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《中國林蛙皮膚抗菌肽的分離純化及生物活性研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號：Q514+.3單位代碼：10193密級：公開學(xué)號：2012194碩士學(xué)位論文中國林蛙皮膚抗菌肽的分離純化及生物活性研究Studyonpurificationandbioactivityofskin-antimicrobialpeptidesinRanachensinensis作者姓名：王雅麗學(xué)位類別：學(xué)術(shù)型碩士專業(yè)名稱：生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向：免疫生物化學(xué)指導(dǎo)教師：魏峰教授所在學(xué)院：生命科學(xué)學(xué)院2015年05月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。盡我所知
2、，除文中特別加以標(biāo)注和致謝所列內(nèi)容外，論文中不包含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。本學(xué)位論文所有內(nèi)容若有不實(shí)之處，本人愿意承擔(dān)一切相關(guān)法律責(zé)任和后果。學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：年月日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明1、本人完全了解吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：研究生在校攻讀學(xué)位期間所完成的論文及相關(guān)成果的知識產(chǎn)權(quán)屬吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)所有，并同意將本論文的版
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4、s）也稱為肽抗生素，是一類小分子多肽，廣泛分布于生物體內(nèi)。兩棲類動(dòng)物皮膚濕潤、裸露，可分泌大量具有抑菌活性的物質(zhì)，其中以抗菌肽為主。本研究旨在從中國林蛙皮膚分泌的活性物質(zhì)中提取并進(jìn)一步分離純化出新型的抗菌肽，并對其生物學(xué)活性進(jìn)行研究，為兩棲類動(dòng)物抗菌肽的研究奠定基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)蛙間斷性電刺激，超純水收集產(chǎn)生的分泌物，反相高效液相色譜對分泌物分離純化，將金黃色葡萄球菌（ATCC25923）作為活性試驗(yàn)指示菌進(jìn)行抑菌效果檢測，獲得1種抑菌效果較強(qiáng)的抗菌肽，經(jīng)MALDI-TOFMS質(zhì)譜鑒定，該抗菌肽純度達(dá)95%以上，序列鑒定表明
5、該抗菌肽的氨基酸序列為FLPFFAACAITKKC（8和14位之間形成二硫鍵），將其命名為AMP-1。利用多肽固相合成中國林蛙抗菌肽AMP-1、分離純化，經(jīng)抑菌活性檢測及質(zhì)譜鑒定，獲得目的抗菌肽AMP-1。MIC結(jié)果表明：AMP-1對金黃色葡萄球菌（ATCC25923）和大腸桿菌（ATCC25922）有抑制作用，對多重耐藥菌株也有一定的抑制效果；溶血試驗(yàn)結(jié)果表明：AMP-1最高濃度時(shí)溶血率僅為1.108%；抗腫瘤活性試驗(yàn)結(jié)果顯示：AMP-1對人乳腺癌細(xì)胞MCF-7的生長有很強(qiáng)的抑制作用，最高濃度時(shí)抑制率可達(dá)75.8%
6、，且最低濃度時(shí)仍有抑制作用；抗弓形蟲活性試驗(yàn)結(jié)果顯示：AMP-1對弓形蟲的抑制作用隨濃度的增大而增強(qiáng)，隨著時(shí)間的延長也會(huì)增強(qiáng)。作用72h，50μg/mL的AMP-1對弓形蟲的抑制率高達(dá)72.5%，而最低濃度時(shí)對弓形蟲仍具有抑制作用。關(guān)鍵詞：抗菌肽，中國林蛙，分離純化，抑菌活性IAbstractAntimicrobialpeptidewhichwaswidelydistributedinvivo,alsoknownaspeptideantibiotic,wasaclassofsmallpeptide.Amphibian
7、skinwhichcouldsecretelargeamountsofsubstanceswithantibacterialactivitywhichthemaincomponentwasantimicrobialpeptidewasmoistandbare.ThisstudywasdesignedtoextractedandisolatedandpurifiedthenewantimicrobialpeptidesfromtheactivesubstancesofRanachensinensisskinsecret
8、ions.Wewouldmakeastudyofitsbiologicalactivity,sothatwecanlaythefoundationforthestudyofamphibianantimicrobialpeptides.Experimentalfrogshadbeeninducedbyintermittentelectricals
