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《腫瘤新生血管特異靶分子的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、分類號(hào)------------------------密級(jí)------------------UDC---------------------------編號(hào)-------------------中國(guó)科學(xué)院碩士學(xué)位研究生學(xué)位論文腫瘤新生血管特異靶分子的研究朱曉東指導(dǎo)教師閻錫蘊(yùn)研究員中國(guó)科學(xué)院微生物所北京市中關(guān)村北一條11號(hào)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別------碩士-----學(xué)科名稱專業(yè)-----微生物學(xué)-----論文提交日期---二零零零年六月----論文答辯日期--二零零零年七月論文授予單位名稱--------中國(guó)科學(xué)院微生物所-答辯委員會(huì)主席------------評(píng)閱人-----
2、---------二零零零年七月朱曉東碩士學(xué)位論文目錄中文摘要……………………………………………………1英文摘要……………………………………………………3縮寫表……………………………………………………5文獻(xiàn)綜述……………………………………………………7腫瘤新生血管相關(guān)內(nèi)皮細(xì)胞受體研究的進(jìn)展…………………7參考文獻(xiàn)…………………………………………………18實(shí)驗(yàn)研究工作…………………………………………………281引言……………………………………………………282實(shí)驗(yàn)材料與主要儀器……………………………………293實(shí)驗(yàn)方法………………………………………………304結(jié)果與討論……
3、………………………………………364.1AA98抗原的性質(zhì)鑒定………………………………364.2AA98抗原的組織分布………………………………374.3AA98抗原在細(xì)胞上的分布………………………404.4AA98抗原可能是一個(gè)腫瘤血管生成特異表達(dá)的新分子415參考文獻(xiàn)………………………………………………43附圖…………………………………………………………45致謝…………………………………………………………561朱曉東碩士學(xué)位論文中文摘要腫瘤的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移依賴于血管生成。血管生成是指從已存的血管通過出芽或分裂形成新生毛細(xì)血管。新生毛細(xì)血管不同于正常組織血管，其更新周期為幾天
4、，而正常組織血管則通常是幾百天。新生血管內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)了一些處于靜止期血管內(nèi)皮上所沒有或低表達(dá)的分子，這些分子可以作為抗腫瘤血管治療的靶位點(diǎn)。封閉其功能，可抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)、遷移或侵潤(rùn)，從而高效地破壞新生血管的形成。我們篩選獲得了一株針對(duì)腫瘤新生血管特異的鼠單克隆抗體（MAb），命名為AA98。體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)均表現(xiàn)良好的抗血管生成和抗腫瘤的活性。本研究分析了AA98抗體所對(duì)應(yīng)的抗原靶分子的組織分布、細(xì)胞定位及理化性質(zhì)鑒定。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明AA98靶分子不同于國(guó)內(nèi)外已報(bào)道的腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物，很可能是一種新型的腫瘤新生血管標(biāo)志物。本實(shí)驗(yàn)主要包括：1．AA98
5、抗原的性質(zhì)鑒定將培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）制備蛋白粗提液，采用Westernblot的方法鑒定了靶分子的分子量，約97KD。并用生物素標(biāo)記了HUVEC表面的膜蛋白及免疫沉淀的方法，獲得靶分子。認(rèn)為鑒定的AA98抗原可能是一個(gè)由一條多肽鏈組成的單體蛋白。蛋白內(nèi)部存在的二硫鍵，對(duì)抗原的免疫結(jié)合活性十分重要。同時(shí)也說明AA98抗原是一個(gè)膜蛋白。用糖Kit分析，說明靶分子是一個(gè)糖蛋白。非還原等電聚焦板狀電泳測(cè)定其等電點(diǎn)為5.0左右。另外，通過石蠟切片的免疫組化，提示靶分子可能是一個(gè)熱敏感蛋白。2．AA98抗原的組織分布采用免疫組化的方法，檢測(cè)了人多種腫瘤組織和正常組織的
6、靶抗原表達(dá)。發(fā)現(xiàn)腫瘤的新生血管內(nèi)皮有很強(qiáng)、很特異的信號(hào)。而絕大多數(shù)正常組織及其毛細(xì)血管均沒有檢測(cè)到靶分子的存在。AA98抗原在胎兒、新生兒臍1朱曉東碩士學(xué)位論文靜脈內(nèi)皮表面、胎盤微血管及胎盤組織中有表達(dá)，特別是內(nèi)皮細(xì)胞強(qiáng)表達(dá)。AA98抗原可能是伴隨著新生血管（病理狀況如腫瘤的發(fā)生和生理狀況下）產(chǎn)生的特異分子。3．AA98抗原在細(xì)胞上的分布使用酶聯(lián)免疫吸附、Westernblot等方法鑒定AA98抗原在體外培養(yǎng)的幾種細(xì)胞系上的分布，說明AA98抗原在HUVEC細(xì)胞系中表達(dá)，而在其它幾種腫瘤細(xì)胞系上低表達(dá)或很難檢測(cè)到表達(dá)。4.AA98抗原可能是一個(gè)腫瘤血管生成特異表達(dá)的新分子
7、通過對(duì)靶分子理化性質(zhì)分析以及與已知報(bào)道的腫瘤血管生成標(biāo)記物的比較。說明其的特異性和新穎性。AA98抗原可能是一個(gè)伴隨著腫瘤新生血管高表達(dá)的分子。2朱曉東碩士學(xué)位論文3AbstractTumorgrowthandmetastasisareangiogenesisdependent.Angiogenesisreferstotheformationofnewcapillariesbyendothoelialcellsproutingorsplittingfrompre-existingvessels.Thenewcapillarie
