正交試驗法優(yōu)選痛風安膠囊提取工藝

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1、正交試驗法優(yōu)選痛風安膠囊提取工藝作者:于秀華 王明星 付春 張永和【摘要】目的:研究痛風安膠囊提取的最佳工藝。方法:以總黃酮含量為指標,采用正交試驗設(shè)計法,考察因素為溶劑用量倍數(shù)、提取時間、提取次數(shù)。結(jié)果:最佳提取工藝為:加水量為藥材量的30倍,煎煮2次,每次90min。結(jié)論:優(yōu)化工藝合理、穩(wěn)定,重現(xiàn)性好,為痛風安膠囊的生產(chǎn)提供試驗依據(jù)?!娟P(guān)鍵詞】痛風安膠囊;正交試驗;總黃酮;提取工藝  痛風安膠囊是由玉米須、土茯苓、薏苡仁、茯苓、木瓜等數(shù)味中藥組成,具有清熱解毒、利水滲濕、通利關(guān)節(jié)等作用。土茯苓、玉米須為該方的主要組成部分,本實驗以這兩種藥的提取

2、工藝為主要研究對象,以總黃酮的含量為考察指標,對痛風安膠囊的生產(chǎn)工藝進行了研究?! ?儀器與材料  1.1儀器  PELab-125型紫外-可見分光光度計(美國PE分析儀器廠)、恒溫水浴鍋(江蘇省醫(yī)療器械廠)、EX-2000B電子天平(中外合資沈陽龍騰電子稱量儀器有限公司)、萬分之一FA1004電子天平(上海天平儀器廠)、101-1A型數(shù)顯式電熱恒溫干燥箱(上海陽光實驗儀器有限公司)。1.2藥品  蘆丁對照品(中國藥品生物制品檢定所,10080-200301),實驗所用試劑均為分析純,所用水為蒸餾水。  2方法與結(jié)果  2.1正交實驗設(shè)計  以所得

3、浸膏量和玉米須總黃酮含量為考核指標,按4因素3水平進行正交試驗。因素與水平列表見表1。表1水煎L(略)  2.2吸水率的測定  分別用天平稱取1.50原處方的土茯苓和玉米須,即土茯苓10g和玉米須8g,放入1000ml的燒杯中,用量筒加入600ml水,使水沒過藥材,放置過夜。次日濾過,用量筒收集濾液,得到濾液體積,計算得到吸水量。通過測量和計算,土茯苓和玉米須的吸水率為417%。2.3供試樣品的制備  取土茯苓10g,玉米須8g,精密稱定,置于容器中,按正交試驗表(見表1)進行試驗。煎煮后放置30min,濾過,濾液適當濃縮至250ml容量瓶中,加蒸

4、餾水定容至刻度,搖勻,即得,備用。2.4對照品溶液的制備取蘆丁對照品適量,加50%乙醇制成每1ml含1mg的溶液(實際稱樣量9.18mg,置100ml量瓶中,用50%乙醇溶解并稀釋至刻度,搖勻。每1ml含蘆丁0.918mg)。2.5標準曲線的繪制[1、2]  精密吸取對照品溶液0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5ml于25ml容量瓶中,用50%乙醇溶液補充至約12.5ml,加入5%的亞硝酸鈉溶液0.7ml振蕩搖勻,靜置5min;加入10%硝酸鋁溶液0.7ml,振蕩搖勻,靜置6min;加入1mol.L氫氧化鈉溶液5ml,振蕩搖勻,加入50%的乙

5、醇溶液至刻度,靜置10min;照分光光度法(中國藥典2005年版一部附錄VB),以第一管做空白,在500nm波長處測定吸收度,以對照品加入量為橫坐標,吸收度為縱坐標。所得標準曲線回歸方程為y=0.1174x+0.0187,r=0.9991。線形范圍為0.459~2.295mg?! ?.6總黃酮含量測定(比色法)[3]  精密吸取合供試品溶液10ml,用水飽和的正丁醇提取3次,每次20ml,合并正丁醇層,蒸干,殘渣用50%的乙醇溶液溶解,轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中,加50%的乙醇至刻度,振蕩搖勻,備用。精密吸取上述各提取液1ml,置25ml容量瓶中,用50

6、%的乙醇溶液加至12.5ml,按標準曲線制備步驟操作,計算總黃酮的含量,見表2、表3。表2總黃酮含量L(略)表3總黃酮含量方差分析表(略)  表2、表3結(jié)果表明,以總黃酮的含量為指標,提取次數(shù)有顯著性,即提取次數(shù)>加水量>提取時間,最佳工藝為A2B2C3。即用30倍的水,煎煮2次,每次90min?! ?小結(jié)  通常情況下,用水為提取媒介的提取工藝一般選用的加水量不超過15倍。因為玉米須為絲絮狀,并且質(zhì)地蓬松,體積較大,所以只有加大量水方能使水沒過藥材,使提取充分,減少提取的損失。根據(jù)預試驗,需最少加水量為原藥材的20倍方能使液面沒過藥材

7、,再考慮到實際生產(chǎn)情況,因此,選擇的加水量的水平為20倍、25倍和30倍。該項試驗,選擇以蘆丁作為對照品,用比色法來進行總黃酮的含量測定,方法準確?!緟⒖?/p>

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