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1、肺炎衣原體肺炎的檢驗診斷李麗珠(黑龍江省大慶市第四醫(yī)院163712)【中圖分類號】R518【文獻標識碼】A【文章編號】1672-5085(2013)06-0164-01【關(guān)鍵詞】肺炎衣原體肺炎檢驗診斷肺炎衣原體肺炎是由肺炎衣原體引起的急性肺部炎癥,常累及上下呼吸道。常在聚居場所的人群中流行。但3歲以下的兒童少見。陵病原體亦可見于5%?10%的醫(yī)院獲得性肺炎,但對其流行病學了解甚少。1臨床表現(xiàn)肺炎衣原體引起的臨床表現(xiàn)與肺炎支原體相似,包括咽炎、支氣管炎和肺炎,主要發(fā)牛于較大兒童和青年人。通常癥狀較輕,表現(xiàn)為發(fā)熱、寒戰(zhàn)、肌痛、干咳,非胸膜炎性胸痛,頭痛、不適和乏力,少有咯血。
2、發(fā)牛咽喉炎者表現(xiàn)為咽喉痛、聲音嘶啞,有些患者可表現(xiàn)為雙階段病程:開始表現(xiàn)為咽炎,經(jīng)對癥處理好轉(zhuǎn),1?3周后又發(fā)牛肺炎或支氣管炎,咳嗽加重。持續(xù)性咳嗽是木病的主要特點。肺炎衣原體在激發(fā)哮喘中亦可能發(fā)揮作用。2檢驗診斷實驗室檢查對肺炎衣原體肺炎的診斷有重要的參考價值,主要包括呼吸道標木直接涂片找衣原體包涵體,肺炎衣原體培養(yǎng),肺炎衣原體抗原、抗體、核酸等的相關(guān)檢測。2.1一般檢驗2.1.1白細胞計數(shù)和分類多數(shù)肺炎衣原體肺炎白細胞正常,但也有少數(shù)超過10.0×109/L,分類常見淋巴細胞輕度增多。2.1.2肓接涂片檢查(1)檢測方法:直接涂片、革蘭染色。(2)標木:痰
3、液、肺泡灌洗液。(1)臨床診斷價值和評價:典型衣原體在宿主細胞質(zhì)內(nèi)可出現(xiàn)包涵體,用光學顯微鏡在痰液或肺泡灌洗液中觀察到衣原體包涵體有一定的診斷意義。此方法簡單易行且快速,但存在假陽性反應,因而在診斷疾病吋應慎重。檢查時應設陽性和陰性對照。2.2特殊檢驗2.2.1衣原體培養(yǎng)(1)檢測方法:組織細胞培養(yǎng)、雞胚卵黃囊培養(yǎng)。(2)標本:痰、肺泡灌洗液。(3)臨床診斷價值和評價:在痰液或肺泡灌洗液中培養(yǎng)出肺炎衣原體對診斷有較大意義,細胞培養(yǎng)的敏感性為80%?90%,特異性為100%,是診斷肺炎衣原體肺炎的確診方法,屬金標準方法,可用該方法來評價其他方法的準確性。但肺炎衣原體培養(yǎng)所需
4、時間較長,且不能在無生命的培養(yǎng)基中生長,對培養(yǎng)要求較高,在臨床上難以開展。2.2.2衣原體抗原的檢測(1)檢測方法:ELISA、膠體金免疫測定。(2)標本:痰液、肺泡灌洗液。(3)臨床診斷價值和評價:用膠體金、熒光素或酶標記的抗肺炎衣原體的單克隆抗體來檢查標本的肺炎衣原體抗原,簡便、快速,已有商品試劑盒供應。樣品中衣原體的含量、取樣的方法和患者的情況(如年齡、性病史、有無癥狀等)都對衣原體的檢出有影響。當標本量采集少吋會造成假陰性,而因與其他病原菌存在交叉反應,可造成假陽性。2.2.3肺炎衣原體TWAR株特異性核酸檢測⑴檢測方法:PCR、分子雜交。(2)標本:痰液、肺泡灌
5、洗液。(3)臨床診斷價值和評價:肺炎衣原體TWAR株特異性核酸檢測可以對肺炎衣原體肺炎進行早期診斷。采用Pstl限制制性內(nèi)切酶對TWAR株DNA進行酶切后,可以獲得474bp的特異核酸片段,采用PCR或分子雜交可準確地檢測出,從而對肺炎衣原體TWAR株做出準確的診斷,敏感性和特異性都非常高。2.2.4肺炎衣原體特異性抗體檢測(1)檢測方法:補體結(jié)合試驗、免疫熒光試驗、ELISA法等。(2)標本:血清。(3)臨床診斷價值和評價1)微量免疫熒光試驗(MIF)是檢測肺炎衣原體抗體的敏感性方法之一,該試驗以TWAR株的原體為抗原,檢測血清中的特異性抗體?;颊哐逯械腎gM抗體效價
6、≥l:128提示近期感染。急性感染吋雙份血清抗體效價有4倍以上升高,既往感染吋IgG抗體效價在1:8?1:256之間。用此法有利于區(qū)別近期感染和既往感染,也有利于區(qū)別原發(fā)感染和再感染。IgG抗體陽性但效價不升高為既往感染,因為IgM通常在感染后2?6個月逐漸消失,而IgG抗體則持續(xù)存在,此抗體可用來作為肺炎衣原體感染的普查。2)急性感染的抗體反應包括兩種方式:一為初次感染(原發(fā)感染)后的免疫反應,多見于青年人,補體結(jié)合試驗所測衣原體抗體早期迅速升高,MIF所測衣原體抗體出現(xiàn)較緩慢。二為再次感染(重復感染)后的免疫反應,多見于年齡較大的成年人,IgG抗體通常在1?2周
7、內(nèi)出現(xiàn),且效價升高很快,而補體結(jié)合抗體及IgM抗體不能岀現(xiàn)或效價很低。原發(fā)感染IgM出現(xiàn)早,效價高,IgG出現(xiàn)較晚,IgA反應較弱或不出現(xiàn)。因此,抗體的檢測結(jié)合臨床資料分析有助于區(qū)分感染的類型。2.4應用建議非特異的血常規(guī)檢測可有助于鑒別肺炎的類型,區(qū)別細菌性肺炎與非細菌性肺炎。對疑似病例可通過痰液或肺泡灌洗液的直接涂片尋找肺炎衣原體包涵體,若找到肺炎衣原體包涵體,可進行支原體培養(yǎng)進行確診。在不能進行支原體培養(yǎng)的情況下,對肺炎衣原體TWAR株可用分子生物學方法來檢測,也可通過免疫學方法來對肺炎衣原體的特異性抗原、抗體進行檢測,