腦康靈膠囊抗大鼠腦缺血的研究論文

腦康靈膠囊抗大鼠腦缺血的研究論文

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1、腦康靈膠囊抗大鼠腦缺血的研究論文胡雪勇眭玉霞吳芹余麗梅黃燮南孫安盛【摘要】目的觀察腦康靈膠囊對(duì)腦缺血/再灌注損傷的保護(hù)作用,并對(duì)其機(jī)制作初步探討。方法采用大鼠大腦中動(dòng)脈缺血2h/再灌注22h模型,神經(jīng)病學(xué)評(píng)分,腦梗塞范圍及腦組織水含量變化,觀察腦康靈膠囊抗腦缺血/再灌注損傷的效應(yīng);通過測(cè)定大鼠腦組織中一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS),超氧化物歧化酶(superoxidedisumtase,SOD)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的變化以探討藥物作用的機(jī)制。結(jié)果腦康靈膠囊可降低大鼠腦缺

2、血/再灌注后神經(jīng)病學(xué)評(píng)分及梗塞范圍,降低腦組織MDA,NOS含量及升高SOD活性。結(jié)論腦康靈膠囊對(duì)腦缺血/再灌注損傷有保護(hù)作用,其作用機(jī)制與抑制NOS活性、抗脂質(zhì)過氧化、提高SOD活性有關(guān)?!娟P(guān)鍵詞】腦康靈膠囊腦缺血/再灌腦缺血保護(hù)Abstract:ObjectiveToobservetheprotectiveeffectsofNaokanglingCapsuleoncerebralischemia/reperfusioninjuryinrats.MethodsTheratmodelofmiddlecerebralarteryischem

3、ia2h/reperfusion22he,cerebraleasured.ResultsTheaverageneurologicalscote,cerebralinfractedvolume,cerebralayprotectcerebralischemia/reperfusiondamage,.freelechanismmightberelatedia/reperfusion;Cerebralischemiaprotection目前的研究表明腦缺血損害的機(jī)制包括細(xì)胞內(nèi)鈣超載.freelbens(Thunb.)Pers的干燥塊莖,具有活血

4、祛淤作用;后者為常用中藥鉤藤UncariarhynchophyllaJackson的莖葉,有活血通絡(luò)等功效,主要成分有鉤藤堿和異鉤藤堿。實(shí)驗(yàn)采用灌胃給藥,觀察腦康靈膠囊對(duì)動(dòng)物腦缺血損傷的影響,為臨床腦缺血尋找新型有效的治療藥物。1材料與儀器1.1藥品與材料腦康靈膠囊由本校藥物化學(xué)教研室制成,0.3g/粒,主要成分為夏天無及鉤藤總堿等。尼莫地平(nimodipine,Nim)系山東新華制藥股份公司產(chǎn)品(批號(hào)050625),MDA,SOD,NOS,蛋白含量測(cè)定試劑盒購于南京建成生物工程公司。1.2儀器BI-2000圖象分析系統(tǒng),成都泰盟公司;

5、JY92-11超聲細(xì)胞粉碎機(jī),寧波新芝科器研究所。1.3動(dòng)物SD雄性大鼠,體重230~270g,購于中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(清潔級(jí))。2方法2.1制模及給藥參照Nagasave法[1]制模。大鼠蘇醒后按Bederdson神經(jīng)病學(xué)評(píng)分達(dá)3分[2],腦內(nèi)蛛網(wǎng)膜下腔無出血作為模型成功的標(biāo)準(zhǔn),選入實(shí)驗(yàn)組。已制模大鼠126只,隨機(jī)分為6組:假手術(shù)組,生理鹽水組,尼莫地平2mg/kg組,腦康靈20,40,60mg/kg組,每組21只。制模型前灌胃給藥1ml/100g體重,2次/d,共5次,最后1次給藥后30min制模,制模后12h再給藥1次,各組動(dòng)物

6、于缺血2h/再灌注22h后再進(jìn)行神經(jīng)病學(xué)評(píng)分。2.2腦梗塞范圍測(cè)定實(shí)驗(yàn)各組隨機(jī)取大鼠7只斷頭取腦,冠狀切分腦組織成5片,TTC染色測(cè)量梗塞面積[3]。取出后置10%福爾馬林液中避光保存,用BI-2000圖象分析系統(tǒng)測(cè)出截面上梗塞區(qū)域占全部面積的百分比。2.3腦含水量測(cè)定每組再隨機(jī)取7只大鼠斷頭取腦,正中矢狀切分左右大腦后分別稱濕重,100℃烤箱烘烤至恒重(即干重),計(jì)算腦含水量(%)=(濕重-干重)/濕重×100%。2.4腦組織NOS,SOD,MDA含量測(cè)定每組剩余7只大鼠斷頭取腦,稱重,按1∶10加NS,超聲細(xì)胞粉碎制成10%組織勻漿,

7、冷凍離心20min(0℃,15000r/min),取上清液置-84℃低溫冰箱中保存。采用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定SOD,硫代巴比妥酸法測(cè)定MDA,比色法測(cè)定NOS。2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)的收集和處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果均以±s表示,兩小樣本均數(shù)經(jīng)方差齊性檢驗(yàn),采用t檢驗(yàn)。3結(jié)果3.1腦康靈膠囊對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷神經(jīng)病學(xué)評(píng)分、腦梗塞范圍及含水量的影響大鼠腦缺血2h/再灌注22h后,假手術(shù)組大鼠神經(jīng)病學(xué)評(píng)分均為0分,無腦梗塞;腦康靈膠囊20,40,60mg/kg與生理鹽水組比較,均可明顯降低腦缺血/再灌后神經(jīng)病學(xué)評(píng)分,腦缺血范圍和腦水含量且呈劑量依賴性。結(jié)果

8、見表1。表1腦康靈膠囊對(duì)大鼠神經(jīng)學(xué)評(píng)分及腦缺血/再灌腦梗塞區(qū)域和腦含水量的影響(略)3.2腦康靈膠囊對(duì)大鼠缺血再灌注腦組織中NOS,SOD,MDA的影響與假手術(shù)組比較,生理鹽水組NOS活性及M

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