黃芪中黃芪多糖含量的測(cè)定

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1、2011年7月第l3卷第7期中國(guó)現(xiàn)代中藥ModemChineseMedicine黃芪中黃芪多糖含量的測(cè)定△趙強(qiáng)強(qiáng)，韓麗，潘媛，王淼，楊明(1．成都中醫(yī)藥大學(xué)中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川成都6l1137；2．江西中醫(yī)學(xué)院現(xiàn)代中藥制劑教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江西南昌330004)[摘要]目的：建立黃芪中黃芪多糖的含量測(cè)定方法。方法：采用比色法測(cè)定黃芪多糖的含量。結(jié)果：測(cè)定波長(zhǎng)為489nm，葡萄糖在2．0—14．0la,g·mL線性關(guān)系良好，平均加樣回收率為99．84％，RSD=3．71％(n=6)。結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于黃芪中黃

2、芪多糖的含量測(cè)定。[關(guān)鍵詞】黃芪多糖APS；苯酚一硫酸法；含量測(cè)定黃芪為常用中藥，是豆科植物蒙古黃芪即得。Astragal~membranaceu~(Fisch．)Bge．vat．mongholicus2．2供試品溶液制備(Bge．)Hsiao或膜莢黃芪Astragalusmembranaceus精密稱取黃芪粗粉5．0g，加堿水50mL回流提(Fisch．)Bge．的干燥根，具有補(bǔ)氣升陽，固表止取2次，每次1h，放冷加溶劑補(bǔ)足重量，過濾，精汗，利水消腫，生津養(yǎng)血，行滯通痹，托毒排膿，密吸取濾液0．2mL，蒸餾水定容至100mL量瓶中，斂瘡生肌

3、的功能?。黃芪中含有皂苷、黃酮、多糖、搖勻即得。氨基酸及微量元素等多種成分，其中黃芪多糖2．3測(cè)定方法(Astragaluspolysaccharides，APS)是黃芪主要活性精密吸取對(duì)照品、供試品溶液各2mL于具塞試成分之一?，F(xiàn)代研究表明，APS具有促進(jìn)免疫調(diào)管中，分別加入5％苯酚溶液1．0mL，搖勻，迅速節(jié)]、抗腫瘤]、抗病毒、抗輻射、抗衰老等多種加入5．0mL濃硫酸，振搖2min，置沸水浴中加熱生物活性。本實(shí)驗(yàn)采用比色法對(duì)黃芪中多糖進(jìn)行含15min，然后置冷水浴中冷卻30min，隨行以蒸餾量測(cè)定。水為空白對(duì)照，在489llm處測(cè)定吸光

4、度。2．4線性范圍考察刮1材料與方法精密吸取葡萄糖對(duì)照品溶液0．2，0．4，0．6，1．1儀器0．8，1．0，1．2，1．4mL置于25mL容量瓶中，加蒸UV一1700紫外分光光度計(jì)(SHIMADZU餾水至刻度，搖勻。精密吸取上述各溶液2mL于具CORPORATION)，F(xiàn)A1104電子分析天平塞試管中，按照2．3測(cè)定方法分別加入5％苯酚溶(HANGPING)。液1．0mL，在489am處測(cè)定吸光度。以吸光度對(duì)濃1．2試藥度進(jìn)行線性回歸，得回歸方程A=69．679C十河北黃芪(四川I利民中藥飲片有限責(zé)任公司)，0．0253，r=0．9962。

5、結(jié)果表明，葡萄糖在2．0～經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)鑒定教研室裴瑾副教授鑒定為膜14．0Ixg·mL線性關(guān)系良好。莢黃芪；D一無水葡萄糖對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品2．5精密度試驗(yàn)檢定所，批號(hào)：110833—200503，供含量測(cè)定用)；精密吸取葡萄糖對(duì)照品溶液6份，依法顯色后苯酚、濃硫酸等試劑均為分析純。測(cè)定吸光度，計(jì)算RSD=1．62％，說明儀器精密度2方法與結(jié)果良好。2．1對(duì)照品溶液制備2．6顯色后穩(wěn)定性試驗(yàn)精密稱取105℃干燥至恒重的D一無水葡萄糖取黃芪多糖樣品溶液2mL，依法顯色后放置，100mg，加水溶解并定溶于100mL量瓶中，搖勻分別在0，

6、15，30，45，60min測(cè)定吸光度，計(jì)算[基金項(xiàng)目]國(guó)家科技重大新藥創(chuàng)制專項(xiàng)(2009ZX09103—307)[通訊作者]韓麗，E—mail：hanliyx@163．eom；楊明，E—mail：yangmingl6@126．eom·29·2011年7月第13卷第7期中國(guó)現(xiàn)代中藥ModemChineseMedicineJu1．2011Vo1．13No．7RSD=2．26％，表明樣品溶液顯色后1h內(nèi)穩(wěn)定。具塞試管中，加5％苯酚試液1mL，混勻，迅速加入2．7重復(fù)性試驗(yàn)5mL濃硫酸，振搖2min，置沸水浴加熱15min，取對(duì)同一批黃芪多糖樣品進(jìn)

7、行6次獨(dú)立測(cè)定吸光出置冷水中冷卻，隨行以蒸餾水為空白，于UV一度，結(jié)果RSD=3．58％。1700上從400～600nm進(jìn)行掃描，發(fā)現(xiàn)對(duì)照品和樣品2．8加樣回收率試驗(yàn)溶液在489nm均有最大吸收，故波長(zhǎng)確定為489nm。取6份已知含量的黃芪粗粉2．5g，精密稱定，3．3溶劑用量考察精密加入適量葡萄糖對(duì)照品，按正文擬定的方法制精密稱取5．0g黃芪粗粉3份，分別加人堿水備供試品溶液，精密吸取供試品溶液2mL于具塞試40，5O，60mL回流提取1h，放冷加溶劑補(bǔ)足重管中，按2．3測(cè)定方法分別加入5％苯酚溶液量，過濾，精密吸取濾液0．2mL，蒸餾水定

8、容至1．0mL，在489nm處測(cè)定吸光度，計(jì)算結(jié)果見100mL量瓶中，精密吸取上述溶液各2mL于具塞表1。試管中。按2．3測(cè)定方法分別加入5％苯酚溶液1．0mL，在