冰凍切片免疫熒光步驟.doc

冰凍切片免疫熒光步驟.doc

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1、冰凍切片免疫熒光1.將組織置于4%多聚甲醛6~8h,轉(zhuǎn)至20%蔗糖至組織沉底,包埋冰凍組織塊2.冰凍切片機(jī)切片8~10um,室溫放置30min以上防脫片,-20℃保存3.從冰箱拿出的冰凍切片于室溫放置30min以上,再進(jìn)行免疫熒光4.1XPBS洗3次,每次3~5min5.免疫組化筆畫圈,2%BSA室溫或37℃封閉1h6.一抗4℃孵育過(guò)夜7.1XPBS洗3次,每次3~5min8.二抗室溫或37℃,避光孵育1h9.1XPBS洗3次,每次3~5min10.DAPI染色,11.1XPBS洗3次,每次3~5min12.滴加防淬滅劑,封片.

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