硫酸吲哚酚誘導(dǎo)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷及α-硫辛酸的干預(yù)作用

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1、授予單位代碼10089學(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)?0122443HebeiMedicalUniversity科學(xué)學(xué)位硫酸吲哚酚誘導(dǎo)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷及a-硫辛酸的干預(yù)作用研究生:郜同心導(dǎo)師:曾文副教授專(zhuān)業(yè):內(nèi)科學(xué)二級(jí)學(xué)院:北京市垂楊柳醫(yī)院2015年3月河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下,由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果,其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公幵和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文,第一署名為單位河

2、北醫(yī)科大學(xué),試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專(zhuān)利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則,承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。?i:iC!'S研究生簽名導(dǎo)師簽章二級(jí)學(xué)院^導(dǎo)蓋寧i‘二:..?V:年0河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)的研究成果,指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫(xiě),文責(zé)自負(fù)。研究生簽名導(dǎo)師簽章:wr年^月4日目錄摘要...................................

3、......................1ABSTRACT.....................................................3英文縮寫(xiě).....................................................6研究論文硫酸吲哚酚誘導(dǎo)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷及Α-硫辛酸的干預(yù)作用7前言.....................................................7附圖...................

4、.................................20附表....................................................25討論....................................................27結(jié)論....................................................32參考文獻(xiàn).............................................

5、.......33綜述Α-硫辛酸在慢性腎臟疾病中的應(yīng)用........................36致謝........................................................48個(gè)人介紹....................................................49中文摘要硫酸吲哚酚誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷及硫辛酸的干預(yù)作用摘要背景:內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙和氧化應(yīng)激是心血管疾病發(fā)生發(fā)展的主要機(jī)制,慢性腎臟病(Chronicrena

6、ldiseaseCKD)患者體內(nèi)尿毒癥毒素堆積是并發(fā)心血管疾病的高風(fēng)險(xiǎn)因素;其中蛋白結(jié)合型尿毒癥毒素硫酸吲哚酚(IndoxylSulfateIS)能產(chǎn)生促氧化的作用,誘導(dǎo)血管內(nèi)皮功能障礙,促進(jìn)心血管疾病的發(fā)生發(fā)展,近年來(lái)抗氧化劑改善內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙的研究備受關(guān)注。目的:以人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HumanumbilicalveinendothelialcellsHUVEC)為實(shí)驗(yàn)?zāi)P?,探討抗氧化劑硫辛?alpha-lipoicacidLA)是能否干預(yù)尿毒癥毒素硫酸吲哚酚(IS)誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激和血管內(nèi)皮細(xì)

7、胞損傷并初步探討其作用機(jī)制。方法:對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮傳代細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),將其分成正常對(duì)照組、硫酸吲哚酚(IS)組、硫辛酸(LA)組及硫酸吲哚酚和硫辛酸聯(lián)合組(簡(jiǎn)稱(chēng)LA+IS組);通過(guò)ELISA法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)3-硝基酪氨酸(3-Nitro-L-tyrosine3-NT)的含量,黃嘌呤氧化酶法測(cè)定細(xì)胞超氧化物歧化酶(SuperoxidedismutaseSOD)活性,比色法測(cè)還原性谷胱甘肽(GlutathioneGSH)的含量,硝酸還原酶法測(cè)量細(xì)胞培養(yǎng)液中一氧化氮(NitricoxideNO)的含量及比色法

8、測(cè)一氧化氮合成酶(NitricoxidesynthaseNOS)活性,通過(guò)RT-PCR及熒光定量PCR技術(shù)分析內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(EndothelialnitricoxidesynthaseeNOS)的表達(dá)。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS17.0軟件,結(jié)果用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析(ANOVA),均數(shù)兩兩比較采用Bonferroni法檢驗(yàn),P<0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各組實(shí)驗(yàn)至少重復(fù)4次。結(jié)果:1血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激指標(biāo)①測(cè)定培養(yǎng)液GSH含量,與正

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