檸檬生物活性物質(zhì)分離純化及工藝研究碩士論文

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1、分類號密級：密級檸UDC檬密級：生物活性物質(zhì)分碩士學位論文離純化及工檸檬生物活性物質(zhì)分離純化及工藝研究藝研究作者姓名：全曉艷西學科、專業(yè)：食品科學華大學號：212010083201007學碩指導教師：李玉鋒士學完成日期：2013.04位論文ClassifiedIndex:UDC:密級：XihuaUniversityMasterDegreeDissertationTheResearchofThePurificationAndTechologyoflemonBiologicallyActiveSubstances

2、Candidate:QuanXiaoyanMajor:FoodscienceStudentID:212010083201007Supervisor:Prof.LiYufengApril,2013西華大學學位論文獨創(chuàng)性聲明作者鄭重聲明：所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下進行研究工作所取得的成果。盡我所知，除文中已經(jīng)注明引用內(nèi)容和致謝的地方外，本論文不包含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果，也不包含其他已申請學位或其他用途使用過的成果。與我一同工作的同志對本研究所做的貢獻均已在論文中做了明確的說明并表示了謝意。

3、若有不實之處，本人愿意承擔相關(guān)法律責任。學位論文作者簽名：指導教師簽名：日期：日期西華大學學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，在校攻讀學位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)屬于西華大學，同意學校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，西華大學可以將本論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復印手段保存和匯編本學位論文。(保密的論文在解密后遵守此規(guī)定)學位論文作者簽名：指導教師簽名：日期：日期西華大學碩士學位論文摘要檸

4、檬（Citruslimon）中功能成分豐富，近年來隨著經(jīng)濟發(fā)展，專家學者們越來越關(guān)注植物保健品的開發(fā)，檸檬具有降血糖、抗菌、抗氧化性等多種生物活性，奠定了其作為未來保健品的備選來源的基礎(chǔ)，本論文對檸檬中總皂苷、檸檬苦素化合物、微量元素鋅含量進行了測定，并測定了其中超氧化物歧化酶活力，對檸檬多肽進行了初步研究。本文采用大孔吸附樹脂分離、純化了檸檬中的總皂苷，建立了紫外分光光度法對其含量進行測定。結(jié)果表明10倍稀釋檸檬皂苷提取液中總皂苷含量為27.1mg/L，20倍稀釋檸檬皂苷提取液中總皂苷含量為27mg/L，對

5、線性試驗考察顯示總皂苷以人參皂苷Re2計在質(zhì)量范圍40~200μg內(nèi)線性關(guān)系良好（R=0.9997）。平均加標回收率為102%、108.5%和111%。精密度和重復性表現(xiàn)良好，相對標準偏差分別為1.82%、1.5%。采用80%飽和度硫酸銨提取蛋白質(zhì)的方法初步提取了檸檬中超氧化物歧化酶，并通過修改的Marklund法對其活力進行了測定，得檸檬粗酶提取液活力為25.99u/mL，2.0mg/mL酶標準液活力為332.42u/mL，重復性和精密度試驗表現(xiàn)性良好，RSD為2.15%和2.16%。實驗探討了超臨界二氧化

6、碳萃取檸檬籽中檸檬苦素化合物工藝，并將最佳工藝條件下提取的樣液經(jīng)高效液相色譜進行了含量測定。檸檬苦素標準品在質(zhì)量濃度240mg/L-80mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（R=0.9993），檸檬籽中其含量為61.03mg/L，樣品在4℃20h內(nèi)穩(wěn)定，重復性和精密度實驗RSD分別為1.04%、1.63%。為了測定檸檬中微量元素鋅的含量，樣品按程序消解15min后，在最佳原子吸收光譜儀工作條件下對其含量進行測定，檸檬汁中鋅含量為1.13μg/g。鋅濃度在20.05μg/mL-0.6μg/mL范圍內(nèi)線型關(guān)系良好（R=0.

7、9993）,加標回收率為91%、102.25%、105%。對測定不確定度進行了評估，其中對含量結(jié)果影響最大的主要是樣品重復性測定、鋅標準儲備液的含量和最小二乘法擬合標準曲線計算含量，相對不確定度分別為0.59%、0.5%、0.274%，而鋅標準溶液配制時使用的移液槍和容量瓶和樣品消解液定容對測定結(jié)果影響較小，采用電子天平稱量樣品對測定結(jié)果的影響可以忽略不計。[96]采用Khanan方法初步分離檸檬中多肽，并采用超濾離心管截留得到5KD-30KD的檸檬多肽粗提物。茚三酮顯色反應(yīng)顏色變化為無色變?yōu)樽霞t色變?yōu)樗{色。

8、經(jīng)SDS-PAGE結(jié)果顯示在10kD-15Kd范圍內(nèi)有條帶出現(xiàn)。經(jīng)反相高效液相色譜洗脫檸檬多肽粗提物與重組人胰島素標準品，結(jié)果顯示在幾乎相同的保留時間有吸收峰出現(xiàn)。對檸檬樣品梯度洗脫條件進行了選擇，結(jié)果表明梯度洗脫條件較好的是：流動相流速為0.8mL/min，0-1min:A液為:90%、B液為10%；1-30min：A液為40%、B液為60%。I檸檬生物活性物質(zhì)分離純化及工藝研究關(guān)鍵詞：檸檬；總皂