安琪活性干酵母的富硒研究

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1、安琪活性干酵母的富硒研究Studiesonseleniumrichabilityofangelactivedryyeast柴麗紅苗丹CHAILi-hongMIAO-Dan（長安大學環(huán)境科學與工程學院，陜西西安710064）（EnvironmentalScienceandEngineeringCollegeofChang’anUniversity,Xi’an,Shaanxi710064,China）摘要：以安琪活性干酵母為菌種，分析了硒添加量、培養(yǎng)時間、接種量等發(fā)酵條件對其生長及富硒性能的影響，并通過正交試驗初步確定了發(fā)酵條件的最優(yōu)方案。Abstract:Inth

2、isresearch,theseleniumrichabilityofangelactivedryyeastanditsinitialoptimizedcultivationconditionwerestudiedbyorthogonalexperiment.關(guān)鍵詞：活性干酵母；硒；發(fā)酵條件Keywords:Activedryyeast；Selenium；Cultivationcondition硒（Selenium,Se）是人體內(nèi)必需的微量元素之一，具有諸多的生物學功[1，2]能，缺硒則會導致多種疾病的發(fā)生。人體內(nèi)的硒大多來源于食物，但食物中[3]硒含量通常很低

3、，難以滿足機體的需要。以無機硒作為硒源補充硒營養(yǎng)不足，儲存在一定的毒性外，其生物利用率也低。而利用生物轉(zhuǎn)化法，將無機硒轉(zhuǎn)化成有機硒，則可以提高硒的利用率，是開發(fā)新型硒源的一條安全有效的途徑。酵母對多種微量元素都具有較強的富集作用，同時其還具有易生長，發(fā)酵周期短，自身含有豐富的營養(yǎng)成分等優(yōu)點，是將無機硒轉(zhuǎn)化為有機硒的理想載體[4～6]。關(guān)于富硒酵母的研制，國內(nèi)外均有報導，所用菌種大多局限于啤酒酵母，對其它酵母菌的富硒性能及發(fā)酵條件則缺少較深入的研究。1材料與方法1.1實驗材料及試劑安琪活性干酵母：湖北安琪酵母股份有限公司；活化培養(yǎng)基：蔗糖1g，蒸餾水80mL；發(fā)酵

4、培養(yǎng)基：YEPS培養(yǎng)基，即酵母粉（YE）10g/L，蛋白胨（P）10g/L，蔗糖（S）40g/L，pH自然；亞硒酸鈉、DAB（3，3′-二氨基聯(lián)苯胺）、已二胺四乙酸二鈉（EDTA-2Na）等。1.2實驗儀器721可見分光光度計,HHSyZI-Ni4電恒溫水浴鍋,HY-2調(diào)速多用振蕩器等?！髡吆喗椋翰覃惣t（1975-），女，長安大學環(huán)境科學與工程學院講師。E-mail:lhchaiwhy@yahoo.com.cn收稿日期：2005-08-011.3實驗方法1.3.1干酵母活化方法稱取2g活性干酵母，加入到預先滅菌過的活化培養(yǎng)基中，30℃靜置

5、活化2h。1.3.2培養(yǎng)方法將活化后的菌種按試驗要求接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，30℃，200r/min搖床培養(yǎng)，其它條件由發(fā)酵實驗具體而定。1.3.3培養(yǎng)條件初步優(yōu)化分析不同硒添加量、接種量、培養(yǎng)時間及裝液量對活性干酵母生物量和硒含量的影響，確定合適的發(fā)酵條件。1.3.4正交試驗設(shè)計選取L9（34）正交試驗表，進一步確認各影響因素的顯著性及多因素對實驗結(jié)果的綜合影響。1.3.5酵母生物量的測定將發(fā)酵液5000r/min離心10min，收集菌體，蒸餾水洗滌2次，收集新鮮酵母，60～70℃烘干至恒重即可得酵母生物量，以g/L表示。[7]1.3.6酵母中硒含量的測定可見分光

6、光度法。硒總含量（μg/L）=硒含量（μg/g）×生物量（g/L）2結(jié)果與討論2.1硒添加量對酵母生物量和硒含量的影響配制硒添加量不同的培養(yǎng)基，采用接種量10%，裝液量50mL/250mL三角瓶，于30℃，200r/min培養(yǎng)30h。結(jié)果見圖1。實驗結(jié)果表明，隨著硒添加量的增加，富硒酵母的生物量呈下降趨勢，酵母中硒含量及硒總含量均呈上升趨勢。說明安琪活性干酵母具有較強的耐硒和富硒能力，但隨著硒添加量的增加會抑制酵母的生長，而在一定范圍內(nèi)，酵母的硒含量與發(fā)酵液中的硒濃度成正相關(guān)關(guān)系。當發(fā)酵培養(yǎng)基中的硒添加量≤20mg/L時，對酵母生長的抑制作用較小，同時硒含量也較

7、低；硒添加量≥30mg/L時，對酵母生長產(chǎn)生強烈的抑制作用，硒含量仍比較平緩的增加。但在實驗中發(fā)現(xiàn)，當硒添加量大于20mg/L時，硒酵母已呈現(xiàn)明顯的紅色，這是因為在代謝過程中，酵母能把亞硒酸鈉還原成紅色單質(zhì)Se，而且培養(yǎng)基中亞硒酸鈉的濃度越大，它被還原而生成單質(zhì)硒也就越多，說明酵母將無機硒轉(zhuǎn)化為有機硒的能力是有一定限度的，當達到這一限度后，隨著培養(yǎng)基中亞硒酸鈉濃度的增加，[8]有機硒的含量不再增加反而會下降，而單質(zhì)硒的量卻增加了，這種單質(zhì)硒與硒酵母混在一起，很難用物理方法分開，當硒添加量大于20mg/L時，雖然酵母的硒含量較高，但因其中混有較多的單質(zhì)硒，因此實際

8、轉(zhuǎn)化無機硒的量并不高，可