康腦靈膠囊抗癡呆大鼠自由基損傷的作用機(jī)制研究

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1、康腦靈膠囊抗癡呆大鼠自由基損傷的作用機(jī)制研究作者:季旭明,王芳,張桂菊,陸國輝【摘要】目的探討康腦靈膠囊對癡呆大鼠神經(jīng)元自由基損傷的保護(hù)作用及對caspase-3、Bcl-2表達(dá)的影響。方法建立血管性癡呆大鼠模型,中藥干預(yù)后,用分光光度計檢測超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量,熒光分光光度計檢測caspase-3表達(dá),流式細(xì)胞技術(shù)檢測Bcl-2的表達(dá)。結(jié)果康腦靈膠囊明顯減少癡呆大鼠MDA含量,提高SOD、NO含量,降低caspase-3表達(dá),增強(qiáng)Bcl-2表達(dá)。結(jié)論康腦靈膠囊對缺血再灌注癡呆大鼠自由基損傷有明顯保護(hù)作用,其作用機(jī)制與增強(qiáng)B

2、cl-2表達(dá)、降低caspase-3表達(dá)有關(guān)。【關(guān)鍵詞】康腦靈膠囊;血管性癡呆;自由基損傷;Bcl-2;caspase-3;大鼠  Abstract:ObjectiveTostudytheprotectionofKangnaolingcapsuletofreeradicalinjuryandinfluenceontheexpressionofcaspase-3andBcl-2inneuronofVDrat.MethodsVDratmodelwasduplicated.UsingspectrophotometrytodetectcontentsofSOD,MDAandNO

3、,spectro-fluorimetertodetecttheexpressionofcaspase-3,spectrophotometricmethodtodetect8theexpressionofBcl-2aftertraditionalChinesemedicineinterference.ResultsKangnaolingcapsulecanmarkedlyreducethecontentsofMDA,raisecontentsofSODandNO,degradetheexpressionofcaspase-3,enhancetheexpressionofB

4、cl-2.ConclusionsKangnaolingcapsulecanmarkedlyprotectVDratfromfreeradicalinjury,whichprobablycorrelatedwithincreasingexpressionofBcl-2,decreasingexpressionofcaspase-3.  Keywords:Kangnaolingcapsule;vasculardementia;freeradicalinjury;Bcl-2;caspase-3;rat康腦靈膠囊由川芎、當(dāng)歸、銀杏葉,淫羊藿等組成,功能活血化瘀、補腎益智,用于血

5、管性癡呆的治療[1]。研究表明,其能明顯提高癡呆模型動物學(xué)習(xí)記憶能力,改善與學(xué)習(xí)記憶相關(guān)蛋白乙酰膽堿酯酶、神經(jīng)生長因子的表達(dá)[2]。本研究對其抗缺血再灌注所致癡呆大鼠自由基損傷的保護(hù)作用及對凋亡調(diào)控蛋白Bcl-2、caspase-3表達(dá)的影響進(jìn)行探討,現(xiàn)報道如下。  1實驗材料  1.1動物8  清潔級純系Wister雄性大鼠50只,體重(250±50)g,山東醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心提供,合格證號:D20041021。動物分籠飼養(yǎng),自由飲水進(jìn)食,標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng),飼料由山東省實驗動物中心提供?! ?.2藥物  康腦靈膠囊,山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院制劑室提供,批號980421;西

6、藥對照藥品為腦復(fù)康,天津金世制藥有限公司生產(chǎn),批號20030302?! ?.3試劑與儀器  Fluorescein(FITC)Bcl-2,ebioscience,批號11-6992;caspase-3/CCP32FluorometricAssayKit,BioVision,批號K105-25;超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)測定試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供,批號:SOD、MDA為20041028,NO為20041030。FACSCaliber流式細(xì)胞儀,美國BD公司;BECKMAN-700全自動生化分析儀,美國貝克曼;RF-540型熒

7、光分光光度計,日本島津?! ?實驗方法8  2.1造模、分組與給藥  參照改良的四血管夾閉法制備大鼠腦缺血再灌注模型[3]。10%水合氯醛3mL/kg(體重)腹腔麻醉,取仰臥位,頸部正中切口,分離雙側(cè)頸總動脈,穿線備用,用微型動脈夾關(guān)閉雙側(cè)頸總動脈10min,再通10min,反復(fù)3次,撤線,縫合。隨機(jī)分為正常對照組(A組)、模型組(B組)、腦復(fù)康對照組(C組)及康腦靈高(D組)、低(E組)劑量組。每組10只動物。A、B組予生理鹽水灌胃,每日1次;C組給藥量為0.28g/kg;D組給藥量為2.10g/kg;E組給藥量為1.05g/kg。灌胃

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