青稞查爾酮異構酶基因的克隆及原核表達分析

青稞查爾酮異構酶基因的克隆及原核表達分析

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1、分類號S512.3075學號S20121101'四川巧化大學汽1、'、、.-''V一;T碩±學位論文;‘.一..二'一:;'..?.,...V、-青裸查爾酬異構酶基因的克麾及原巧表達分析李鵬’,-???、,乂澈導教師馮宗云教授學科專業(yè)生物化學與分子生物學硏究方向植賴分子生物學--仁V■■.."古I";‘;.'—.'V‘--V.、---r':i軒’.;\*^-V、兵?‘-.、?V;-.,、‘、....■..

2、-?r?..、:又..:20巧年5月...--乂?",(■.氣■?一'*k,,-?i‘'1-,/'SichuanAriculturalUniversitgyMasterDissertationCloninandProkaroticExressionAnalsisofgypy巧vCfiGeneinQingkeHiUlesisBarle(y)ByPenLigAdvisor;Prof.ZonunFengygMaor:Biochemistrand

3、MolecularBiolojygyDirection:PlantMolecularBiologyMay,2015論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學位論文是我個人在導師指導下進行研究工作所取得的成果。盡我所知,除了文中特別加W標注和致謝的地方外,學位論文中不包含其他個人或集體已經發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得四川農業(yè)大學或其它教育機構的學位或證書所使用過的材料一。與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名:年&月ly円^^關于論文使用授權的聲明、本人完全了解四川農業(yè)大學有關保

4、留使用學位論文的規(guī)定,即:學校有權保留并向國家有關部口或機構送交論文的復印件和電子版,允許論文被查閱和借閱,可W采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。同意四川農業(yè)大學可W用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內容。?。??本論文不保密。□本論文保密,在年解密后適用本授權。__""(請在W上□內劃V)。么I文■IT研究生簽名:東#年6月/日導師簽名^:/月/主日摘要青裸(Qik好or庇MWVWweL.va.MMc/wwHook.F)也稱裸大麥,其巧粒富含inerg,皆黃兩等營養(yǎng)功能成分,具有較高的營養(yǎng)價值和醫(yī)療保健

5、作用,已越來越受大麥研究者的青睞一。黃麗類化合物是類在自然界廣泛分布的多齡類次生代謝物質,是色原燒或色原廁的衍生物、,在植物自身生理活動中起著重要的作用,參與紫外線防護花色形、調節(jié)生長、,成、抗病原微生物誘導植物與微生物相互作用等與人類的健康有密切的聯(lián)系、,具有清陳自由基、保護也腦血管、抗腫瘤、抗氧化和抗炎癥等多種藥用價值。一類黃廁代謝是植物中重要的次生代謝途徑之,是植物黃麗合成的重要方式。e一查爾爾異構酶(chalconeisomraseCHIEC5.5.1.6)是,,第個被認識的黃爾類物一質合成相關酶,也是類黃砸代謝途徑中的個關鍵酶,催化分子內環(huán)化反應將雙

6、環(huán)的查爾麗轉化為有生物學活性的蘭環(huán)二終基黃焼麗,對黃爾類物質的合成具有重要作""94--用。本研究實驗室篩選的高黃麗青裸品種191為材料,通過同源克隆獲得青裸査爾麗異構酶基因好vC//7的編碼序列CDS(Codingsequence)全長,對序列進行了,構建原核表達載體并進行了原核表達初步研究生物信息學分析和進化樹分析,為深入研究C片/基因在青裸類黃麗代謝中的分子調控機制提供依據,對青裸高黃麗含量的育種具有指導價值。主要結果如下:1.根據GenBank中己登錄的大麥C放基因的CDS區(qū)序列設計引物,通過同源克隆及測序成功得到青裸C7//基因的CDS區(qū)全序

7、列,CDS區(qū)全長的6bp,編碼231個氨基酸。酶蛋白分子量為23.68KDa,預測等電點(PI)為5.22,為酸性蛋白。酶23.96。、蛋白的不穩(wěn)定系數為,屬于穩(wěn)定蛋白其所有氨基酸組成中Ala最多,CysGin和Trp最少。平均親水指數為0.299,屬于親水性蛋白。存在5個絲氨酸和1個酪氨酸囉酸化活性位點。信號肢預測結果顯示,該蛋白無信號膚。預測該酶蛋白為非—。二sll3二分泌性蛋白硫

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