響應(yīng)面法優(yōu)化鹿血肽的制備工藝.pdf

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1、化學(xué)工程師ChemicalEngineer2011年第11期文章編號(hào)：1002一¨24(20l1lu—oo64-o4=芏=穗篩響應(yīng)面法優(yōu)化鹿血肽的制備工藝：園：墟’高冷，劉達(dá)，謝冠男(長(zhǎng)春工業(yè)大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，吉林長(zhǎng)春130012J摘要：采用堿性蛋白酶水解鹿血蛋白制備鹿血肽。應(yīng)用響應(yīng)面分析法選取溫度、時(shí)間、pH值、酶量4個(gè)主要因素，以水解率為響應(yīng)值，對(duì)其工藝進(jìn)行了優(yōu)化。得出了鹿血蛋白水解的最佳工藝條件為：溫度(53％)、時(shí)間(5．5h)、pH(9．5)、酶量(1272U·g-i)，在此條件下鹿血的實(shí)際水解率為22．13

2、％。實(shí)驗(yàn)證明響應(yīng)面法對(duì)鹿血肽的制備條件的優(yōu)化是可行的，得到的工藝參數(shù)具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。關(guān)鍵詞：鹿血；酶水解；響應(yīng)面法中圖分類號(hào)：Q503文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：AResponsesurfacemethodologytooptimizethepreparationprocessdeerbloodpeptideGAOLeng，LIUDa，XIEGuan-nan(SchoolofChemistryandLifeScience，ChangchunUniversityofTechnology，Changehun130012，China)Abstr

3、act：Thedeerbloodproteinpeptidealcalasehasbeenprepairdbyalcalaseprotease．Applicationofre—sponsesurfacemethodologyselectedtemperature，time，pH，Thequanti~ofenzymefourmainfactors，thevalueofthehydrolysisrateofresponse，itstechnologyhasbeenoptimized．Optimumconditionsofprot

4、eolysisofdeerMoodobtainedtemperature(53％)，time(5．5h)，pH(9．5)，enzyme(1272U‘g)，Thedeerbloodintheactualhydroly-sisratewas(22．13％)．Experimentsshowedthattheresponsesur[acemethodofpreparationconditionsondeerbloodpeptideoptimizationisfeasible，theprocessparametershavetobeo

5、fpracticalvalue．Keyword：deerblood；enzymatichydrolysis；responsesurfacemethodology(RSM)鹿血系梅花鹿和馬鹿的血液。具有提高免疫力、堿性蛋白酶(Alcalase)(Novo公司)；其它試劑均為抗疲勞等功效。鹿血中含水量為80％一81％，有機(jī)物分析純。占16％一17％，主要是蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)含量為80％I¨。GL一21LM離心機(jī)；DK—S16電熱恒溫水浴鍋鹿血肽是指在蛋白酶的作用下將鹿血中的蛋(上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司)；電子天平(梅特勒一白質(zhì)水解產(chǎn)

6、生的多肽。多肽具有極強(qiáng)的活性和多樣托利多儀器設(shè)備有限公司)。性，可全面調(diào)節(jié)人體生理功能，增強(qiáng)人體生理活性；1．2方法多肽不僅能提供人體生長(zhǎng)發(fā)育所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而1．2．1鹿血肽的制備工藝采用堿性蛋白酶進(jìn)行且具有特殊的生物學(xué)功能，比蛋白質(zhì)更易人體吸水解，調(diào)節(jié)酶量與底物配比，同時(shí)調(diào)節(jié)溶液溫度收。近年來(lái)我國(guó)對(duì)鹿血的研究?jī)H限于原血，鹿血產(chǎn)50oC，pH值8．0；反應(yīng)過(guò)程中不斷加入1M·L『的品較單一，其中大部分是鹿血酒和鹿血粉。在歐洲NaOH，使pH值保持恒定，水解4h。待水解結(jié)束后等發(fā)達(dá)國(guó)家，他們主要利用動(dòng)物血液酶解開(kāi)發(fā)肽類沸水浴

7、10min使酶滅活，然后用1M·L-HC1將水解試劑和藥物【2】。因此，采用酶水解鹿血蛋白對(duì)鹿血資液pH值調(diào)整為7．0，3800r·rain離心20rain，備用。源開(kāi)發(fā)具有重要的意義。1．2．2水解率的測(cè)定參照甲醛滴定法，水解率的計(jì)算公式：1實(shí)驗(yàn)部分DH％=M(V1一V2)(1000／cwo)(1／htot)式中M：NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度；V。：滴定樣品消耗1．1材料、試劑及儀器的0．05tool·L的NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL；V2：空鹿血(梅花鹿)(伊通吉云鹿業(yè)發(fā)展有限公司)；白試驗(yàn)所消耗的0．05mol·LNaOH

8、標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL；Cwo：WPC溶液的蛋白濃度，g·L；V：甲醛滴定的水解液的體積數(shù)，mL；htot：每克原料蛋白質(zhì)中收稿日期：2011-10—19肽鍵的毫摩爾數(shù)，對(duì)于血液蛋白，該值取8．3【4．。作者簡(jiǎn)介：高冷(1963一)，男，吉林省，碩士，長(zhǎng)春工業(yè)大學(xué)副教授主要從事天然產(chǎn)物研究。