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1、碩士學位論文南極磷蝦高值成分的提取與分離Extractionandseparationofhigh—valuedcomponentsintheEuphausiasuperba學號:21118102完成日期:窒Q!壘生互旦大連理工史學DalianUniversityofTechnology大連理工大學學位論文獨創(chuàng)性聲明作者鄭重聲明:所呈交的學位論文,是本人在導師的指導下進行研究工作所取得的成果。盡我所知,除文中已經注明引用內容和致謝的地方外,本論文不包含其他個人或集體已經發(fā)表的研究成果,也不包含其他
2、己申請學位或其他用途使用過的成果。與我一同工作的同志對本研究所做的貢獻均已在論文中做了明確的說明并表示了謝意。若有不實之處,本人愿意承擔相關法律責任。學位論文題目:鴦選疊蟶島焦!鹽盒笪攙盈量金島作者簽名:逢塞每日期:塑綞年—.壘月—止日大連理工大學碩士學位論文摘要南極磷蝦(Euphausmsupe砌a)是一種生活在南極海域的甲殼類浮游動物。南極磷蝦含有油脂、蛋白、蝦青素和甲殼素等高值成分,具有很高的開發(fā)利用價值。然而,南極磷蝦的高氟、砷及其它重金屬元素含量是限制南極磷蝦資源開發(fā)的關鍵因素。目前,南
3、極磷蝦油脂、蛋白和甲殼素等高值成分的分離提取多采用有機溶劑提取、機械脫殼或酶解以及強酸強堿法。這些方法都是針對南極磷蝦單一高值成分進行分離,不能實現(xiàn)同時分離多個成分,且操作繁瑣,目標產物損失率高。同時,這些方法得到的產品中氟、砷及其它有害元素含量普遍較高。本文利用一種新型的多相鹽析萃取體系,可同時分離提取南極磷蝦油脂、蛋白和甲殼素等高值成分,再利用蛋白酶解法迸一步分離和利用南極磷蝦蛋白質和甲殼素,同時大幅降低了南極磷蝦油脂和蛋白等終產物中有害元素的含量。首先利用正己烷/乙醇(10:1,w/w)混合
4、溶劑在室溫下直接提取冷凍南極磷蝦油脂。接著利用檸檬酸鈉/檸檬酸混合液.乙醇一正己烷多相鹽析萃取體系進一步提取分離提油后殘渣中的高值成分。通過實驗確定最佳的提取分離條件為:多相鹽析萃取體系組成為56.5%檸檬酸鈉/檸檬酸混合液(檸檬酸鈉/檸檬酸/水的質量比為9:l:20.5)(w/w).18.5%乙醇(w/『w)-25%正己烷(w/w),南極磷蝦殘渣的加入量為7.5%(w/w),混合時間為120rain。該最優(yōu)條件下,磷蝦殘渣中粗油脂的回收率為54.7土O.5%,固相蛋白的回收率為58.6士1.7%
5、,上相和中相的蝦青素回收率分別為24.1士0.6%和16.6土0.6%。經過兩次提取后,南極磷蝦的油脂提取率達到95%。同時,經過多相鹽析萃取后,上相的氟、砷及其它重金屬含量大幅降低(51.3%)。將近70%的氟元素從磷蝦殘渣中脫離,進入下相;不同比例的砷及其它重金屬元素進入中相和下相中,固相的重金屬殘留量為24.1.55.1%。其次,對混合溶劑提取與多相鹽析萃取的南極磷蝦油脂進行分析和比較。分別測定了這兩種油脂的磷脂含量、酸值、游離脂肪酸含量、氟、砷以及其它重金屬元素的含量,同時運用薄層層析和氣
6、相色譜分析兩種油脂的成分與脂肪酸組成。結果表明,這兩種油脂存在一定的差異。實驗還發(fā)現(xiàn),南極磷蝦油脂具有較強的抑制腫瘤細胞系生長的作用,混合溶劑提取的南極磷蝦油脂對HL60、U937的IC50值分別為0.137m咖L和0.199m∥mL。利用硅膠柱分離南極磷蝦油脂,結果發(fā)現(xiàn)一種極性介于游離脂肪酸和磷脂之間的II號組分是賦予南極磷蝦油脂抗腫瘤活性的關鍵組分。最后采用蛋白酶解法對多相鹽析后分離的固相進行酶解。經過單因素和正交實驗,最終篩選出胰蛋白酶為最佳的蛋白酶,最佳工藝條件為:酶添加量2%,pH值8,
7、保溫南極磷蝦高值成分的提取與分離溫度和時間分別為35℃和10h。在此最佳工藝條件下,固相殘渣酶解的水解度和固體殘渣減少量分別為44.9%和76.8%。關鍵詞:南極磷蝦;多相鹽析萃??;油脂;蛋白酶解大連理工大學碩士學位論文Extractionandseparationofhigh—valuedcomponentsintheEuphausiasuperbaAbstractEuphausiasuperbaisaspeciesofcrustaceanfoundintheAntarcticwaters,‘a
8、ndhasbeenreportedasoneofthemostabundantanimalspeciesintheword.Itcontainsmanyhigh-valuedcomponents,such嬲lipids,proteins,astaxanthinandchitin.However,thedevelopmentoftheEuphausiasuperbaaShumans’foodislimitedbecauseofthehi幽concentrationsoffluorin