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《大豆異黃酮對過氧化氫及脂多糖誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細胞損傷保護機制的實驗研究-論文.pdf》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、150中華心血管病雜志2014年2月第42卷第2期ChinJC?ardiolFeb堅_v:篁:.基礎(chǔ)研究.大豆異黃酮對過氧化氫及脂多糖誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細胞損傷保護機制的實驗研究王燕補蔚萍謝宏曲愛華劉軍【摘要】目的探討大豆異黃酮(soybeanisoflavone,SI)對人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)損傷的保護作用及其機制。方法建立內(nèi)皮細胞脂質(zhì)過氧化損傷模型。然后實驗分為9組:(1)正常對照組;(2)過氧化氫(H:O)氧化損傷組(HO組):在培養(yǎng)基中加入2mmol/L的HO:誘導(dǎo)損傷4h;(3)脂多糖(LPS)氧化損傷組(LPS組):在培養(yǎng)基中加入2mmol/L的L
2、PS誘導(dǎo)損傷4h;(4)H:O:加sI低劑量(1mg/m1)組(HO+SI低劑量組)、中劑量(2.5mg/m1)組(H:O+sI中劑量組)和高劑量(5mg/m1)組(H,O,+sI高劑量組);(5)LPS加SI低劑量(1mg/m1)組(LPS+sI低劑量組)、中劑量(2.5mg/m1)組(LPS+sI低劑量組)和高劑量(5mm1)組(LPS+sI高劑量組)。M1Tr法觀察sI對HUVEC活性的影響。雙波長熒光分光光度法測定HUVEC細胞內(nèi)游離ca濃度。檢測各組內(nèi)皮細胞勻漿中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH—Px)活性。EL
3、ISA法測定培養(yǎng)的細胞上清液中白細胞介素6(IL-6)表達的變化。測定細胞凋亡率。結(jié)果(1)H:0:組和LPS組較正常對照組血管內(nèi)皮細胞損傷明顯、細胞增殖少(P均<0.05)、內(nèi)皮細胞內(nèi)游離ca濃度高(P均<0.05),細胞培養(yǎng)上清液和細胞勻漿中MDA含量和IL-6均高(P均<0.05),SOD、GSH—Px活性均低(P均<0.05),凋亡率均高,分別為(37.8±1.8)%和(38.9±1.1)%(P均<0.05),上述指標HO組和LPS組組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。(2)H:O+sI中劑量組和LPS+SI中劑量組SOD和GSH—Px分別明顯高于HO組和LPS組
4、(P均<0.05),MDA含量、細胞內(nèi)游離ca“濃度和IL-6則分別明顯低于H0組和LPS組(尸均<0.05),凋亡細胞數(shù)量亦分別低于H:O:組和LPS組(P均<0.05)。結(jié)論sI可保護和修復(fù)H:O:或LPS引起的血管內(nèi)皮細胞損傷,其機制可能與保護細胞的線粒體,提高細胞的抗氧化酶活性,降低細胞內(nèi)游離ca“濃度有關(guān)?!娟P(guān)鍵詞】內(nèi)皮細胞;異黃酮類;過氧化氫;脂多糖類ProtectiveeffectsofsoybeanisoflavoneonhumanumbilicalveinendothelialcellinjuryinducedbyH2O2andlipopolys
5、accharideWangYah,BuWeiping,Xie舶,QAihua,LiuJun.InstituteforBiomedicalSciencesofPain,TangduHospitaZ,urthMilitaryMedicafUniversity.Xian710038,inaCorrespondingauthor:LiuJun,Email:tutuhe@corn【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectsandrelatedmechanismsofsoybeanisoflavone(SI)onhu
6、manumbilicalveinendothelialcells(HUVECs)iniuryinducedbyH,O,andlipopo1vsaccharide(LPS).MethodsH,0,andLPSwereusedtoindueeHUVECsiniuryinvitro.Nineexperimentalgroupswereexamined:controlgroup,H2O2(2mmol/Lfor4h),LPS(2mmol/Lfor4h),H202+lowdoseSI(1mg/m1),H2O2+moderatedoseSI(2.5mg/m1),H2O2+hig
7、hdoseSI(5mg/m1),LPS+lowdoseSI(1iTIg/m1),LPS+moderatedoseSI(2.5mg/m1),LPS+highdoseSI(5mm1).ThesurvivalratioofHUVECswasdetectedwithMTYassay.TheculturedcellswereloadedbyFura一2/AMandthechangeoffCaIinHUVECswasmeasuredbyfluorospeetrophotometry.Thecontents0fmalondialdehvde(MDA),superoxidedis
8、nmtas