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《免疫磁珠法分離并鑒定前列腺癌類干細(xì)胞》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、免疫磁珠法分離并鑒定前列腺癌類干細(xì)胞[基金項(xiàng)目]教育部新教師基金項(xiàng)目（No.200804871051），湖北省衛(wèi)生廳青年人才基金（QJX2010－5）[第一作者]秦亮，電話：13476248595，E-mail:ql_198572@163.com（稿件相關(guān)事宜煩請(qǐng)與第一作者聯(lián)系）[通信作者]廖暉，E-mail:liaohui@tjh.tjmu.edu.cn秦亮，陳安民，郭風(fēng)勁，卞峰，杜宇，姚斌，廖暉（430030湖北武漢，華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院骨科）[摘要]目的利用免疫磁珠法分選并鑒定人前列腺癌類干細(xì)胞。方法利用免疫磁
2、珠法從人前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3中分選出CD133+/CD44+細(xì)胞，通過(guò)免疫組化、流式細(xì)胞術(shù)、CCK8法、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)以及體外裸鼠移植瘤實(shí)驗(yàn)鑒定其表面標(biāo)志物表達(dá)情況及其腫瘤干細(xì)胞特性。結(jié)果經(jīng)免疫磁珠分選所得CD133+/CD44+細(xì)胞數(shù)比例為0.50%；免疫組化結(jié)果顯示其CD44/CD133/integinα2β1均呈高表達(dá)；流式細(xì)胞分析顯示其CD44/CD133雙陽(yáng)性率達(dá)52.28%，其同時(shí)表達(dá)integinα2β1陽(yáng)性的細(xì)胞比例為59.16%；其細(xì)胞增殖率和克隆形成率高于PC-3細(xì)胞；以低密度（1×103）皮下注射時(shí)，其裸
3、鼠體內(nèi)成瘤率明顯高于PC-3細(xì)胞。結(jié)論利用免疫磁珠分選法可以從人前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3中高效的分選出具有腫瘤干細(xì)胞生物學(xué)特性的前列腺癌類干細(xì)胞。[關(guān)鍵詞]腫瘤干細(xì)胞；前列腺癌；免疫磁珠分選Theisolationandidentificationoftheprostatecancerstemcellsbymagneticactivecellsorting.QinLiang,ChenAn-min,GuoFengjing,BianFeng,DuYu,YaoBin,LiaoHui.(DepartmentofOrthopedics,Ton
4、gjiHospital,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430030,China)[ABSTRACT]ObjectiveToisolate,cultureandidentifytheprostatecancerstemcells(CSCs)bymagneticactivecellsorting(MACS).MethodsCD133+/CD44+cellswereselectedfromPC-3humanprostaticcarci
5、nomacellslinesbyMACS,andtheywereidentifiedasprostatecancerstem-likecellsbyimmunohistochemistry,flow-cytometricanalysis,CCK8,colony-formingassayandtumorigenicityassayinvivo.ResultsCD133+/CD44+cellsselectedfromPC-3celllinesbyMACSshowedthattheproportionofCD133+/CD44+cell
6、swas52.28%,andtheproportionofinteginα2β1+cellswas59.16%byflow-cytometricanalysis;theselectedcells'proliferatingpotentialandclony-formingratewerehigherthanPC-3celllinesinvitro;andtheirtumorigenicityrateweresignificantlyhigherthanPC-3celllinesinvivowhenseededatalowdensi
7、ty(1×103).ConclusionMACSwasasimpleandeffectivemethodtogainprostaticcarcinomastemcellsfromPC-3humanprostaticcarcinomacelllines.[Keywords]Cancerstemcells;Prostatecancer;MagneticactivecellsortingCorrespondingauthor:LiaoHui,E-mail:liaohui@tjh.tjmu.edu.cn隨著前列腺癌發(fā)病率的逐年增高，且多以
8、骨轉(zhuǎn)移為首發(fā)癥狀，故有關(guān)前列腺癌骨轉(zhuǎn)移方面的研究成為近來(lái)國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。近年來(lái)有研究表明，惡性腫瘤可能起源于腫瘤干細(xì)胞（cancerstemcell,CSCs），具有自我更新、無(wú)限增殖、多向分化潛能等干細(xì)胞特性[1,2]。Ponti及Singh等
