黃芩苷對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦損傷神經(jīng)保護(hù)作用的研究

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1、南昌大學(xué)碩士學(xué)位論文黃芩苷對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦損傷神經(jīng)保護(hù)作用的研究姓名：徐昕申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：兒科學(xué)指導(dǎo)教師：顏小華201205摘要目的：1．研究黃芩苷(baicalin，BC)對(duì)缺氧缺血性腦損傷(hypoxic．ischemicbraindamage，HIBD)新生大鼠腦細(xì)胞Fas、FasL表達(dá)的影響。2．比較黃芩苷與神經(jīng)生長因子(nervegrowthfactor，NGF)對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的神經(jīng)保護(hù)作用。方法：1．實(shí)驗(yàn)分組：128只7日齡SD大鼠隨機(jī)分為四組(每組32只)：假手術(shù)對(duì)照組(Sham組)；缺氧缺血性

2、腦損傷對(duì)照組(HIBD組)；神經(jīng)生長因子對(duì)照組(NGF組)；黃芩苷治療組(BC組)。2．模型制作及藥物干預(yù)：參照Rice法制成HIBD模型，其中Sham組僅游離出左頸總動(dòng)脈，不結(jié)扎，不缺氧。NGF組于缺氧缺血(hypoxia．ischemia，HI)、復(fù)氧恢復(fù)處理后，立刻給予腹腔注射NGF注射液501xg／kg，每天1次，連用3天；BC組于HI、復(fù)氧恢復(fù)處理后，立刻給予腹腔注射BC注射液16mg／kg，每天1次，連用3天；Sham組和HIBD組每日腹腔注射生理鹽水10ml／kg，連用3天。3．觀測(cè)指標(biāo)：觀察新生大鼠行為改變、存活率和體

3、重增長；各組均于HI后24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)、7天四個(gè)時(shí)間點(diǎn)(每個(gè)時(shí)間點(diǎn)各8只)分批取腦組織，HE染色后光鏡下觀察受損腦組織病理形態(tài)改變；S-P免疫組織化學(xué)方法測(cè)定腦細(xì)胞Fas、FasL表達(dá)。結(jié)果：1．行為改變：實(shí)驗(yàn)大鼠在HI后約30分鐘開始出現(xiàn)倦怠，嗜睡，肌張力異常等不同程度的腦損傷癥狀，復(fù)氧后可見大鼠向結(jié)扎側(cè)旋轉(zhuǎn)。2．存活率：Sham組實(shí)驗(yàn)大鼠無死亡，存活率為100％(32／32)‘；HIBD組死亡5只，存活率為84．38％(27／32)；NGF組死亡2只，存活率為93．75％(30／32)，BC組死亡3只，存活率為90．6

4、3％(29／32)。各組間存活率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸>0．05)。3．7天體重增長：HIBD組大鼠體重增長最慢，明顯落后于其他三組(PO．05)，但都落后于Sham摘要組f尸<0．01)。4．腦組織病理形態(tài)學(xué)改變：Sham組大鼠腦細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常，排列整齊；HIBD組可見腦細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞水腫明顯，部分細(xì)胞出現(xiàn)壞死，呈空泡樣改變(HI后48小時(shí)最為顯著)；相同時(shí)間點(diǎn)：BC組和NGF組較HIBD組上述改變均明顯減輕，而且兩者改變相近。5．腦細(xì)胞Fas、FasL表達(dá)：S

5、ham組腦細(xì)胞可見少量Fas、FasL表達(dá)，各時(shí)間點(diǎn)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸>0．05)；其余各組HI后24小時(shí)出現(xiàn)Fas、FasL表達(dá)，以HI后48小時(shí)最明顯，之后逐漸減少，持續(xù)至7天仍顯著高于Sham組，各時(shí)間點(diǎn)之間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．01)；相同時(shí)間點(diǎn)：NGF組和BC組之間Fas、FasL表達(dá)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0．05)。6．Fas與FasL相關(guān)性分析：新生大鼠HIBD腦細(xì)胞Fas表達(dá)和FasL表達(dá)之間存在直線相關(guān)關(guān)系(F0．863，P=0．000<0．01)。結(jié)論：1．新生大鼠HIBD腦細(xì)胞Fas、FasL表

6、達(dá)明顯增加，以HI后48小時(shí)最為明顯，之后逐漸減少，持續(xù)至HI后7天仍可見陽性表達(dá)，并且正常新生大鼠腦細(xì)胞也可見少量Fas、FasL表達(dá)。2．黃芩苷可以通過減少新生大鼠HIBD腦細(xì)胞Fas、FasL表達(dá)，抑制細(xì)胞凋亡，從而發(fā)揮腦神經(jīng)保護(hù)作用。3．黃芩苷對(duì)新生大鼠HIBD的神經(jīng)保護(hù)作用與神經(jīng)生長因子相近，有可能替代神經(jīng)生長因子成為臨床上治療新生兒HIBD的一種新藥物。關(guān)鍵詞黃芩苷；缺氧缺血性腦損傷；新生大鼠；Fa卵a(bǔ)sL：細(xì)胞凋亡。。＼＼、．Abst：ract，ABSTRACTObjectives：1．Tostudytheeffecto

7、fbaicalinonFasandFasLexperssionsininjuredbraincellsofneonatalratsafterhypoxic-ischemicbraindamage(HIBD)．2．Tocompareneuroprotectiveeffectbetweenbaicalin(BC)andnervegrowthfactor(NGF)onneonatalratsafterhypoxic—ischemicbraindamage．Methods：1．Grouping：Atotalof1287-day-oldSpra

8、gue—Dawley(SD)ratswererandomlydividedinto4groups(n=32ineachgroup)：shamoperatedgroup(Shamgroup)；hypoxic．ischemi