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1、天山巖黃芪根中多糖的提取及含量測定作者:海力茜・陶爾大洪,孫蓮,馬合木提・買買提明,何燕【關(guān)鍵詞】天山巖黃芪根;,,多糖含量;,,分光光度法 摘要:目的研究天山巖黃芪根中多糖的含量。方法采用分光光度法測定天山巖黃芪根中多糖的含量,以葡萄糖為對照品,以苯酚-濃硫酸為顯色劑,在486nm處測定樣品溶液的吸光度。結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)曲線為A=51.654C+0.0372,r=0.9998,RSD為1.28%,1.50%。結(jié)論該方法操作簡單,靈敏度高?! £P(guān)鍵詞:天山巖黃芪根;多糖含量;分光光度法 Abstract:ObjectiveTostudythe
2、quantityofPolysaccharideintherootsofHedysarumsemenoviiRegeletHerd.MethodsUsesmethodinspectrophotometrictodeterminethePolysaccharideintherootsofHedysarumsemenoviiRegeletHerd.Taketheglucoseastheparison,takethephenol-strongsulfuricacidasthedeveloper,λ=486nmdeterminationsamplesolutionattrac
3、tstheluminosity.ResultsThestandardcurveethodissimple,sensitiveandaccurate. KeysemenoviiRegeletHerd;Polysaccharide;SX-spectrophotometry 豆科巖黃芪屬植物,具有補(bǔ)氣固表、利尿托毒、排膿、斂瘡生肌之功能[1]?,F(xiàn)代藥理研究證明其有強(qiáng)心、利尿、降壓、護(hù)肝、抗腎炎和提高免疫等作用。該屬植物化學(xué)成分較復(fù)雜,其中具有生物活性的成分有多糖、木質(zhì)素類、黃酮類化合物、香豆苯醚類、生物堿類、皂苷類、甾體類、氨基酸、微量元素等眾多的生物活性物質(zhì)[2~8]
4、。天山巖黃芪HedysarumsemenoviiRegeletHerd為豆科(Leguminosea)巖黃芪屬(HedysarumLinn.)植物,分布于新疆烏魯木齊、伊犁、阿勒泰、塔城等地區(qū),經(jīng)過調(diào)研和 2.2.3天山巖黃芪多糖液的制備精密稱取干燥至恒重的天山巖黃芪多糖0.1g,置100mg容量瓶中,加蒸餾水至刻度,再精密吸取10ml于另一容量瓶中,再加蒸餾水至刻度,搖勻備用,得0.1mg/ml的天山巖黃芪多糖溶液?! ?.3最大吸收波長的選擇分別配制0.1mg/ml的葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、醛糖溶液,分別精密吸取1ml于具塞試管中,分別加苯酚試液1ml
5、,搖勻,迅速加濃硫酸5ml,振搖2min后,旋轉(zhuǎn)于沸水浴中加熱15min,取出置冷水中冷卻置室溫,以苯酚-濃硫酸溶液為空白,用紫外分光光度儀在400~800nm范圍內(nèi),掃描光譜圖,得上述糖溶液的最大吸收分別為486,488,479,488,479nm。以同樣的方法處理天山巖黃芪多糖樣品溶液,在486nm處有最大吸收?! ?.4葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別精密吸取配制的0.1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml于具塞試管中,分別加蒸餾水1.0,0.8,0.6,0.4,0.2,0ml,分別給試管編號。分別加苯酚試液1ml,搖勻,迅速加濃硫酸5ml
6、,振搖2min后,旋轉(zhuǎn)于沸水浴中加熱15min,取出置冷水中冷卻置室溫,以苯酚-濃硫酸溶液為空白,于486nm處測吸光度,得回歸方程A=51.654C+0.0372,r=0.9998(n=5),線性關(guān)系較好。 2.5測定換算因子f精密稱取已干燥至恒重的天山巖黃芪多糖4.048mg于100ml容量瓶中,用蒸餾水稀釋至刻度,搖勻,得多糖供試品溶液。精密吸取該溶液2ml,按“標(biāo)準(zhǔn)曲線”項(xiàng)下操作,測定486nm處的吸光度為2.9322,由回歸方程計(jì)算供試品中葡萄糖的含量為0.056mg/ml,按下式計(jì)算f。f=g),由公式得f=3.614(n=3)。 2.6樣品中多糖的含
7、量測定精密稱取樣品1g于100ml容量瓶中,加水適量,80℃超聲提取30min,加水至刻線,吸取2ml于具塞試管中,按“標(biāo)準(zhǔn)曲線”項(xiàng)下的操作,測定486nm處的吸光度。多糖(%)=CDf/g/ml)0.4ml,5份,天山巖黃芪多糖供試液(0.1mg/ml)0.4ml,5份,按“標(biāo)準(zhǔn)曲線”項(xiàng)下的操作,分別測定486nm處的吸光度,計(jì)算得RSD1=1.28%,RSD2=1.50%。 3討論 通過對天山巖黃芪根中多糖的含量測定,可知其中多糖含量在5.23%~9.13%之間,可見用分光光度法測定天山巖黃芪根中多糖的含量是可行的。本方法穩(wěn)定可靠,簡單易行。