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《白介素33在百草枯誘導(dǎo)小鼠急性肺損傷中的作用機(jī)制研究.pdf》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014Aug;49(8)。1027·◇基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究◇白介素33在百草枯誘導(dǎo)小鼠急性肺損傷中的作用機(jī)制研究劉晨風(fēng),吳小紅,曾揚(yáng),高同同,于虹,郭彥,孫世惠,周育森摘要目的探討白介素33(IL一33)在百草枯(PQ)染毒小functionsyndrome,MODS)而導(dǎo)致死亡?。由于ALI鼠急性肺損傷(ALI)模型中的表達(dá)及作用。方法25只的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜,目前尚不清楚。其中由化學(xué)SPF級雌性BALB/c小鼠平均分為正常對照組,PQ損傷6、強(qiáng)毒除草劑百草枯(paraquat,PQ)中毒所致的12、
2、24、48h組。腹腔注射PQ(30mg/kg)建立小鼠ALI模型ARDS,已導(dǎo)致數(shù)千人中毒死亡,病死率高達(dá)并于各時(shí)間點(diǎn)處死取材。評價(jià)肺組織病理變化和炎癥細(xì)胞70%。白介素33(interleukin一33,IL-33)是IL一1浸潤;觀察血清白介素1B(IL一1B)、IL-2、IL-6、腫瘤壞死因子家族的新成員,在慢性炎癥、心血管疾病和變態(tài)反應(yīng)(TNF一)和肺組織髓過氧化物酶(MPO)水平變化;RT。性等疾病中發(fā)揮重要作用J。研究顯示IL33PCR、免疫組化和Westernblot分別檢測組織中IL.33mRNA既能作為促炎因子活化炎癥,加重組織損傷,也可作和蛋白表達(dá)水平變化。
3、分析IL-33與病理損傷和炎癥指標(biāo)為染色質(zhì)相關(guān)核因子起轉(zhuǎn)錄抑制作用,輔助抑制前關(guān)聯(lián)性以明確IL-33在調(diào)解內(nèi)源性細(xì)胞因子及在Au中的炎癥基因表達(dá)J。但目前鮮有報(bào)道評價(jià)IL-33在急作用。結(jié)果與正常對照組相比,PQ損傷后小鼠肺組織彌漫性損傷伴有嚴(yán)重水腫及大量炎癥細(xì)胞浸潤,促炎細(xì)胞因子性炎癥中的作用。為此,該實(shí)驗(yàn)使用PQ建立小鼠IL-1B、IL-6、TNF—、MPO明顯升高,抑炎細(xì)胞因子IL-2明顯Au模型,系統(tǒng)研究了IL一33表達(dá)與Au小鼠的病理下調(diào)(P<0.05);PQ損傷后IL-33在mRNA和蛋白表達(dá)水平和炎癥細(xì)胞因子之間的動(dòng)態(tài)變化關(guān)系,闡述了IL.33均顯著下調(diào)(P<0.
4、05)。關(guān)聯(lián)性分析顯示IL-33與病理損傷在化學(xué)毒物造成的ALI中的重要調(diào)節(jié)作用。指標(biāo),IL一1B、IL-6、TNF一、MPO均呈明顯負(fù)相關(guān)(P<0.05),1材料與方法與IL-2呈正相關(guān)趨勢,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論IL-33在PQ誘導(dǎo)小鼠Au中表達(dá)水平下降,提示可能在調(diào)解內(nèi)源1.1材料與試劑PQ購自上海先正達(dá)有限公司;性炎癥因子平衡中發(fā)揮重要作用,可為臨床干預(yù)和治療ALIGoatanti—mouseIL-33抗體購自美國R&D公司;中的新靶點(diǎn)。性粒細(xì)胞抗體購自美國SantaCruz公司;Rabbitanti—關(guān)鍵詞白介素33;百草枯;急性肺損傷;炎癥GAPDH抗體、Rabb
5、itanti—goatIgG(HRP標(biāo)記)和中圖分類號(hào)S482.4;R363.1;R392.7AntirabbitIgG(HRP標(biāo)記)均購自美國CellSigna—文獻(xiàn)標(biāo)志碼A文章編號(hào)1000—1492(2014)08—1027—06ling公司;IL-1B、IL-2、IL-6和腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor一,TNF—)ELISA預(yù)包被試劑急性肺損傷(acutelunginjury,Au)發(fā)展到嚴(yán)重盒均購自北京達(dá)科為生物技術(shù)有限公司;髓過氧化階段稱為急性呼吸窘迫綜合征(acuterespiratorydis—物酶(myeloperoxidase,MPO)
6、ELISA試劑盒購自荷tresssyndrome,ARDS),最終因形成全身炎癥反應(yīng)綜蘭Hycuhbiotechnology公司;總RNA提取試劑盒購合征(systemicinflammatoryresponsesyndrome,自德國Qiagen公司;RNA反轉(zhuǎn)錄cDNA試劑盒購自SIRS)和多器官功能障礙綜合征(multipleorgandys.北京全式金生物技術(shù)公司;實(shí)時(shí)熒光定量PCR(SYBRGreen)試劑盒購自北京天根生物技術(shù)有限2014—02—25接收基金項(xiàng)目:國家自然科學(xué)基金(編號(hào):81371805);國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究公司;蛋白酶抑制劑混合物購自北京普利萊生物技
7、發(fā)展計(jì)劃(973)(編號(hào):2012CB518905)術(shù)有限公司;其余試劑均為國產(chǎn)分析純,由國藥(北作者單位:。安徽醫(yī)科大學(xué)北京微生物流行病研究所,合肥230032京)化工集團(tuán)提供。北京微生物流行病研究所病原微生物生物安全國家重點(diǎn)1.2動(dòng)物模型建立及分組25只SPF級雌性實(shí)驗(yàn)室,北京100071BALB/c小鼠,6~8周齡,體重(20±1)g,購自軍事作者簡介:劉晨風(fēng),男,碩士研究生;孫世惠,女,副教授,碩士生導(dǎo)師,責(zé)任作者,E—mail:sail—醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。小鼠隨機(jī)平均分為5s