小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定

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1、第!"卷第!期武漢大學(xué)學(xué)報!醫(yī)學(xué)版":.,;!"<.;!!!##$年%月&’()*+,-./01+,.23/4+151)6’07)89&+0#!##$小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定尹美珍!李世普!袁!琳!戴紅蓮武漢理工大學(xué)生物材料與工程研究中心!武漢!A%##"#摘要!目的$建立一種簡便的巨噬細(xì)胞分離與培養(yǎng)方法#為骨替代材料降解產(chǎn)物的研究提供巨噬細(xì)胞%方法$以無血清Y&[&培養(yǎng)液灌洗小鼠腹腔#=#M)1后吸出灌洗液于含=#^胎牛血清的Y&[&培養(yǎng)液中培養(yǎng)%采用Z[染色和倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)&酸性磷酸酶及非特異性酯酶染色測定細(xì)胞內(nèi)酶的表達(dá)&墨汁顆粒吞噬實驗檢測其吞噬功能%結(jié)果$獲

2、得高純度的巨噬細(xì)胞#具有巨噬細(xì)胞的形態(tài)特征#良好的吞噬功能#含水解酶類%結(jié)論$本法是一種簡易而實用的體外分離培養(yǎng)腹腔巨噬細(xì)胞的方法%關(guān)鍵詞!巨噬細(xì)胞&分離培養(yǎng)&鑒定&小鼠中圖分類號!b?=%;=_=!文獻(xiàn)標(biāo)識碼!E!文章編號!=$"=@??H!!!##$"#!@#!#%@#%4’5.0.)1*3#J8,)1H.)1*3.32:2’3)1&1(.)1*3*&7*8-’+’01)*3’.,7.(0*5/.A’-=:>7’1]/’3#9:4/158#=;">913#X":E*3A,1.3D-’A#3-1).2)%#9-).,)43G4/-4##9-4/H#,#)91*?#4%#9#56*

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6、#二氧化碳培養(yǎng)箱!美國R.0M+噬細(xì)胞分離培養(yǎng)方法加以改良#建立了一種簡便而G.;"#倒置顯微鏡及照相系統(tǒng)!W,9MN/7Vh@H#"%課題來源$湖北省重大科技攻關(guān)課題!編號$!##!EB#A$"作者簡介$尹美珍#女#=>$>@#工學(xué)博士生#主要從事生物材料的研究通訊作者$李世普#男#=>A$@#教授#主要從事生物材料的研究+!#A+武漢大學(xué)學(xué)報!醫(yī)學(xué)版"第!"卷K;L!小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的分離#培養(yǎng)!脫頸處死空泡&核大為卵圓形#腎形#馬蹄形或不規(guī)則形$偏$@?周齡昆明種小鼠!中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院提供"$居于細(xì)胞的一端$著色較深!插頁A$圖!"&"H^酒精浸泡HM)1后$倒立小鼠并腹腔

7、注入無血L;M!培養(yǎng)細(xì)胞的鑒定!將培養(yǎng)"天的細(xì)胞做%4清Y&[&培養(yǎng)液HM,$仰臥平放并輕揉小鼠腹部的吞噬試驗!插頁A$圖%"$發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)細(xì)胞對墨汁顆!@%M)1$靜置H@"M)1后$無菌條件下打開小鼠腹粒有很強的吞噬作用$吞噬率為>H;$?^&酸性磷酸腔$觀察腸管變扁且腹腔液為淡黃色時$用注射器抽酶及非特異性酯酶的陽性率也很高$分別為?>;$$^取腹腔液約A@A;HM,$離心洗滌后顯微鏡下計數(shù)$常和?H;=>^!插頁A$圖A$圖H"&規(guī)Y&[&培養(yǎng)液!含=#^胎牛血清