膠體金法和tppa診斷梅毒螺旋體抗體的臨床效果比較研究

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1、膠體金法和TPPA診斷梅毒螺旋體抗體的臨床效果比較研究【】目的:比較膠體金法和TPPA對(duì)梅毒螺旋體抗體的診斷價(jià)值,為患者選擇合適的堅(jiān)持方法。方法:100梅毒患者例作為研究對(duì)象,按照1:40,1:80,1:160;1:320的滴度,每份樣本均分別稀釋為上述4個(gè)滴度,共得400份待檢樣本。隨后平均分為T(mén)PPA組和膠體金組,TPPA組采用TPPA法檢測(cè),膠體金組采用膠體金法檢測(cè)。結(jié)果:兩組各滴度下檢測(cè)值均無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。TPPA組檢測(cè)值比較穩(wěn)定,均在90%以上;膠體金組在1:80和1:160準(zhǔn)確率最高,滴度過(guò)低或過(guò)高時(shí)假陰

2、性會(huì)相應(yīng)增高。結(jié)論:兩種方法各有其適用范圍,為了提高診斷效果,可以先用膠體金法做半定性試驗(yàn),對(duì)于陽(yáng)性患者,再通過(guò)TPPA法進(jìn)一步確認(rèn)?!  娟P(guān)鍵詞】膠體金法;TPPA法;梅毒螺旋體抗體    近年來(lái),雖然隨著衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)工作的逐步落實(shí),性病監(jiān)測(cè)和控制工作得到了很大發(fā)展,但隨著人們性觀念的改變,以及流動(dòng)人口的增多,梅毒發(fā)病率依然高居不下。該病臨床表現(xiàn)較為復(fù)雜,易被誤診或漏診,為銀屑病、斑禿等皮膚病,而且病情具有一定的反復(fù)性,給監(jiān)測(cè)和治療工作帶來(lái)一定困難[1-2]。為了提高診斷效果,為患者及時(shí)治療提供客觀參考,我們對(duì)臨床上

3、應(yīng)用較廣的TPPA(梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn))和膠體金梅毒血清學(xué)檢查方法做一個(gè)初步的比較分析,以便為患者篩選高效,準(zhǔn)確的診斷方法,現(xiàn)報(bào)告如下?! ?資料與方法  1.1一般資料  選擇從2008年3月到2010年本院及門(mén)診梅毒患者100例作為研究對(duì)象,男63例,女37例,年齡18~68歲,平均32.7歲。患者均肘靜脈采血加入3.2%檸檬酸鈉抗凝劑,用羥乙基淀粉兩次離心分離部分紅細(xì)胞和多余的血漿,按照1:40,1:80,1:160;1:320的滴度,每份樣本均分別稀釋為上述4個(gè)滴度,共得400份待檢樣本。隨后平均分為T(mén)PP

4、A和膠體金組。每組均為200份樣本,均含上述4個(gè)滴度的樣本各50份?! ?.2方法  TPPA組:采用日本富士公司生產(chǎn)的TPPA試劑盒,微量加樣器取50uL待測(cè)血清和TPPA混合,用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒與血清中的梅毒螺旋體抗體結(jié)合,產(chǎn)生肉眼可見(jiàn)的凝集反應(yīng),明膠顆粒為玫瑰紅色,便于肉眼觀察。膠體金組:采用艾康生物技術(shù)有限公司的試劑盒,將試紙條置于干凈平坦的臺(tái)面上,微量加樣器將150uL待測(cè)血清加入XM金標(biāo)測(cè)試卡樣品孔內(nèi)即可?! ?.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理  相關(guān)數(shù)據(jù)采用SPSS11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)數(shù)資料X2檢驗(yàn),計(jì)量資

5、料t檢驗(yàn),以p<0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)差異具有顯著性?! ?結(jié)果  檢測(cè)結(jié)果如表1所示。兩組各滴度下檢測(cè)值均無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。TPPA組檢測(cè)值比較穩(wěn)定,均在90%以上;膠體金組在1:80和1:160準(zhǔn)確率最高,沒(méi)有出現(xiàn)假陰性情況。而在滴度過(guò)低或過(guò)高時(shí)假陰性會(huì)相應(yīng)增高?! ?討論  梅毒是由梅毒螺旋體(Treponemapallidum,TP)感染所致的性傳播疾病,可通過(guò)血液傳播和性接觸傳播,導(dǎo)致患者的血液、乳汁、精液和唾液中均有TP存在。該病可造成神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)等全身各組織器官的損傷,而且還可通過(guò)妊娠傳給下一代,危害十

6、分嚴(yán)重。TP進(jìn)入機(jī)體后產(chǎn)生兩種抗體:一種是特異性抗體(抗密螺旋體抗體),一種是非特異性抗體(抗心磷脂體),前者的檢測(cè)方法主要有ELISA和TPPA法等,后者的檢測(cè)方法主要有膠體金法、RPR和TRUST法等[3-5]?! P感染人體后,抗體可在體內(nèi)持續(xù)存在,終身保留,故TPPA對(duì)各期梅毒的檢測(cè)結(jié)果都有較好的穩(wěn)定性,敏感性和特異性高,是目前公認(rèn)的較為權(quán)威的診斷方法,因此在臨床上得到廣泛應(yīng)用。但該方法檢測(cè)時(shí)需將樣本作系列稀釋?zhuān)僮鲝?fù)雜,中間過(guò)程樣本容易被污染,成本較高。而且評(píng)肉眼判斷結(jié)果,檢測(cè)水平也操的技術(shù)水平有較大關(guān)系,

7、而且不利于防疫部門(mén)大批量樣本篩查,因此主要用于臨床診斷?! ∧z體金是由氯金酸(HAuCl4)在靜電作用成為一種穩(wěn)定的帶負(fù)電的疏水膠溶液,靜電作用可吸附蛋白質(zhì),形成特異的可觀察到的反應(yīng),且不影響蛋白質(zhì)的生物特性。該方法操作簡(jiǎn)單,成本低廉,可作大規(guī)模的篩查工作。從臨床效果來(lái)看,滴度過(guò)低和過(guò)高時(shí)均出現(xiàn)較高的假陰性。我們分析,由于是非特異性檢測(cè),滴度過(guò)低時(shí),可能其他雜質(zhì)蛋白也吸附到金原子上,而滴度過(guò)高時(shí),由于樣本被大量稀釋?zhuān)鹪邮亲罘€(wěn)定的惰性原子,可能靜電作用減弱,導(dǎo)致吸附作用減弱。從而出現(xiàn)一定的假陰性,因此,從我們的體會(huì)

8、來(lái)看,選擇合適的滴度十分重要?! ∧壳芭R床上還有一些其他的血清檢測(cè)方法[6-8],如RPR檢測(cè)血清中的非特異性反應(yīng)素,但該反應(yīng)素在疾病非活動(dòng)期和治療后容易消失,而且某些疾病如水痘,類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡以及妊娠等都可能產(chǎn)生非特異性抗體,而且其對(duì)二,三期梅毒檢出率較低,因此一般作為判定是否已經(jīng)痊愈或是否復(fù)發(fā)。ELISA操作簡(jiǎn)

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