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1、世界華人消化雜志?2004年?10月15日;12(10):2486-2487新生鼠腸損傷時肝臟黃嘌呤氧化酶的變化蘆惠,?王麗杰,?中國醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院兒科??遼寧省沈陽市??110004項目負責人:?蘆惠,110004,?沈陽市和平區(qū)三好街36號,?中國醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院兒科.??luhui66999@sina.com電話:024-23930619????傳真:024-83955509收稿日期:2004-07-20????接受日期:2004-09-04摘要目的:?探討新生鼠腸損傷時肝臟黃嘌呤氧化酶(XO)的變化.方法
2、:?新生大鼠隨機分為對照組8只，實驗組每一時相點各8只.?將Ecoli?O55:B5脂多糖5mg/kg?注入新生鼠胃內(nèi)，分別于灌胃后3，6，12，24，72h處死動物.?取部分肝組織固定，包埋，HE染色，光鏡下觀察其組織學(xué)改變.?其余肝組織用于測定XO活性.結(jié)果:?實驗組6，12hXO活性明顯高于對照組(分別為4719±793nkat/gvs3961±387nkat/g，4929±477nkat/gvs3961±387nkat/g，P<0.05);3，24，72hXO活性與對照組無顯著差異(P<0.05).?內(nèi)毒素治療后隨
3、著時間的進行逐漸出現(xiàn)中央靜脈擴張，肝竇充血、炎性細胞浸潤，肝細胞水腫，胞質(zhì)疏松，空泡變性.6，12h可見大量肝細胞內(nèi)出血，肝細胞壞死.24，72h肝細胞水腫漸消失，出血壞死不明顯.結(jié)論:?新生鼠腸損傷時可致肝臟受累，且XO活性愈高，肝損傷愈重.蘆惠,?王麗杰.?新生鼠腸損傷時肝臟黃嘌呤氧化酶的變化.?世界華人消化雜志??2004;12(10):2486-24870???引言壞死性小腸結(jié)腸炎(necrotizingenterocolitis，NEC)是新生兒期最常見的胃腸道疾病，可導(dǎo)致多器官功能衰竭[1].?肝臟是人體重要的
4、免疫器官，在腸屏障功能受損時，作為第一道防線，一定程度上能抑制腸源性感染擴散，但其本身炎性細胞也可被激活，在倍增全身炎癥反應(yīng)的同時自身亦受到損傷[2].我們通過內(nèi)毒素(lipopolysaccharide，LPS)建立新生鼠腸損傷模型，探討肝臟黃嘌呤氧化酶(xanthineoxidase，XO)的變化及意義.1???材料和方法1.1?材料??健康1日齡Wistar新生大鼠，平均體質(zhì)量6.3±0.9g，由中國醫(yī)科大學(xué)第二臨床學(xué)院動物部提供.?隨機分為對照組8只，實驗組每一時相點(3，6，12，24，72h)各8只.?將1.9
5、F硅膠管(B-D?Inc，Sandy，UT，USA)經(jīng)口插入胃內(nèi)，Ecoli?O55:B5脂多糖(LPS;SigmaChemicalCO．，St．Louis，Mo)5mg/kg用無菌生理鹽水稀釋至0.2mL注入胃內(nèi);?對照組則注入無菌生理鹽水0.2mL[3].?灌胃后各組均放回母鼠旁，繼續(xù)哺乳，直至實驗結(jié)束.動物處死后，分離肝臟.取肝組織于40g/L多聚甲醛中固定，常規(guī)脫水，包埋切片，行HE染色，光鏡下觀察其組織學(xué)變化.?其余肝組織于－80?°C超低溫冰箱中保存，以備檢測.1.2?方法??肝組織XO活性測定，按測定試劑盒要
6、求，應(yīng)用紫外/可見分光光度計(法國500-P型)，測定肝組織勻漿XO活性.?同時按考馬斯亮蘭蛋白測定試劑盒說明測定每一樣本的蛋白濃度.?試劑盒均購自南京建成生物工程研究所.?????統(tǒng)計學(xué)處理??經(jīng)SPSS11.5ForWindows數(shù)據(jù)分析軟件處理.?所有數(shù)據(jù)以mean±SD表示，組間比較采用配對t檢驗.?統(tǒng)計結(jié)果顯著性以P<0.05表示.2???結(jié)果2.1?肝組織XO活性變化??實驗組6，12h肝組織XO活性(4719±793nkat/g，4929±477nkat/g)均明顯高于對照組(3961±387nkat/g，P
7、<0.05)，高峰在12h;24h(4481±473nkat/g)XO活性下降，3(4268±455nkat/g)，24，72h(3994±605nkat/g)肝組織XO活性與對照組無顯著差異(P>0.05).2.2?肝組織形態(tài)學(xué)改變??對照組新生鼠肝小葉分界不清，肝板排列較成年大鼠差，胞質(zhì)嗜堿性，門管區(qū)不清楚，但中央靜脈清晰可見.?內(nèi)毒素治療后隨著時間的進行，逐漸出現(xiàn)中央靜脈擴張，肝竇充血、炎性細胞浸潤，肝細胞水腫，胞質(zhì)疏松，空泡變性.6，12h時可見大量肝細胞內(nèi)出血，肝細胞壞死.24，72h時肝細胞水腫漸消失，出血壞死
8、不明顯.3???討論NEC多見于新生兒.?早產(chǎn)、缺氧/缺血、腸道喂養(yǎng)和細菌增生是導(dǎo)致此病的主要危險因素[1,3-5].?臨床統(tǒng)計，80％以上的NEC患兒是早產(chǎn)兒或低出生體質(zhì)量兒，其發(fā)病率與胎齡呈負相關(guān)[6-8]，原因是早產(chǎn)兒腸道免疫功能不成熟.?胃腸道免疫功能分為非特異性(先天性)和特異性兩部分，前者包
