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1、第51卷第2期林業(yè)科學(xué)Vo1．51．No．22015年2月SCIENTIASILVAESINICAEFeb．，2015doi：10．11707／j．1001—7488．20150214桑枝1一脫氧野尻霉素的提取及其含量與儀一葡萄糖苷酶抑制活性的相關(guān)性分析術(shù)劉超史正琴向偉黃先智徐立蘭俊(1．西南大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院重慶400715；2．廈門綠洲環(huán)保產(chǎn)業(yè)股份有限公司廈門361004)摘要：【目的】1一脫氧野尻霉素(DNJ)是一種降血糖功效較好的天然活性產(chǎn)物，在桑樹中的含量相對(duì)較高。對(duì)超聲一微波聯(lián)合輔助提取桑枝中DNJ的工藝進(jìn)行優(yōu)化，
2、以獲得較高提取率；同時(shí)，分析桑枝水提物中DNJ含量與0【一葡萄糖苷酶抑制活性的相關(guān)性，以獲得其中DNJ對(duì)d一葡萄糖苷酶抑制活性的貢獻(xiàn)程度。這可能為桑枝中DNJ的提取、分離及桑枝一葡萄糖苷酶抑制劑的極性分布等研究提供一定的依據(jù)。【方法】利用9一芴甲氧羰酰氯對(duì)DNJ進(jìn)行衍生化，彌補(bǔ)其本身不具有紫外吸收特性的缺點(diǎn)，利用高效液相色譜在254nm波長(zhǎng)下進(jìn)行定性定量檢測(cè)；單因素試驗(yàn)分別求得微波處理時(shí)間、超聲波處理時(shí)間和液料比的優(yōu)化范圍，以響應(yīng)曲面法對(duì)超聲一微波聯(lián)合輔助提取DNJ三因素的平方和、均方、P值、R。等參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，獲得二次多項(xiàng)
3、回歸方程和相應(yīng)的最優(yōu)提取條件；在此基礎(chǔ)上利用系統(tǒng)溶劑法萃取濃縮的水提物，計(jì)算石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水4種極性部分的a一葡萄糖苷酶抑制活性(通過酶標(biāo)儀在415nm波長(zhǎng)處測(cè)定ot一葡萄糖苷酶對(duì)4一硝基苯一0【一D吡喃葡萄糖苷的分解率來計(jì)算)與DNJ的含量，并對(duì)二者之間的關(guān)系進(jìn)行分析?！窘Y(jié)果】用0．05tooL·L的鹽酸溶液提取，微波處理9．60min、超聲波處理3O．89min和液料比46．47mL-g時(shí)達(dá)到最優(yōu)條件，此時(shí)DNJ的產(chǎn)率為0．205％，結(jié)果檢驗(yàn)值與優(yōu)化值的擬合率達(dá)99．27％，相對(duì)于對(duì)照組增長(zhǎng)了l0．86％；正
4、丁醇部分DNJ的含量最高，乙酸乙酯次之，水部分仍含有少許，石油醚部分為零，說明正丁醇的萃取效果較好；正丁醇部分的抑制曲線趨勢(shì)與乙酸乙酯部分相近，水部分與石油醚部分相近，且各萃取部分之間的Ic都差異顯著，結(jié)合DNJ的含量分布，說明桑枝中具有一葡萄糖苷酶抑制活性的物質(zhì)問有一定的極性差異；根據(jù)各萃取部分中DNJ的含量，從其半抑制濃度中換算出DNJ的濃度，即為“其中DNJ的濃度”，正丁醇部分“其中DNJ的濃度”與DNJ標(biāo)準(zhǔn)品的Ic。差異不顯著，說明此部分Ot一葡萄糖苷酶抑制活性物質(zhì)幾乎盡是DNJ；水部分雖含有少量的DNJ，但其活性卻
5、相對(duì)更小，可能其中含有具備提高0l一葡萄糖苷酶活性的多糖等物質(zhì)，或一些糖類等黏性物質(zhì)影響了DNJ與酶的結(jié)合；乙酸乙酯部分“其中DNJ的濃度”比DNJ標(biāo)準(zhǔn)品的Ic小，可能是由于此部分含有個(gè)別黃酮類等對(duì)DNJ具有活性增強(qiáng)／協(xié)同作用，或其中含有一些游離生物堿、香豆素或黃酮苷元等物質(zhì)具備相似活性；石油醚部分不含DNJ，卻有一定的o【一葡萄糖苷酶抑制活性，說明桑枝中含有一些極性小的脂溶性化合物具備Or．一葡萄糖苷酶抑制活性?！窘Y(jié)論】微波處理初步粉碎的新鮮桑枝，既有干燥作用又有輔助提取效果，而后用超聲波輔助浸提可提高DNJ的提取效率；桑
6、枝中主要的Ot一葡萄糖苷酶抑制是DNJ，除此外還可能含有一些極性相對(duì)較小的活性成分。這些結(jié)果有利于桑枝DNJ及其他降血糖活性成分的進(jìn)一步研究。關(guān)鍵詞：1一脫氧野尻霉素；超聲一微波聯(lián)合輔助提取法；響應(yīng)曲面法；0I一葡萄糖苷酶抑制活性；桑枝中圖分類號(hào)：TQ464．4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1001—7488(2015)02—0112—091．DeoxynojirimycinExtractionfromRamulusMoriandRelationshipAnalysisbetweenItsContentinExtractsandG
7、lucosidaseInhibitoryActivityLiuChaoShiZhengqinXiangWeiHuangXianzhiXuLiLanJun(1．CollegeofBiotechnology，SouthwestUniversityChongqing400715；2．OasisSourcesEnvironmentalProtectionIndustryLid．Xiamen361004)Abstract：【Objective】1一Deoxyn0jirimycin(DNJ)isoneoftheimportantnatu
8、ralactivesubstanceswithgoodhypoglycemiceffect．MulberryhasarelativelyhighDNJcontent．Toobtainhighextractionratefromramulusmori，themicrowave．ultraso
