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《一株產(chǎn)纖維素酶細(xì)菌的分離鑒定及產(chǎn)酶條件初探.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、150廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)2014年第19期一株產(chǎn)纖維素酶細(xì)菌的分離鑒定及產(chǎn)酶條件初探許云，汪倩，易太鮮，趙同建(海南大學(xué)農(nóng)學(xué)院，海南海口570228)摘要：對(duì)從海南大學(xué)薯蕷種質(zhì)資源圃的不同大薯根部土壤中分離的產(chǎn)纖維素酶細(xì)菌X一6進(jìn)行鑒定及產(chǎn)酶條件研究。采用細(xì)胞學(xué)染色、生理生化指標(biāo)、16SrRNA基因序列同源性分析測(cè)定等方法對(duì)菌株進(jìn)行鑒定，并采用正交試驗(yàn)研究培養(yǎng)時(shí)間、溫度、pH值和碳氮比等因素對(duì)菌株產(chǎn)纖維素酶活力的影響，初步確定其產(chǎn)纖維素酶的最優(yōu)條件組合。菌株X一6鑒定為蠟狀芽孢桿菌、革蘭氏陽(yáng)性菌，菌株芽孢著生在細(xì)菌中部位置，淀粉酶、明膠水解酶陽(yáng)性。GenBank中X一6菌株的16Sr
2、RNA基因序列與HQ844479BacilluscereusstrainJSYM28相似性最高(99％)。菌株的最優(yōu)培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)基碳氮比為2：4，pH7．0，42℃培養(yǎng)72h，在此條件下CMC酶活力和濾紙酶活力分別為137．10、171．07U，mL。關(guān)鍵詞：纖維素酶：鑒定：產(chǎn)酶條件中圖分類號(hào)：Q939．97文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1004—874X(2014)19—0150—04Isolationandidentification0facellulase—pr0ducingbacteria1●●●J1‘·■●··-_-·‘a(chǎn)ndDreIlmlnarVStucI_v0nit
3、slermentationconditionsXUYun，WANGQian，YITai—xian，ZHAOTong-jian(CollegeofAgronomy,HainanUniversity,H~kou570228，China)Abstract：Cytologicalstaining，physiologicalandbiochemicalcharacteristics，and16SrRNAgenesequencesanalysiswereutilizedtoidentifycellulase—producingbacteriaX一6．whichwasisolatedfrom
4、rootsoilsofthedifferentwateryamsinYamGermplasmResourcesofHainanUniversity．Thenorthogonalexperimentdesignswereappliedtostudytheeffectsofincubationtime，temperature，pHandratioofcarbon-nitrogenonthecellulase-producingenzymeactivityofX-6．TheresultsshowedthatthestrainX一6wasidentifiedasBacilluscere
5、us，withGram—positive，amylase—positive，gelatinase—positiveandsporeinthemiddleofthebacteriumcel1．Its16SrRNAgenewashi【ghlysimilartoBacilluscereusJSYM28，andthesimilaritywas99％．TheoptimalfermentationconditionswereasfollowingvalueofpHwas7．0，theratioofcarbon—nitrogenwas2：4，thetemperaturewas42~Cfor7
6、2h．Undertheoptimalfermentationconditions，CMCandFPAenzymeactivitywererespectively137．10U／mLand171．07U／mL．Keywords：cellulase；identification；fermentationcondition纖維素是自然界中最豐富的天然可再生資源，而到數(shù)十株產(chǎn)生堿性纖維素酶的芽孢桿菌和嗜堿性鏈微生物降解是纖維素資源化利用最環(huán)保的處理方式，霉菌，如日本花王公司的Bacillussp．KSM系列[2-61、纖維素資源和纖維素酶已經(jīng)成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)HSH一810[71、J
7、S1[81、N6—27菌株[91以及Streptomyeessp．領(lǐng)域．其中細(xì)菌產(chǎn)生的中性和堿性磷酸酶受到各國(guó)洗KSM一9t蚓、$36—2t“】和llAG8t挖1等，其中只有嗜堿芽孢劑、紡織、造紙、環(huán)保等行業(yè)的普遍重視。堿性纖維素桿菌KSM一635是唯一報(bào)道已工業(yè)化生產(chǎn)的菌株。目酶最早在1972年由日本理化研究所從嗜堿芽孢桿菌前，國(guó)內(nèi)中性和堿性纖維素酶產(chǎn)生菌的產(chǎn)酶能力活性的培養(yǎng)物中獲得【l】。隨后，國(guó)內(nèi)外學(xué)者又陸續(xù)分離篩選較低，通過優(yōu)化培養(yǎng)條件以及對(duì)野生菌株進(jìn)行誘變等處理方法，可使酶活提高2
