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《嗜鹽菌纖維素酶的酶學(xué)性質(zhì)及產(chǎn)酶條件優(yōu)化研究.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)OptimizationofFermentationConditionforHalophilesCellulaseandEnzymaticCharacterizationThesissubmittedtoQingdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementFortheDegreeofMasterofScienceZhaoKun(CollegeofLifeScience)Supervisor：AssociateProf．LuWeidongQingdao．ChinaJune，2012萬方數(shù)據(jù)獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文
2、是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得青島農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名：恕嘶I時(shí)間：>句}海多R力＆關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解青島農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意青島農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部
3、分內(nèi)容。(保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議)研究生簽名：起葉時(shí)l'Mipf廣年6只茹B新硌多幼＼帆矽僻∥啪萬方數(shù)據(jù)1萬方數(shù)據(jù)青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要嗜鹽菌纖維素酶的酶學(xué)性質(zhì)及產(chǎn)酶條件優(yōu)化研究摘要纖維素是自然界中最廣泛存在的一類碳水化合物，同時(shí)也是地球上含量最豐富的可再生資源。纖維素以其易被微生物降解并進(jìn)入生物圈碳循環(huán)途徑，且不對(duì)生態(tài)環(huán)境構(gòu)成破壞，被廣泛應(yīng)用于紡織、造紙、食品、建筑、油田化學(xué)和生物化學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域。本文以采集于青島市膠州灣鹽場(chǎng)以及內(nèi)蒙古內(nèi)陸鹽湖的泥樣為樣品，以羧甲基纖維素鈉為唯一碳源的MHC培養(yǎng)基作為篩選平板，篩選得到產(chǎn)纖維素酶細(xì)菌菌株34株，放線菌菌株9株。對(duì)HC值和
4、酶活力較高的兩株茵LS．A18菌株和放線菌DN．A4菌株分別進(jìn)行生理生化實(shí)驗(yàn)及16SrRNA序列分析，并通過對(duì)菌株產(chǎn)酶條件及培養(yǎng)條件、纖維素酶酶學(xué)性質(zhì)的研究，以期達(dá)到高效利用纖維素的目的。高產(chǎn)纖維素酶嗜鹽細(xì)菌LS．A18菌株為Marinimicrobium屬，命名為MarinimicrobiumSD．LS．A18。經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，該菌株所產(chǎn)纖雛素酶的最適反應(yīng)溫度和pH值分別為55℃和pH7．O。LS．A18菌株產(chǎn)酶的最適碳源和氮源分別為低粘度CMC和尿素。經(jīng)過對(duì)LS．A18菌株發(fā)酵條件的優(yōu)化，纖維素酶活力達(dá)到2．5U／mL，是優(yōu)化前的3．1倍。通過非變性凝膠電泳研究發(fā)現(xiàn)LS．A18菌株株所
5、產(chǎn)纖維素酶有55KDa、32KDa和21KDa三務(wù)電泳條帶。該酶在60℃條件下，水浴保溫1h，剩余酶活力為84％，而在pH5．0．11．0的緩沖液及濃度為0％．25％的NaCl溶液中，室溫保存72h，剩余酶活力仍達(dá)到88％以上，說明，該酶耐鹽、耐熱和堿穩(wěn)定性酶。另外，金屬離子Na+、K+、ca+對(duì)于酶的活性有促進(jìn)作用，而金屬離子Z112+、Mn2+、以及抑制劑溶液EDTA對(duì)酶活性抑制作用，乙醇對(duì)于酶的活性沒有影響。去污劑溶液SDS、．TritonX．100、Tween．20H92+對(duì)酶活性有強(qiáng)烈的抑制作用而p．巰基高產(chǎn)纖維素酶菌株DN-A4為Nocardiopsis屬，定名為Nocard
6、iopsissp．DN-A4。經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，該菌株所產(chǎn)纖維素酶的最適反應(yīng)溫度及pH值分別為55"C和pH7．0～7．5。DN．A4菌株的最適產(chǎn)酶碳源及其濃度分別為低粘度CMC和5％，最適氮源及濃度為0．1％明膠，最佳接種量為6％，培養(yǎng)基中初始pH值、NaCl濃度及裝液量分別為pH7．0、1％NaCl以及裝液量80ml／250ml。通過DN．A4放線菌產(chǎn)纖維素酶的穩(wěn)定性測(cè)試發(fā)現(xiàn)，該酶的具有較強(qiáng)熱穩(wěn)定性、鹽度穩(wěn)定性及pH穩(wěn)定性。關(guān)鍵詞：纖維素酶；嗜鹽菌；細(xì)菌；放線茵1萬方數(shù)據(jù)青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩十學(xué)位論文AbstractOptimizationofFermentationConditionforM
7、arineMicrobialCellulaseandEnzymaticCharacterizationAbstractCelluloseisthemostwidespreadmaterialsinnatureasaclassofcarbohydrates．a(chǎn)ndalsoisthemostabundantrenewableresourcesonearth．Cellulosecanbedegradedeasilybymicroorgan
