通腑法開通玄府對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷腦含水量的影響

通腑法開通玄府對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷腦含水量的影響

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1、通腑法開通玄府對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷腦含水量的影響作者:胡建芳 余志輝 汪峰 黃培新 尤勁松【摘要】目的研究通腑醒神膠囊(簡(jiǎn)稱TFXSJN,下同)通腑法開通玄府對(duì)大鼠急性局灶性腦缺血再灌注損傷模型腦含水量的影響。方法采用線栓法制作大鼠大腦中動(dòng)脈阻塞模型,2h后拔線實(shí)現(xiàn)再灌注損傷,于拔線后1,3d及7d不同時(shí)間點(diǎn)觀察神經(jīng)功能評(píng)分、大鼠腦含水量及腦組織病理的改變。結(jié)果造模后模型組及治療組大鼠的腦含水量在1d時(shí)均明顯升高,與假手術(shù)組及正常組相比有顯著性差異(P<0.05),3d時(shí)腦含水量最高,7d時(shí)基

2、本恢復(fù)正常,與假手術(shù)組及正常組相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。而治療組在3d時(shí)的腦含水量明顯低于模型組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);而TFXSJN治療后能有效降低模型鼠1,3d及7d時(shí)的神經(jīng)功能缺損評(píng)分;明顯減輕腦組織病理?yè)p傷程度。結(jié)論TFXSJN通腑法開通玄府能減輕大鼠急性局灶性腦缺血再灌注損傷的腦含水量,減輕腦組織損傷程度,從而減輕神經(jīng)功能缺損癥狀。【關(guān)鍵詞】局灶性腦缺血;缺血再灌注損傷;通腑法/中醫(yī)藥療法;玄府  腦水腫是缺血性中風(fēng)早期常見的病理反應(yīng),其嚴(yán)重程度和持續(xù)時(shí)間與腦

3、缺血的預(yù)后有著密切的關(guān)系,嚴(yán)重者可導(dǎo)致顱內(nèi)高壓、腦疝的形成,甚至死亡。對(duì)于腦水腫的防治,目前常用的方法主要有脫水、激素、白蛋白等預(yù)防和治療,但會(huì)出現(xiàn)水電解質(zhì)平衡紊亂、低血容量、腎功能損害、反跳等一系列并發(fā)癥[1]。研究認(rèn)為以通腑法為主的治療方法可以減輕腦水腫,起到與脫水藥類似的效果,保護(hù)受損的腦細(xì)胞[2,3]。為了進(jìn)一步探討通腑法對(duì)缺血性腦水腫的治療作用,我們建立了大鼠急性局灶性腦缺血再灌注損傷模型,觀察TFXSJN通腑法對(duì)該模型大鼠腦水腫的影響,把通腑法與中醫(yī)的玄府理論相結(jié)合,用玄府理論來(lái)闡釋通腑法治療中

4、風(fēng)的實(shí)質(zhì)內(nèi)涵,有助于中風(fēng)病臨床療效的提高和中醫(yī)理論的創(chuàng)新及現(xiàn)代化?! ?材料與方法  1.1試劑及儀器  10%水合氯醛。白熾燈、眼科剪、眼科鑷子、手術(shù)剪、直徑0.22~0.28mm的漁線、0-4外科縫線、微動(dòng)脈夾、微量精密天平儀、烘干箱等?! ?.2藥物  通腑醒神膠囊為廣東省中醫(yī)院自制藥劑,由番瀉葉、虎杖、人工牛黃、天竺黃、栝蔞仁等藥物組成。  1.3動(dòng)物分組及給藥  選用健康雄性Sprague-Dal)或者蒸餾水2ml,上、下午各1次。各組動(dòng)物如有死亡應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充。  1.4大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模

5、型的建立  大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞(Middlecerebralarteryocclusion,MCAO)模型制作參照koizumi線栓法[4],從右側(cè)頸總動(dòng)脈(moncarotidartery,CCA)進(jìn)線,栓線采用尼龍漁線,長(zhǎng)約4cm,直徑約0.26mm,術(shù)后2h拔出線栓約1.5cm形成缺血再灌注損傷。大鼠術(shù)中及清醒前均給予白熾燈(100,其余操作均同手術(shù)組?! ?.5觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法  1.5.1腦含水量的測(cè)定  模型組、TFXSJN組及假手術(shù)組于術(shù)后第1天、第3天、第7天時(shí)間點(diǎn)各取6只大鼠,同時(shí)取正常

6、大鼠6只做對(duì)照,評(píng)分后斷頭取腦,去除腦表面的硬脊膜、小腦及腦干部分,立即用微量精密天平稱取腦濕重,然后放置烘箱里,80℃烘72h至恒重,計(jì)算腦含水量。腦含水量(%)=(濕重-干重)/濕重×100%?! ?.5.2動(dòng)物神經(jīng)功能評(píng)分  參照Z(yǔ)ealonga5分制評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)。0分:無(wú)神經(jīng)系統(tǒng)損傷癥狀;1分:不能完全伸展對(duì)側(cè)前爪;2分:向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈;3分:向?qū)?cè)傾倒;4分:不能自發(fā)行走;5分:意識(shí)喪失。累計(jì)一分以上即為成功模型。動(dòng)物清醒后觀察拔線時(shí)及再灌注后1,3,7d時(shí)的神經(jīng)功能缺失評(píng)分?! ?.5.3腦組織的病理改

7、變  各組大鼠于術(shù)后1,3d及7d觀察神經(jīng)功能評(píng)分后,分別取6只,并取6只正常大鼠作對(duì)照,斷頭處死,取腦,去除小腦、腦干,取視交叉為中心水平相當(dāng)于前聯(lián)合水平腦片,置入10%中性福爾馬林溶液固定。常規(guī)脫水、透明、浸蠟、包埋、切片5μm厚,HE染色,觀察組織學(xué)變化?! ?.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法  所有數(shù)據(jù)均錄入SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析。兩樣本均數(shù)間比較采用t檢驗(yàn)(方差齊)或t’檢驗(yàn)(方差不齊),檢驗(yàn)水平=0.05。  2結(jié)果  2.1各組大鼠腦含水量的比較  造模后模型組及TFXSJN組大鼠平均腦含水

8、量在1d時(shí)即明顯升高,與假手術(shù)組及正常組對(duì)比,具有明顯差異(P<0.05),3d時(shí)的腦含水量最高,7d時(shí)兩組大鼠的腦含水量基本恢復(fù)正常,與假手術(shù)組及正常組相比無(wú)明顯差異(P>0.05)。而TFXSJN組的腦含水量在3d時(shí)與模型組相比有明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),表明TFXSJN治療后可以抑制腦水腫高峰的形成,減少缺血性腦損傷的腦含水量。假手術(shù)組的腦含水量在任何時(shí)間點(diǎn)與正常組相比均

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