcdt0船油lish佗al-timenuorescentqua而tadVePCRdetec吐ngNt_syrlge∞int曲戤oandprovideda∞wtec嘶qllefor山emecharIismstIldy0fpot踮siumreglIlationattllemolecul盯leVel．BydesigIlingt、】I
6、ropairsof卸1plificali∞primersb雒edtllemRNAseq∞nceofNt．syrlintobacco鋤destablisllingSYBRG脫nIreactionsystemofreal．timenuores∞ntqu柚ti叫VePcR，qu柚ti枷Ve柚alysisw硒conductedtodcte蛾tllech卸gesofNt-syrlge∞intobaccol∞Ves疵盯decapi叫on．ThctechIIiqueshowedtllatnle鋤plificationc
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