bax-抑制肽對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦損傷神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用

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1、Bax一抑制肽對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦損傷神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用摘要目的通過(guò)檢測(cè)應(yīng)用gax一抑制肽對(duì)新生鼠缺血缺氧性腦損傷后神經(jīng)細(xì)胞凋亡的療效,探討B(tài)ax一抑制肽對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的神經(jīng)保護(hù)作用。方法選取200只7日齡新生wjster大鼠為研究對(duì)象,隨機(jī)分為以下三組:假手術(shù)組;對(duì)照組;實(shí)驗(yàn)組(bax一抑制肽)。對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組分別通過(guò)結(jié)扎左側(cè)頸總動(dòng)脈以及置于8%的氮氧混合氣中2小時(shí)建立新生鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)模型,假手術(shù)組僅游離左側(cè)頸總動(dòng)脈,不結(jié)扎,不低氧處理。實(shí)驗(yàn)組于建立模型后0h、6h、12h、24h、48h、3d不同時(shí)問(wèn)點(diǎn)側(cè)腦室注射bax-抑制肽5ug(5u1),其余兩組予相同劑

2、量生理鹽水于相同時(shí)間點(diǎn)側(cè)腦室注射。對(duì)照組和假手術(shù)組于HIBD模型建立后第12h、24h、2d、3d、7d及實(shí)驗(yàn)組HIBD后第7d每組取2只甲醛灌注后斷頭取腦海馬組織病理檢測(cè),另取6只新鮮腦組織進(jìn)行蛋白免疫印跡法(Westonblot)檢測(cè)活性Caspase一3蛋白、逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT—PCR)測(cè)定Caspase-3mRNA的表達(dá)。結(jié)果l、HE染色組織顯示:在患側(cè)海馬區(qū),實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組oh、6h、12h、24h、48h各亞組均有病理性損傷,實(shí)驗(yàn)組病理?yè)p傷程度低于對(duì)照組,在72h亞組實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組病理?yè)p傷無(wú)明顯差異。2、Westernblot檢測(cè)Caspase一3蛋白及RT—PCR檢測(cè)Caspas

3、e一3mRNA:對(duì)照組與假手術(shù)組比較,對(duì)照組在HIBD后oh、6h、12h、24h海馬區(qū)Caspase一3及mRNA依次增多,24h達(dá)高峰,48h開(kāi)始下降,7d時(shí)達(dá)到基礎(chǔ)水平。3、HIBD后7dWesternblot檢測(cè)Caspase-3:實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組在0h、6h、12h、24h、48h各亞組比較,海馬區(qū)Caspase一3明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在72h亞組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)組各亞組間比較,HIBD后越早注射bax一抑制肽,Caspase一3越少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4、HIBD后7dRT—PeR檢測(cè)Caspase一3mRNA:實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組在0h、6h、12h、24h、48h各亞

4、組比較,患側(cè)海馬區(qū)活性Caspase一3明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在72h亞組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)組各亞組間比較,HIBD后越早注射bax一抑制肽,Caspase一3mRNA量越少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1、新生大鼠缺氧缺血腦組織Caspase一3及mRNA表達(dá)增多,神經(jīng)細(xì)胞凋亡增加,24小時(shí)達(dá)高峰,48小時(shí)后逐漸下降。2、HIBD后2天內(nèi)側(cè)腦室注射bax一抑制肽可減少Caspase一3及mRNA的表達(dá),減輕神經(jīng)細(xì)胞凋亡。3、在HIBD后越早給予bax-抑制劑治療,神經(jīng)保護(hù)作用越明顯,缺氧缺血后2天內(nèi)為有效治療時(shí)間窗。碩士研究生張輝(兒科學(xué)專(zhuān)業(yè))指導(dǎo)教師姜紅教授關(guān)鍵詞:bax-抑制肽

5、;缺氧缺血;腦;新生兒;Caspase一3NeuroprotectiVeEffectofBax—InhibitingPeptideonNewbronRatswithNeonatalHypoxicIschemicDamageAbstractobjective:ToinvestigatetheeffectsofBax—inhibitorypeptideonimprovingneuronalapoptosisinnewbornratswithhypoxia—ischemicbraindamage(HIBD).Method:Twohundred7-day—oldnewbornwisterratswer

6、erandomlydividedintothreegroups:Shamoperationgroup,controlgroup,experimentgroup.HIEmodelwasestablishedbyligationoftheleftcarotidarteryalongwith2h8%oxygenexposureinneonatalratsofthecontrolandexperimentgroups.Theshamoperationgroupwasnotsubjectedtohypoxia—ischemia.111eexperimentgroupreceivedanintracere

7、broventricularinjectionofbax—inhibitorypeptidewithdoseof5ug(5u1)respectivelyinoh,6h,12h,24h,48hand3dafterHIBD,whiletheothertwogroupsreceivednormalsalineatthesametime.Eachgroupofmiceweresacrificed,onth

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