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《靶向hbsag不同表位的雙特異性抗體抗乙型肝炎病毒研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、』IIIIIIIIIIIIIIrllllllllllllllllllllllllllllllll『Y2440703厴交通戈摯刪8HANGHAIJlAOroNGUNlVERSfTY博士學(xué)位DOCTORALDISSERTATION論文題目靶向HBsAg不同表位的雙特異性抗體抗乙型肝炎病毒研究學(xué)科專業(yè)作者姓名指導(dǎo)教師答辯日期免疫學(xué)談文龍張雁云歲厴交通戈訾博士學(xué)位論文靶向HBsAg不同表位的雙特異性抗體抗乙型肝炎病毒研究EffectiveHBV-NeutralizingActivitybyaBispecificAntibodyTargetingDistinctHBsAgEp
2、itopes研究生姓名：送塞壟學(xué)號(hào)：指導(dǎo)教師：堂雁云熬拯學(xué)科、專業(yè)：魚疫堂研究方向：拉簽坌掏復(fù)邊能學(xué)位類型：登堂堂焦培養(yǎng)單位：土連塞通太堂醫(yī)堂暄答辯日期：三Q二三生墮月上海交通大學(xué)2013屆博士學(xué)位論文靶[h'JHBsAg不同表位的雙特異性抗體抗乙型肝炎病毒研究姓名：學(xué)號(hào)：系所：專業(yè)：研究方向：資助基金：學(xué)位級(jí)別：導(dǎo)師：談文龍0097109036醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)抗體結(jié)構(gòu)與功能“973’’項(xiàng)目博士張雁云教授二O一三年四月ThesisforDoctorDegree，ShanghaiJiaoTongUniversityEffectiveHBV-NeutralizingActi
3、vitybyaBispecificAntibodyTargetingDistinctHBsAgEpitopesPh．DCandidate：Wen—longTanMajor：ImmunologyResearchField：AntibodyStructureandFunctionCollege：SchoolofMedicineAdvisor：Yan—yunZhangApr．2013上海交通大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作
4、品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名：日期：矽哆年多月多日上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書上海交通大學(xué)上海爻通大字學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)上海交通大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密口，在一年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密口。
5、(請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”)指導(dǎo)教師簽名：曰期：』少I弓年4月9D日、女，晷，蕊日孫月簽歲者年儲(chǔ)凈文Ⅲ敝山位期學(xué)日上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文摘要乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus，HBV)感染是全球范圍的公共健康疾病。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球約有3．5億人為慢性HBV攜帶者，而我國就占1．2億。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球每年約有100萬"--'150萬人死于急性或慢性HBV感染導(dǎo)致的肝功能衰竭，肝硬化和肝癌。預(yù)防和治療HBV感染迫在眉睫。目前針對(duì)HBV感染的治療主要采用Q．干擾素和核苷酸類似物等藥物抗病毒。長(zhǎng)期使用療效欠佳，易于導(dǎo)致病毒突變。接種乙型肝炎疫苗和乙肝免疫球蛋白(HBIG)
6、能有效減少HBV易感人群的發(fā)病率。因此，針對(duì)乙肝表面抗原(HepatitisBsurfaceAg，HBsAg)的抗體能有效地阻止HBV的感染。但以HBIG為基礎(chǔ)的治療性抗體來源的不確定性，低特異性和潛在的感染風(fēng)險(xiǎn)，制約著乙肝治療性抗體在臨床上的使用。由于單克隆抗體(Monoclonalantibody,mAb)具有長(zhǎng)半衰期、低毒性、高親和力、特異性好等多方面優(yōu)點(diǎn)，所以開發(fā)乙肝特異性單克隆抗體越來越受到關(guān)注。我們采用超高速流式分選系統(tǒng)分離接種乙肝疫苗的志愿者外周血中HBsAg特異的記憶性B細(xì)胞(HBsAg+IgG+CDl9+)，并制備成單細(xì)胞樣本。緊接著，采用Sing
7、leCellRT-PCR技術(shù)克隆每個(gè)樣本中抗體相關(guān)的基因，體外重組表達(dá)相應(yīng)的抗體。在我們的研究中，我們成功克隆了42株有活性的anti．HBsAg單克隆抗體，測(cè)定了其功能表位，親和力以及測(cè)定單克隆抗體中和HBV活性。為了獲得更好的中和HBV活性的抗體，我們選用了2株最好的anti．HBsAg單克隆抗體C4G4和D2H2研究其協(xié)同中和HBV的活性。體外實(shí)驗(yàn)研究表明：C4G4和D2H2雙抗體聯(lián)用可有效增強(qiáng)中和HBV的活性。鑒于雙特異性抗體的諸多優(yōu)點(diǎn)，我們?cè)诖嘶A(chǔ)上開發(fā)了這2株抗體的雙特異性抗體C4D2．BsAb。在HepaRG細(xì)胞模型中，C4D2．BsAb顯示出了比
