肝膽清片對(duì)cona誘導(dǎo)小鼠肝損傷保護(hù)作用的研究

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1、肝膽清片對(duì)ConA誘導(dǎo)小鼠肝損傷保護(hù)作用的研究肝膽清片對(duì)ConA誘導(dǎo)小鼠肝損傷保護(hù)作用的研究【摘耍】目的：觀察肝膽?清片對(duì)肝損傷小鼠(ConA誘導(dǎo))的保護(hù)作用。方法:通過測(cè)定血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)以及腫瘤壞死因子-Q(TNF-a)、肝勻漿超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等數(shù)值，研究肝膽清片對(duì)小鼠肝臟的保護(hù)作用。結(jié)果：肝膽?清片高劑量組能夠明顯降低肝損傷小鼠模型(ConA誘導(dǎo))的血清ALT、AST、TNF-a、肝勻漿MDA,提高肝勻漿SOD(P<0.01)o結(jié)論：肝膽清片對(duì)ConA誘導(dǎo)肝損傷小鼠具有一定的

2、保護(hù)作用?！娟P(guān)鍵詞】肝膽清片；肝損傷；ConA中圖分類號(hào)R575文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼B文章編號(hào)1674-6805(2014)9-0140-02肝膽清片是江蘇黃河藥業(yè)股份有限公司根據(jù)《國(guó)家中藥標(biāo)準(zhǔn)匯編》分冊(cè)中的“肝膽清膠囊”改變劑型的中藥八類新藥。其處方組成為：豬鬃草、金錢草、龍膽、大黃、黃連、延胡索、雞內(nèi)金、赭石、吳茱萸；功能主治為：清熱祛濕、利膽排石。用于肝膽濕熱所致的膽囊炎、膽石癥。膽囊炎屬中醫(yī)“脅痛”、“黃疸”、“肝脹”、“膽脹”、“腹痛”等病范疇，有急、慢性之分，且往往與膽石癥同時(shí)并存。屮醫(yī)藥治療膽囊炎、膽石癥方面有著悠久的歷史，流傳和積累

3、了許多有效方劑。這些經(jīng)驗(yàn)和方劑療效確切、安全可靠，經(jīng)過現(xiàn)代制藥方法制成服用方便、便于攜帶的新型屮成藥有著非常大的現(xiàn)實(shí)意義。肝膽清膠囊即是由臨床經(jīng)驗(yàn)方改進(jìn)提高而成的現(xiàn)代中成藥，對(duì)如上諸癥有滿意的療效。鑒于膠囊劑在生產(chǎn)過程當(dāng)中成品率較低，且對(duì)水分耍求嚴(yán)格，改劑型為片劑可以克服如上問題，提高本品的質(zhì)量，使之更加可靠穩(wěn)定,以便丁臨床上的廣泛應(yīng)用。本文從現(xiàn)代藥理學(xué)角度探討肝膽清片對(duì)肝損傷小鼠(ConA誘導(dǎo))的保護(hù)作用，以期為闡述肝膽清片對(duì)免疫性肝損傷保護(hù)作用提供臨床前數(shù)據(jù)。1材料與方法1.1試藥肝膽清片（江蘇黃河紗業(yè)股份有限公司）；聯(lián)苯雙酯片（上海

4、信誼天平藥業(yè)有限公司）。實(shí)驗(yàn)前用滅菌蒸懈水溶解配成所需濃度。1.2動(dòng)物清潔級(jí)Balb/c小鼠，雄性，6?7周齡，購(gòu)自上海斯萊克動(dòng)物實(shí)驗(yàn)公司。1.3試劑ConA為Sigma產(chǎn)品;MDA、SOD、ALT、AST、TNF-a、考馬斯亮藍(lán)試劑盒均購(gòu)自上海生工。1.4模型制備及給藥方法雄性Balb/c小鼠60只隨機(jī)分成肝膽清高、中、低劑量組、聯(lián)苯雙酯組、空白對(duì)照組、模型組，每組10只?？瞻讓?duì)照組及模型組給了綸理鹽水，聯(lián)苯雙酯組給予200mg/kg聯(lián)苯雙酯，肝膽清高、中、低劑量分別為12、6、3g/kg,灌胃，每天給約1次，連續(xù)10d。末次給藥4h后

5、，正常組尾部生理鹽水，靜注，其余組尾部ConA20mg/kg,靜注。禁食不禁水，8h后摘眼球取血，離心取血清；取上述各個(gè)實(shí)驗(yàn)組小鼠肝臟，液氮中保存[1-2]o1.5血清AST、ALT及TNF-a測(cè)定實(shí)驗(yàn)中通過眼球取得的全血離心，取上清，按照AST、ALT及TNF-a試劑盒進(jìn)行測(cè)定。1.6肝勻漿MDA、SOD的測(cè)定準(zhǔn)確稱取1.4中液氮保存的小鼠肝臟，加入9倍預(yù)冷的半理鹽水,勻漿，離心后去上清液，按MDA、SOD試劑盒說明書進(jìn)行測(cè)試上述兩項(xiàng)數(shù)據(jù)。同時(shí)測(cè)定小鼠肝臟的蛋口質(zhì)含量（考馬斯亮藍(lán)法）。1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)處理將上述數(shù)值用SPSS18.0軟件進(jìn)行

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料采用（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1肝膽清片對(duì)肝損傷小鼠（ConA誘導(dǎo)）血清ALT和AST的影表1顯示，ConA誘導(dǎo)的肝損傷小鼠血清ALT、AST與空口對(duì)照組比較有顯著的升高（P<0.01）,表明模型成功；給予肝膽清后，血清AST、ALT明顯下降，尤其是高劑量組降低血清AST、ALT的作用與聯(lián)苯雙酯組相當(dāng)（P>0.05）o但低劑量組與聯(lián)苯雙酯組比較差杲有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）o表1各組小鼠血清AST、ALT比較U/L組別ASTALT空口對(duì)照組（n二10）35±644±6模型組

7、（n=10）156±22#165±29#53±11*#61±12*#84±18*#94±25*#146±25#161±29#高劑量肝膽清組5二10）中劑量肝膽清組（n=10）低劑量肝膽清組（「10）聯(lián)苯雙酯組（n二10）43±12*57±16**與模型組比較，P<0.01；#與空口對(duì)照組比較，P<0.012.2肝膽清片對(duì)肝損傷小鼠（ConA誘導(dǎo)）血清TNF-a的影響表2顯示，ConA誘導(dǎo)肝損傷小鼠血清TNF-a與空口對(duì)照組比較有顯著的升高（P<0.01）,表明模型成功；給予肝膽清后，血清TNF-a明顯下降，尤其是高劑量組。但低劑量組降低血

8、清TNF-a較低。表2各組小鼠血清TNF-a比較Ug/L組別TNF-a空白對(duì)照組(n=10)41.0±2.9模型組(n二10)102.0±12#高劑量肝膽清組（n二10）69.0±8?5**#