黃芪中黃芪多糖含量的測定

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1、2011年7月第l3卷第7期中國現(xiàn)代中藥ModemChineseMedicine黃芪中黃芪多糖含量的測定△趙強強,韓麗,潘媛,王淼,楊明(1.成都中醫(yī)藥大學(xué)中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點實驗室,四川成都6l1137;2.江西中醫(yī)學(xué)院現(xiàn)代中藥制劑教育部重點實驗室,江西南昌330004)[摘要]目的:建立黃芪中黃芪多糖的含量測定方法。方法:采用比色法測定黃芪多糖的含量。結(jié)果:測定波長為489nm,葡萄糖在2.0—14.0la,g·mL線性關(guān)系良好,平均加樣回收率為99.84%,RSD=3.71%(n=6)。結(jié)論:該方法簡便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好,可用于黃芪中黃

2、芪多糖的含量測定。[關(guān)鍵詞】黃芪多糖APS;苯酚一硫酸法;含量測定黃芪為常用中藥,是豆科植物蒙古黃芪即得。Astragal~membranaceu~(Fisch.)Bge.vat.mongholicus2.2供試品溶液制備(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪Astragalusmembranaceus精密稱取黃芪粗粉5.0g,加堿水50mL回流提(Fisch.)Bge.的干燥根,具有補氣升陽,固表止取2次,每次1h,放冷加溶劑補足重量,過濾,精汗,利水消腫,生津養(yǎng)血,行滯通痹,托毒排膿,密吸取濾液0.2mL,蒸餾水定容至100mL量瓶中,斂瘡生肌

3、的功能?。黃芪中含有皂苷、黃酮、多糖、搖勻即得。氨基酸及微量元素等多種成分,其中黃芪多糖2.3測定方法(Astragaluspolysaccharides,APS)是黃芪主要活性精密吸取對照品、供試品溶液各2mL于具塞試成分之一。現(xiàn)代研究表明,APS具有促進免疫調(diào)管中,分別加入5%苯酚溶液1.0mL,搖勻,迅速節(jié)]、抗腫瘤]、抗病毒、抗輻射、抗衰老等多種加入5.0mL濃硫酸,振搖2min,置沸水浴中加熱生物活性。本實驗采用比色法對黃芪中多糖進行含15min,然后置冷水浴中冷卻30min,隨行以蒸餾量測定。水為空白對照,在489llm處測定吸光

4、度。2.4線性范圍考察刮1材料與方法精密吸取葡萄糖對照品溶液0.2,0.4,0.6,1.1儀器0.8,1.0,1.2,1.4mL置于25mL容量瓶中,加蒸UV一1700紫外分光光度計(SHIMADZU餾水至刻度,搖勻。精密吸取上述各溶液2mL于具CORPORATION),F(xiàn)A1104電子分析天平塞試管中,按照2.3測定方法分別加入5%苯酚溶(HANGPING)。液1.0mL,在489am處測定吸光度。以吸光度對濃1.2試藥度進行線性回歸,得回歸方程A=69.679C十河北黃芪(四川I利民中藥飲片有限責(zé)任公司),0.0253,r=0.9962。

5、結(jié)果表明,葡萄糖在2.0~經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)鑒定教研室裴瑾副教授鑒定為膜14.0Ixg·mL線性關(guān)系良好。莢黃芪;D一無水葡萄糖對照品(中國藥品生物制品2.5精密度試驗檢定所,批號:110833—200503,供含量測定用);精密吸取葡萄糖對照品溶液6份,依法顯色后苯酚、濃硫酸等試劑均為分析純。測定吸光度,計算RSD=1.62%,說明儀器精密度2方法與結(jié)果良好。2.1對照品溶液制備2.6顯色后穩(wěn)定性試驗精密稱取105℃干燥至恒重的D一無水葡萄糖取黃芪多糖樣品溶液2mL,依法顯色后放置,100mg,加水溶解并定溶于100mL量瓶中,搖勻分別在0,

6、15,30,45,60min測定吸光度,計算[基金項目]國家科技重大新藥創(chuàng)制專項(2009ZX09103—307)[通訊作者]韓麗,E—mail:hanliyx@163.eom;楊明,E—mail:yangmingl6@126.eom·29·2011年7月第13卷第7期中國現(xiàn)代中藥ModemChineseMedicineJu1.2011Vo1.13No.7RSD=2.26%,表明樣品溶液顯色后1h內(nèi)穩(wěn)定。具塞試管中,加5%苯酚試液1mL,混勻,迅速加入2.7重復(fù)性試驗5mL濃硫酸,振搖2min,置沸水浴加熱15min,取對同一批黃芪多糖樣品進

7、行6次獨立測定吸光出置冷水中冷卻,隨行以蒸餾水為空白,于UV一度,結(jié)果RSD=3.58%。1700上從400~600nm進行掃描,發(fā)現(xiàn)對照品和樣品2.8加樣回收率試驗溶液在489nm均有最大吸收,故波長確定為489nm。取6份已知含量的黃芪粗粉2.5g,精密稱定,3.3溶劑用量考察精密加入適量葡萄糖對照品,按正文擬定的方法制精密稱取5.0g黃芪粗粉3份,分別加人堿水備供試品溶液,精密吸取供試品溶液2mL于具塞試40,5O,60mL回流提取1h,放冷加溶劑補足重管中,按2.3測定方法分別加入5%苯酚溶液量,過濾,精密吸取濾液0.2mL,蒸餾水定

8、容至1.0mL,在489nm處測定吸光度,計算結(jié)果見100mL量瓶中,精密吸取上述溶液各2mL于具塞表1。試管中。按2.3測定方法分別加入5%苯酚溶液1.0mL,在

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