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《茶葉中茶多酚含量測定工作方案.doc》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、茶葉中茶多酚含量測定工作方案一、紫外分光光度法1.實(shí)驗(yàn)原理在一定PH條件下，酒石酸鐵能與多酚類物質(zhì)反應(yīng)形成藍(lán)紫色絡(luò)合物，該絡(luò)合物在540nm波長下具有最大吸光度。。用分光光度法測定其含量2.儀器試劑1)儀器名稱數(shù)量紫外分光光度計(jì)1臺(tái)電子天平1臺(tái)電爐1個(gè)燒杯（100mL）5個(gè)燒杯（500mL）2個(gè)量杯（50mL）1個(gè)容量瓶（100mL、250mL）各1個(gè)比色管（50mL）7個(gè)比色皿1個(gè)吸量管（2mL、5mL、10mL）各1根膠頭滴管1個(gè)2)試劑A.酒石酸亞鐵溶液:稱取1.0g硫酸亞鐵()和5.0g酒石酸鉀
2、鈉()，用水溶解并定容至1L（低溫保存有效期10天)。B.PH=7.5磷酸鹽緩沖液1/15mol/L磷酸氫二鈉:稱取23.9g十二水磷酸氫二鈉()，加水溶解后定容至IL。1/15mol/L磷酸二氫鉀:稱取經(jīng)110℃烘干2h的磷酸二氫鉀()9.08g,加水溶解后定容至1L。取上述1/15mol/L的磷酸氫二鈉溶液85mL和1/15mol/L的磷酸二氫鉀溶液15mL混合均勻。3.工作步驟1)試樣的制備與測定：稱取磨碎茶葉試樣0.1g(準(zhǔn)確至0.0001g)，置于小燒杯中，加溫水30mL，溶解冷卻，注入100
3、mL容量瓶中，定容、搖勻、過濾，棄去初濾液約20mL，剩余的濾液為試液【1】。取試液【1】2mL于50mL比色管中，加酒石酸鐵10mL搖勻，用PH=7.5的磷酸鹽緩沖液定容。取2mL蒸餾水于50mL比色管中，加酒石酸鐵10mL搖勻，用PH=7.5的磷酸鹽緩沖液定容作為空白對照，于540nm處用1cm比色皿測定吸光度值。1)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制與測定：稱取茶多酚純品0.2500g，加水溶解定容至250mL，混勻，即為每毫升含1mg茶多酚的標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別稱取標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0m
4、L、4.0mL于一組50mL比色管中，各加水至10mL，再加酒石酸鐵溶液10mL，用PH=7.5的緩沖液定容至刻度，混勻后用1cm比色皿，以試劑空白作參比，于波長540nm處測定吸光度，繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.數(shù)據(jù)計(jì)算茶葉中茶多酚的含量以干態(tài)質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示，按下式計(jì)算：茶多酚(%)=式中：——試液的總量,mL——測定時(shí)的用液量,mL——試樣的質(zhì)量，gm——試樣干物質(zhì)含量，%;A——試樣的吸光度二、高錳酸鉀直接滴定法1.工作原理茶葉中茶多酚易溶于熱水，在用靛紅作指示劑的情況下，樣液中能被高錳酸鉀氧化的物質(zhì)基本上
5、都屬于茶多酚物質(zhì)。根據(jù)消耗1ml0.318g/ml的高錳酸鉀相當(dāng)于5.82mg茶多酚的換算系數(shù)，可計(jì)算茶多酚的含量。2.儀器試劑1)儀器分析天平、電動(dòng)磁力攪拌器、電熱水浴鍋、500ml白瓷皿。2)試劑A.0.1%靛紅溶液：稱取靛紅1g加入少量水?dāng)噭蚝?，再慢慢加入相對密度?.84的濃硫酸50ml，冷卻后用蒸餾水定容至1000ml，如果靛紅不純，可下法磺化處理是：稱取靛紅1g，加濃硫酸50ml，在80℃烘箱或水浴中加熱磺化4~6h，用蒸餾水定容至1000ml，過濾后貯于棕色瓶中。A.0.630%草酸溶液：
6、準(zhǔn)確稱取草酸6.3034g，用蒸餾水溶解后定容至1000ml。B.高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取AR的高錳酸鉀1.27g，用蒸餾水溶解后定容至1000ml。準(zhǔn)確吸取0.630%草酸溶液10ml，放入250ml錐形瓶中（平行2份），加入蒸餾水50ml，再加入相對密度為1.84的濃硫酸10ml，搖勻，在70~80℃水浴中保溫5分鐘，取出后用高錳酸鉀進(jìn)行滴定。開始慢滴，待紅色消失后再滴第二滴，以后可逐漸加快，邊顛邊搖，待溶液出現(xiàn)淡紅色保持1分鐘不變即為終點(diǎn)。按下式計(jì)算高錳酸鉀溶液的濃度：ω（kMnO4濃度，%）=2.
7、工作步驟1)供測試液的準(zhǔn)備：準(zhǔn)備稱取茶葉磨碎樣品1g，放在200ml三角燒瓶中，加入沸蒸餾水80ml，在沸水浴中浸提30分鐘，然后抽濾、洗滌，濾液倒入100ml容量瓶中，冷至室溫，最后用蒸餾水定容至100ml，搖勻。2)測定：取200ml蒸餾水放入白瓷皿中，加入0.1%靛紅溶液5ml，再加入供測試液5ml，開動(dòng)磁力攪拌器，用已標(biāo)定的高錳酸鉀溶液邊攪拌邊滴定，滴定速度以1滴/s為宜，接近終點(diǎn)時(shí)應(yīng)慢滴。直到溶液由深藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)榱咙S色為止，記下消耗的高錳酸鉀毫升數(shù)。同時(shí)做空白測定。3.結(jié)果計(jì)算X=X—茶多酚的含
8、量，%B—空白消耗的高錳酸鉀毫升數(shù)，mlA—樣品消耗的高錳酸鉀毫升數(shù)，mlω--高錳酸鉀的濃度，%m—樣品的質(zhì)量gV1—測定用供測試液的體積，mlV2--供測試液的體積，ml
