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《安琪活性干酵母的富硒研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、安琪活性干酵母的富硒研究Studiesonseleniumrichabilityofangelactivedryyeast柴麗紅苗丹CHAILi-hongMIAO-Dan(長安大學環(huán)境科學與工程學院,陜西西安710064)(EnvironmentalScienceandEngineeringCollegeofChang’anUniversity,Xi’an,Shaanxi710064,China)摘要:以安琪活性干酵母為菌種,分析了硒添加量、培養(yǎng)時間、接種量等發(fā)酵條件對其生長及富硒性能的影響,并通過正交試驗初步確定了發(fā)酵條件的最優(yōu)方案。Abstract:Inth
2、isresearch,theseleniumrichabilityofangelactivedryyeastanditsinitialoptimizedcultivationconditionwerestudiedbyorthogonalexperiment.關(guān)鍵詞:活性干酵母;硒;發(fā)酵條件Keywords:Activedryyeast;Selenium;Cultivationcondition硒(Selenium,Se)是人體內(nèi)必需的微量元素之一,具有諸多的生物學功[1,2]能,缺硒則會導致多種疾病的發(fā)生。人體內(nèi)的硒大多來源于食物,但食物中[3]硒含量通常很低
3、,難以滿足機體的需要。以無機硒作為硒源補充硒營養(yǎng)不足,儲存在一定的毒性外,其生物利用率也低。而利用生物轉(zhuǎn)化法,將無機硒轉(zhuǎn)化成有機硒,則可以提高硒的利用率,是開發(fā)新型硒源的一條安全有效的途徑。酵母對多種微量元素都具有較強的富集作用,同時其還具有易生長,發(fā)酵周期短,自身含有豐富的營養(yǎng)成分等優(yōu)點,是將無機硒轉(zhuǎn)化為有機硒的理想載體[4~6]。關(guān)于富硒酵母的研制,國內(nèi)外均有報導,所用菌種大多局限于啤酒酵母,對其它酵母菌的富硒性能及發(fā)酵條件則缺少較深入的研究。1材料與方法1.1實驗材料及試劑安琪活性干酵母:湖北安琪酵母股份有限公司;活化培養(yǎng)基:蔗糖1g,蒸餾水80mL;發(fā)酵
4、培養(yǎng)基:YEPS培養(yǎng)基,即酵母粉(YE)10g/L,蛋白胨(P)10g/L,蔗糖(S)40g/L,pH自然;亞硒酸鈉、DAB(3,3′-二氨基聯(lián)苯胺)、已二胺四乙酸二鈉(EDTA-2Na)等。1.2實驗儀器721可見分光光度計,HHSyZI-Ni4電恒溫水浴鍋,HY-2調(diào)速多用振蕩器等?!髡吆喗椋翰覃惣t(1975-),女,長安大學環(huán)境科學與工程學院講師。E-mail:lhchaiwhy@yahoo.com.cn收稿日期:2005-08-011.3實驗方法1.3.1干酵母活化方法稱取2g活性干酵母,加入到預先滅菌過的活化培養(yǎng)基中,30℃靜置
5、活化2h。1.3.2培養(yǎng)方法將活化后的菌種按試驗要求接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中,30℃,200r/min搖床培養(yǎng),其它條件由發(fā)酵實驗具體而定。1.3.3培養(yǎng)條件初步優(yōu)化分析不同硒添加量、接種量、培養(yǎng)時間及裝液量對活性干酵母生物量和硒含量的影響,確定合適的發(fā)酵條件。1.3.4正交試驗設(shè)計選取L9(34)正交試驗表,進一步確認各影響因素的顯著性及多因素對實驗結(jié)果的綜合影響。1.3.5酵母生物量的測定將發(fā)酵液5000r/min離心10min,收集菌體,蒸餾水洗滌2次,收集新鮮酵母,60~70℃烘干至恒重即可得酵母生物量,以g/L表示。[7]1.3.6酵母中硒含量的測定可見分光
6、光度法。硒總含量(μg/L)=硒含量(μg/g)×生物量(g/L)2結(jié)果與討論2.1硒添加量對酵母生物量和硒含量的影響配制硒添加量不同的培養(yǎng)基,采用接種量10%,裝液量50mL/250mL三角瓶,于30℃,200r/min培養(yǎng)30h。結(jié)果見圖1。實驗結(jié)果表明,隨著硒添加量的增加,富硒酵母的生物量呈下降趨勢,酵母中硒含量及硒總含量均呈上升趨勢。說明安琪活性干酵母具有較強的耐硒和富硒能力,但隨著硒添加量的增加會抑制酵母的生長,而在一定范圍內(nèi),酵母的硒含量與發(fā)酵液中的硒濃度成正相關(guān)關(guān)系。當發(fā)酵培養(yǎng)基中的硒添加量≤20mg/L時,對酵母生長的抑制作用較小,同時硒含量也較
7、低;硒添加量≥30mg/L時,對酵母生長產(chǎn)生強烈的抑制作用,硒含量仍比較平緩的增加。但在實驗中發(fā)現(xiàn),當硒添加量大于20mg/L時,硒酵母已呈現(xiàn)明顯的紅色,這是因為在代謝過程中,酵母能把亞硒酸鈉還原成紅色單質(zhì)Se,而且培養(yǎng)基中亞硒酸鈉的濃度越大,它被還原而生成單質(zhì)硒也就越多,說明酵母將無機硒轉(zhuǎn)化為有機硒的能力是有一定限度的,當達到這一限度后,隨著培養(yǎng)基中亞硒酸鈉濃度的增加,[8]有機硒的含量不再增加反而會下降,而單質(zhì)硒的量卻增加了,這種單質(zhì)硒與硒酵母混在一起,很難用物理方法分開,當硒添加量大于20mg/L時,雖然酵母的硒含量較高,但因其中混有較多的單質(zhì)硒,因此實際
8、轉(zhuǎn)化無機硒的量并不高,可