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《中國林蛙皮膚抗菌肽的分離純化及生物活性研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號：Q514+.3單位代碼：10193密級：公開學號：2012194碩士學位論文中國林蛙皮膚抗菌肽的分離純化及生物活性研究Studyonpurificationandbioactivityofskin-antimicrobialpeptidesinRanachensinensis作者姓名：王雅麗學位類別：學術(shù)型碩士專業(yè)名稱：生物化學與分子生物學研究方向：免疫生物化學指導教師：魏峰教授所在學院：生命科學學院2015年05月獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學位論文是本人在導師指導下，獨立進行研究所取得的成果。盡我所知
2、，除文中特別加以標注和致謝所列內(nèi)容外，論文中不包含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得吉林農(nóng)業(yè)大學或其它教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。本學位論文所有內(nèi)容若有不實之處，本人愿意承擔一切相關(guān)法律責任和后果。學位論文作者簽名：簽字日期：年月日關(guān)于學位論文使用授權(quán)的聲明1、本人完全了解吉林農(nóng)業(yè)大學有關(guān)保留和使用學位論文的規(guī)定，即：研究生在校攻讀學位期間所完成的論文及相關(guān)成果的知識產(chǎn)權(quán)屬吉林農(nóng)業(yè)大學所有，并同意將本論文的版
3、權(quán)授權(quán)給吉林農(nóng)業(yè)大學，學校有權(quán)保留送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。2、本人（同意/不同意，務必打印后填寫）吉林農(nóng)業(yè)大學將本論文版權(quán)授權(quán)給不同媒體進行電子出版、多媒體出版、網(wǎng)絡出版以及其他形式出版（涉密學位論文解密后應遵守此協(xié)議）。3、本人聲明畢業(yè)后若發(fā)表在攻讀研究生學位期間完成的論文及相關(guān)的學術(shù)成果，必須以吉林農(nóng)業(yè)大學作為第一署名單位。學位論文作者簽名：簽字日期：年月日指導教師簽名：簽字日期：年月日摘要抗菌肽（Antimicrobialpeptide
4、s）也稱為肽抗生素，是一類小分子多肽，廣泛分布于生物體內(nèi)。兩棲類動物皮膚濕潤、裸露，可分泌大量具有抑菌活性的物質(zhì)，其中以抗菌肽為主。本研究旨在從中國林蛙皮膚分泌的活性物質(zhì)中提取并進一步分離純化出新型的抗菌肽，并對其生物學活性進行研究，為兩棲類動物抗菌肽的研究奠定基礎(chǔ)。實驗蛙間斷性電刺激，超純水收集產(chǎn)生的分泌物，反相高效液相色譜對分泌物分離純化，將金黃色葡萄球菌（ATCC25923）作為活性試驗指示菌進行抑菌效果檢測，獲得1種抑菌效果較強的抗菌肽，經(jīng)MALDI-TOFMS質(zhì)譜鑒定，該抗菌肽純度達95%以上，序列鑒定表明
5、該抗菌肽的氨基酸序列為FLPFFAACAITKKC（8和14位之間形成二硫鍵），將其命名為AMP-1。利用多肽固相合成中國林蛙抗菌肽AMP-1、分離純化，經(jīng)抑菌活性檢測及質(zhì)譜鑒定，獲得目的抗菌肽AMP-1。MIC結(jié)果表明：AMP-1對金黃色葡萄球菌（ATCC25923）和大腸桿菌（ATCC25922）有抑制作用，對多重耐藥菌株也有一定的抑制效果；溶血試驗結(jié)果表明：AMP-1最高濃度時溶血率僅為1.108%；抗腫瘤活性試驗結(jié)果顯示：AMP-1對人乳腺癌細胞MCF-7的生長有很強的抑制作用，最高濃度時抑制率可達75.8%
6、，且最低濃度時仍有抑制作用；抗弓形蟲活性試驗結(jié)果顯示：AMP-1對弓形蟲的抑制作用隨濃度的增大而增強，隨著時間的延長也會增強。作用72h，50μg/mL的AMP-1對弓形蟲的抑制率高達72.5%，而最低濃度時對弓形蟲仍具有抑制作用。關(guān)鍵詞：抗菌肽，中國林蛙，分離純化，抑菌活性IAbstractAntimicrobialpeptidewhichwaswidelydistributedinvivo,alsoknownaspeptideantibiotic,wasaclassofsmallpeptide.Amphibian
7、skinwhichcouldsecretelargeamountsofsubstanceswithantibacterialactivitywhichthemaincomponentwasantimicrobialpeptidewasmoistandbare.ThisstudywasdesignedtoextractedandisolatedandpurifiedthenewantimicrobialpeptidesfromtheactivesubstancesofRanachensinensisskinsecret
8、ions.Wewouldmakeastudyofitsbiologicalactivity,sothatwecanlaythefoundationforthestudyofamphibianantimicrobialpeptides.Experimentalfrogshadbeeninducedbyintermittentelectricals
