富硒食用菌中硒含量的測定及賦存形態(tài)研究

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1、江南大學(xué)碩士學(xué)位論文富硒食用菌中硒含量的測定及賦存形態(tài)研究姓名:王蓮芳中請學(xué)位級別:碩士專業(yè):食品科學(xué)指導(dǎo)教師:張連富20070301摘要摘要硒是人體必須的微量元素之一,對人體健康具有重大的意義。然而硒的分布極其不均勻,全世界有2/3的地區(qū)缺硒,僅靠天然食物屮的硒不足以滿足人體的正常需要,無機(jī)硒在毒性和牛物利用度方面乂不及有機(jī)硒,因此通過牛物轉(zhuǎn)化和合成有機(jī)硒化合物來開發(fā)有機(jī)硒源,生產(chǎn)高效安全的補(bǔ)硒食品更能引起研究者的興趣。本論文以液體發(fā)酵培養(yǎng)的富硒食用菌為實(shí)驗(yàn)原料,對硒的測定方法以及兩種主要硒化合物的提取工藝進(jìn)行了研究,并對硒化合物的生物活性進(jìn)行了初步的探討,具體實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如

2、下:首先,以3,37—二氨基聯(lián)苯胺為顯色劑,研究了分光光度法測定食用菌中的微量元素硒。實(shí)驗(yàn)確定掩蔽劑EDTA用量為25mg/mL,反應(yīng)吋問為50rain,絡(luò)合酸度和萃取酸度分別控制pH在2—3和6.5—7.5范圍內(nèi);運(yùn)用超聲波破碎技術(shù),通過透析袋處理,得到樣品的有機(jī)硒含量達(dá)到79.12%。其次,對食用菌中的硒多糖和硒蛋白的提取工藝進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。論文首先從單因素實(shí)驗(yàn)出發(fā),對各實(shí)驗(yàn)參數(shù)進(jìn)行了選擇,接著在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,根據(jù)Box—Benhnken的中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,采用響應(yīng)面分析法,依據(jù)冋歸分析確定各工藝的最佳條件。對于蛋白質(zhì)的提取,最佳工藝條件為:NaOH濃度0?

3、07mo1/L,提取溫度60?6。C,料液比(w/v)為1:25,提取時(shí)間為8h,提取次數(shù)為2次,在此條件下蛋白提取的得率為30.17%。對于多糖的提取,實(shí)驗(yàn)確定的最佳工藝條件:超聲處理的時(shí)間為30min,提取吋間為3h,醇析吋乙醇的加入量為2倍濃縮液體積,提取溫度為73?7。C,PH值為4?2,料液比(w/v)為1:37,在此條件下多糖提取的得率為7?83%。另外還運(yùn)用正交實(shí)驗(yàn)法對多糖的脫蛋口和脫色兩個(gè)初步純化工藝進(jìn)行了研究,確定活性炭脫色的最佳條件為:溫度為60oC,pH為3.0,時(shí)間為4Omin,粉末活性炭用量為3%;酶法脫蛋白工藝條件為:酶用量為0?1%,溫度為55

4、oC,吋間為0.5h,pH為6?5。最后,分別采用還原力、徑自由基、超氧陰離子自由基、rDPPH.)體系和脂質(zhì)過氧化體系等幾種不同的體外抗氧化模型,對提取所得的硒多糖和硒蛋白的抗氧化能力進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,各種硒提取物均具有一定的抗氧化能力,硒的存在能對提取物的抗氧化起到促進(jìn)的作用。關(guān)鍵詞:食用菌硒多糖蛋口抗氧化特性江南大學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractSe1enium(Se)1sanassentia1nutr■1enttohumanhea1th.Butthedistribuf?10nofse1eniumisextremelyuneVen1yontheearthanditi

5、sestimatedthatnear1y2/3ofthewor1disselenium—def?1(iencyarea,so〕normallythenaturalfo0dmateria1SCC0u1dnotsupplysuff?1cientse1eniumforourbodytokeepheja1th?Cons■1deringthefactthatthesupP1ementationofSeininorganicformwi11notbeasefficientasthatoforgainicinsafetyanclbiologicalut?11ization,itisess

6、entia1todeveloporganicsebybiotransfor——mationandn0wsuchstudy?1sbec0mingmoreandimoreinterestedbymanyresearchers?Inthisthesis.theauth0rstudiedthedetermina1:ionmeth0d0fse:1enium.theextractiontechn010gyoftwoma:inSe一containingc0mP0unds(se1enium-—containingproteinse1enium-—containingp01ysacchari

7、de)andpre1iminarystud?1edtheirb?1010gica1activities?n1edetails0fthestudyarbeasfoilow:First0fa11using3,37—?d■1amin0benzidine(DAB)asse1enium0rgan?1creagent,theauthorstudiedthedeterminationmethodofse1eniumbyspectroPh0tometry.Theresu11tsshowedthattheaid.d.itionofs

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